Получение клонированных эмбрионов крупного рогатого скота с использованием ядер соматических клеток и энуклеированных ооцитов, дозревавших in vitro

С использованием в качестве источника кариопластов клеток кумулюса коров определяли условия и режим проведения основных этапов клонирования: дозревания ооцитов in vitro; реконструирования клеток; слияния кариопласта с цитопластом; активации реконструированных клеток; культивирования реконструированных эмбрионов до стадии бластоци-сты. Реконструированные клетки активировали кальциевым ионофором с последующей обработкой 6-диметиламиноггурином через 0,5-1,5 ч после электрослияния и культивировали in vitro (в среде DMEM на фидерном слое из клеток кумулюса под газовой фазой 5% С02 в воздухе или в среде KSOM, обогащенной заменимыми и незаменимыми аминокислотами, под газовой фазой 5% С02, 5% 02, 90% N2). Разработанная технология позволяет получать 20,3-23,6 % клонированных эмбрионов крупного рогатого скота на стадии бластоцисты.