Поверхностные воды, как приёмник нефти и нефтепродуктов

На протяжении многих лет ученые изучают загрязнение водной среды, прослеживают ее динамику, ведут поиск наиболее эффективных и экономических путей решения проблемы загрязнений. Главная сложность в поиске наиболее эффективного метода очистки гидросферы состоит в том, что водные ресурсы подвергаются комплексному загрязнению, из которого можно выделить: химическое, тепловое и бактериальное. Все перечисленные виды загрязнения являются главными и наносят ущерб экологии и сложно выделить, какой из них более опасен. Из большого количества загрязняющих веществ, поступающих в водную среду, хотелось бы выделить нефть и нефтепродукты, которые на сегодняшний день являются распространёнными, нанося большой вред, а вопрос очистки от этих загрязнений одним из самых сложных, многоплановых и наиважнейших в аспекте охраны водных ресурсов [1, 2].

Об экономической выгоде от добычи и транспортировки нефти знают все. Как только заходит речь о строительстве нового нефтепровода или увеличении объемов транспортировки нефти, жителям регионов начинают рассказывать о выгодах, которые получит регион, а значит, и его население. Упоминаются создание новых рабочих мест, рост экономического развития области и благосостояния ее жителей. Не принято только говорить о негативных последствиях этого развития: о потенциальных рисках для компонентов экосистемы, возможных авариях, и главное о том, кто, как и за чей

Иванов Анатолий Васильевич, доктор медицинских наук профессор, кафедры гигиены, медицины труда с курсом медицинской экологии

счет будет эти последствия устранять. По оценкам RBC daily, каждый год при добыче и транспортировке теряется от 3 до 7% добываемой нефти. Экологи уверяют, что реальные объемы нефтяных загрязнений скрываются, но даже по самым скромным подсчетам они достигают 10-20 миллионов тонн нефти в год [ 3 ]. С момента утечки до начала работы по локализации нефтяного загрязнения распространение ее по водоему обычно уже завершается, т.е. зона загрязнения приобретает максимальные размеры и определенную форму. Как только нефть попадает в водоем, аборигенные УОМ приступают к разложению в первую очередь легких и ароматических углеводородов, выделяя в окружающее пространство бактериальную полисахаридную слизь, обладающую свойствами диспергатора, что способствует образованию стойких эмульсий [4, 5].

Таким образом, имеющиеся литературные данные, касающиеся загрязнения окружающей среды нефтяными углеводородами, показывают актуальность проблемы восстановления нефтезагрязнённых объектов [6]. Последние годы в зарубежной и отечественной практике находят применение биологические методы очистки природных и сточных вод, сочетание которых с традиционными методами позволяет получить гарантируемое качество воды [5-8]. Биологический метод, в свою очередь, направлен на повышение активности естественных процессов микробного разложения поллютантов, а также на введение моно- и поликультур бактерий, грибов и дрожжей, способных утилизировать загрязняющие вещества, даже патогенные микроорганизмы [9]. Из литературных источников следует, что компоненты нефти, включая асфальтены, подвергаются катаболизму природными микроорганизмами. Активация процессов естественного самоочищения, в основе которого лежит деятельность УОМ, путём создания оптимальных условий, приводит к разрушению углеводородов. Следует отметить, что при оптимизации условий среды in siti на микрофлору оказывается ненаправленное воздействие. Вполне вероятна ситуация, когда в результате ненаправленной стимуляции доминирующее положение в микробном сообществе займут либо бактерии с низким углеводородокисляющим потенциалом, либо близкие в физиологическом отношении бактерии, что приведёт к конкуренции между ними и снизит темпы утилизации углеводородного субстрата в результате взаимного подавления. Поэтому необходимо выявлять и направленно стимулировать при помощи сбалансированного внесения микро- и макроэлементов доминирующие популяции бактерий, обладающие ярко выраженной угле-водородокисляющей активностью. В связи с этим целесообразно в серии предварительных экспериментов выявить оптимальные условия культивирования для нескольких доминирующих штаммов и осуществлять внесение этих элементов согласно полученным данным. Таким образом, стимулируется лишь конкретная группа нефтеокисляющих микроорганизмов, что приводит к интенсификации процессов биоремедиации.

