Показатели секреторного иммунитета слюны при формировании никотинозависимости у студентов

Табакокурение продолжает оставаться одним из признанных и распространенных факторов риска развития хронических заболеваний середечно-сосудистых и бронхолегочных заболеваний. Основные патологические события при воздействии курения развиваются на уровне слизистых мембран бронхов, защита которых от чужеродных веществ антигенного и аллергического характера осуществляется бронхоассоциированной лимфоидной тканью (БАЛТ). Воздействие табачного дыма на слизистые мембраны приводит к нарушению функции реснитчатого эпителия и БАЛТ, в результате чего происходит нарушение мукоцилиарного транспорта чужеродных агентов и снижение продукции иммуноглобулинов, осуществляющих про-тивомикробную защиту респираторного тракта [7].

В последние годы большое значение в развитии патологии бронхов придается провоспали-тельным эффектам табакокурения. Доказано, что длительное и интенсивное курение приводит к развитию ХОБЛ. В связи с этим представляет интерес не только анализ изменения противомикроб-ных механизмов иммунной защиты под влиянием курения, но и выявление роли эндогенных механизмов воспаления иммунного происхождения на топическом уровне. Весьма перспективным направлением в этой области является использование неинвазивных методов оценки показателей иммунитета в таких материалах, как бронхоальвеолярный лаваж, мокрота, конденсат выдыхаемого воздуха, слюна. Слюна является смешанным секретом больших и малых слюнных желез, а также мукозо-ассоциированной лимфоидной ткани (миндалин, бронхов) и все шире применяется в медицине в качестве диагностической жидкости для определения в ней различных белков с помощью современных чувствительных инструментальных методов [8]. В нашей работе мы используем слюну для анализа изменений цитокинов и нитроксидер-гических процессов на уровне верхних дыхательных путей, исходя из ключевой роли цитокинов (TNF-o. IL-8) и оксида азота в качестве эндогенных медиаторов воспаления, продуцируемых разными клетками организма, включая иммунные [6, 9,11].

Целью исследования - анализ изменений уровней провоспалительных цитокинов (TNF-a, IL-8), а также конечных стабильных метаболитов NO в слюне у молодых лиц с никотиновой зависи мостью и их коррекции под влиянием комплекса физиотерапевтических факторов.

В последние годы в ряде исследований показана высокая эффективность использования физиотерапевтических «Alphamassage-капсул» в реабилитации, в «очищении внутренней среды» и рекомендуются к практическому применению программ различной направленности также при табакокурении (ТК) [1].

Специфика формирования и развития реакции организма на воздействие механическими вибрациями во многом преопределяется физическими особенностями этого раздражителя. Принцип избирательности при действии механических колебаний различных . частот распространяется не только на молекулярном уровне, но и на уровне клетки, тканей, целостного организма [2, 3,4].

В последние годы выяснилось, что регуляторная роль цитокинов в организме не ограничивается только иммунным ответом, а может участвовать в регуляции защитных реакций организма на местном и системном уровнях, регуляции процессов регенерации для восстановления повреждающих тканей [5, 8, 10].

Методика

Исследование проведено на базе медицинского центра профилактики и оздоровления Челябинского государственного педагогического университета. Иммунологические исследования проводились на базе кафедры клинической иммунологии Челябинской государственной медицинской академии.

В исследование было включено 60 курящих студентов в возрасте 18-22 года, средний возраст 20,7±0,47 лет, из них мужчин 20, женщин 40 пациентов. К курящим, согласно рекомендациям ВОЗ, относили лиц, курящих ежедневно или эпизодически. Группу контроля составили 30 здоровых некурящих пациентов. Группы курящих и некурящих были сопоставимы по возрасту и полу.

Всем пациентам было проведено комплексное обследование, которое включало: заполнение анкеты, реабилитационного листа, определение индекса курения, типа курительного поведения по анкете Д.Хорна. Анкета Д. Хорна предназначена для само-заполнения, состоит из 18 вопросов (3 блока по 6 вопросов). Ответ на каждый вопрос оценивался по 5-ти балльной шкале. При сумме баллов Ни более, доминирующим является тип курения - «стимуляция». При сумме баллов от 7-11 соответствующий

Физиология двигательнойактивности и спорта

тип курения является компонентом смешанного типа курительного поведения.

Степень никотиновой зависимости определяли по Фагерстрему (ТФ): 0-4 балла - слабая зависимость, 4-6 баллов - умеренная никотиновая зависимость, 7-10 баллов - высокая зависимость. Исходные иммунологические показатели слюны проводили у курящих пациентов в сопоставлении со здоровыми, некурящими лицами того же возраста. Повторное определение этих показателей проводили в слюне курящих после курса физиотерапевтической реабилитацтии с помощью капсулы «А1-phamassage-ЗЗ». Взятие слюны у пациентов осуществляли по единой методике в утренние часы при отсутствии признаков острого воспаления в ротовой полости и верхних дыхательных путях [7].

Количество IL-8 и TNF-a в слюне определяли методом иммуноферментного анализа набором реагентов фирмы ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск. Реакцию учитывали спектрофотометрическим методом на аппарате «Multiscan plus» при длине волны 490 нм и 450 нм.

Определение уровня уровня оксида азота проводили по суммарному содержанию терминальных стабильных метаболитов ( нитритов и нитратов), спектрометрическим методом в слюне) с помощью модификации метода Griss (Коробейникова Э.Н., 2000 ). Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с применением программы Excel 7,0 в соответствиями с правилами вариационной статистики. Достоверность считали значение при р<0,05.

ма тканей. Вибромассаж стимулирует соматические и вегетативные функции, вызывает возбуждение вегетативных центров. Происходит усиление и углубление дыхания, увеличение фильтрационной способности почек, которая приводит к детоксикационной направленности, что очень важно при табакокурении. При тепловом воздействии активируется образование цитокинов и других биологически активных веществ [3,4].

Результаты и их обсуждение

В период исследования у всех 90 пациентов отсутствовала респираторная симптоматика. Анализ анкет группы курящих показал, что индекс курения (ИК) составил 112,8, число выкуриваемых сигарет - 9,4±1,2 сигарет/сутки, стаж курения был 5,42±1,36 лет. Слабая степень никотиновой зависимости по ТФ у курящих составила (2,3±0,13) балла, умеренная - (4,76±0,12), высокая -(7,35±0,06) р< 0,05. Таким образом, несмотря на молодой возраст, в группе курящих пациентов стаж курения составлял более 5 лет. Тип курительного поведения по анкете Д. Хорна в большинстве случаев у 60% носил смешанный характер - «стимуляция», «поддержка». Большая часть обследованных мотивировало курение необходимостью снятия нервного напряжения.

Как видно из таблицы результаты определения уровня провоспалительных цитокинов в слюне у обследуемых пациентов показали, что в слюне у курящих пациентов содержание IL-8 достоверно, приблизительно в 1,5 раза, превышает значение этого показателя у некурящих в группе контроля.

Изменение показателей секреторного иммунитета слюны под влиянием термовибрационного массажа при никотинозависимости (М±т)

Показатель	Контроль - некурящие(п=30)	Группа курящих (п=60)
		до лечение	после лечения
IL-8 нг/мл	40,81±2,15	64,71±1,77*	46,15±0,41**
TNF-a пг/мл	0,04±0,02	6,05±0,11*	3,11±0,35**
Оксид азота мкмоль/л	—	—	—
no2	1,53±0,07	2,4±0,85**	0,64±0,05*
NO	11,40±0,40	19,62±0,81**	8,26±0,20*
NO3	10,07±0,35	16,14±0,76**	8,08±0,33*

Примечание. р*<0,001 - достоверность различий между показателями основной и контрольной групп до лечения; р**< 0,002 - достоверность различий между показателями основной и контрольной групп после лечения.

Для влияния физиотерапевтических факторов использовалась реабилитационная установка -капсула «Alphamassage - 33» производства Sybaritic (США) с выбранной программой сочетания сразу несколько эффективных восстановительных методик: массажных вибраций на область спины, поясницы, конечностей с вибрацией средней интенсивности - 50 Гц и термовоздействий (сухая сауна) со средним подогревом - 65 °C. Проводили 6 процедур ежедневно продолжительностью 30 минут. Основанием для комплексного применения вибромассажа и термотерапии (сухая сауна) являются их положительное влияние на функциональное состояние организма и улучшение метаболиз-

Уровень TNF-a на три порядка превышал у курящих значение показателя в слюне у некурящих (р< 0,05). Уровень конечных стабильных метаболитов NO у курящих был достоверно выше, чем у некурящих и составил: NO2 - 2,4±0,85 мкмоль/л, NO - 19,62±0,81, NO3 - 16,14±0,76 (р<0,002). Полученные данные свидетельствуют о росте эндогенного провоспалительного потенциала слюны, связанного с цитокинами.

После проведения реабилитационной программы происходит падение количества IL-8 в слюне до 46,15±0,42 нг/мл, то есть практически до уровня здоровых, некурящих пациентов. Базовый уровень TNF-a в слюне под влиянием термовиб-

‘ Вестник ЮУрГУ, № 3,2006

Колесник М.А.

Показатели секреторного иммунитета слюны при формировании никотинозависимости у студентов ромассажа снизился вдвое (до 3,11±0,35 против 6,05±0,11) при р< 0,002, но при этом не достиг уровня у некурящих. Эти изменения отражают высокую вероятность влияния никотинозависимости на уровень продукции провоспалительных цитокинов клетками БАЛТ.

В результате проведенного низкочастотного вибромассажа в сочетании с теплотерапией (сухая сауна), выявлено снижение уровня NO в слюне молодых курильщиков после 6 процедур лечения до 8,26±0,20, а также достоверное изменение показателей NO2 и NO3 до 0,64±0,05 и 8,08±0,33 соответственно, в сравнении с контрольной группой (р< 0,001). Изменения концентрации NO и его метаболитов в слюне могут иметь защитное значение для синусов и верхних дыхательных путей, так как NO токсично для бактерий, паразитов, вирусов.

Таким образом, включение в комплекс реабилитационных мероприятий термовибромассажа способствует коррекции дисфункции некоторых факторов местной иммунной защиты при никотинозависимости.