Сведения, приведённые в обзоре литературы, показывают, что исследователи во всём мире уже не один год занимаются поиском, выделением микроорганизмов, способных окислять углеводороды, тем самым обеспечивать восстановление разрушенных экосистем. Одни авторы пытаются получить «супер» культуру, способную за короткий срок деградировать любой загрязнитель, другие концентрируют внимание на создание условий, в которых произойдёт быстрое самовосстановление нефтезагрязнённого объекта, третьи отдают предпочтение биопрепаратам и т.д. Мы же попытались найти индивидуальный подход к каждому объекту с целью повысить эффективность проводимых работ и уменьшить материальные затраты, для чего, по нашему мнению, нужно грамотно комбинировать создание оптимальных условий в очищаемом объекте с использованием индивидуальных штаммов микроорганизмов с известными свойствами.

Известно, что в процессе ликвидации нефтяных загрязнений более эффективны микрофлоры, адаптированные к водным условиям. Ее количество из-за общего ухудшения условий местообитания резко снижается, поэтому в целях повышения эффективности процесса биодеградации нефти возможно обогащение водной среды углеводородокисляющей микрофлорой, выращенной на искусственных минеральных средах, содержащих нефть, и создание благоприятных условий после её внесения для сохранения жизнеспособности. Один из способов интенсификации процесса биодеструкции поллютантов – интродукция высокоактивных микроорганизмов-деструкторов в загрязненный объект. В качестве источника микроорганизмов, имеющих потенциал к метаболизму ксенобиотиков, были выбраны сточные воды очистных сооружений ОАО «Казаньоргсинтез».

Для того чтобы можно было регулировать активность, а также предвидеть и изменить по желанию состояние используемых нефтеокисляющих бактерий, нами проводилось изучение особенностей их роста на минеральной среде Мюнца с нефтью, бензином, соляровым и машинным маслом в качестве единственного источника углерода и энергии. Знание закономерностей роста исследуемых культур позволит интродуцировать их в нефтезагрязнённый объект, а также использовать их в процессе биодеградации углеводородных загрязнений в промышленных условиях. Температура и аэрация среды в объекте, подвергаемом биоремедиации, может значительно колебаться в течение сроков проведения работ, что требует постоянного контроля и своевременного внесения корректив в процессе биодеградации. В связи с этим знание температурных оптимумов и кислородного режима УОМ, вовлекаемых в процесс биодеградации, может существенно интенсифицировать процесс биологической очистки нефтезагрязненного объекта от углеводородов. Интересно, что микроорганизмы могут быть высоко активны как по отношению к одному, так и к нескольким субстратам, поэтому в опытах использовали монокультуру и сообщество микроорганизмов [7].

Культуры УОМ исследовали на предмет способности разрушать нефть, бензин, соляровое и машинное масла в диапазоне температур 20-370С в условиях аэрации. Поставленные задачи решались в два последовательных этапа: а) проведение экспериментов по биодеградации различных классов углеводородов нефти аборигенными УОМ (табл. 1); б) изучение влияния условий среды (температура 23, 28, 370С и аэрация) на эффективность процесса биодеградации нефти и нефтепродуктов (табл. 2, 3).

При исследовании биологической деградации различных классов углеводородов нефти аборигенными УОМ и изучении влияния условий среды на оптимизацию процессов биоокисления было установлено следующее: на эффективность и скорость деструкции нефти и нефтепродуктов влияют состав и виды микроорганизмов, с которыми они контактируют. Степень окисления нефтепродуктов максимальна при участии большого количества нефтеокисляющих бактерий, что оценивается по увеличению оптической плотности среды. Максимальна она при использовании смешанных видов бактерий, в присутствии трех культур уменьшается, а в среде с одной монокультурой она минимальна. Исключение составляет опыт с бензиновой фракцией, растворимость которой максимальна по сравнению с другими применяемыми углеводородами, что облегчает транспорт молекул в клетку и его окисление. Эффективность деструкции бензина достигает

90% при применении трёх культур, что связано, по-видимому, с избирательностью использования этими УОМ лёгких фракций нефти. Кроме того, более высокая эффективность применения сорциума культур объясняется и сложностью субстрата, каковым является товарная нефть и масла (табл. 1).

Таблица 1. Эффективность деструкции нефтяных загрязнений сообществами нефтеокисляющих микроорганизмов в стационарных условиях, %

Примечание: * - количество остаточных нефтепродуктов г/дм³; ** - эффективность. * - различия достоверны по отношению к контролю, (P <0,01).

Таким образом, показано, что разрушение углеводородов нефти протекает за счёт биологического окисления и активности, участвующих в окислении нефти УОМ, и зависит от растворимости нефтепродуктов в водной среде. Окисление углеводородов идет по формуле:

СПН 2П+2 + 1.50 2 ^ C n-1 H (2n+2)-2 + CO 2 + H 2 O, причем окисление происходит по цепи реакций: предельных углеводородов ^ непредельные углеводороды ^ спирты ^ кетосоединения ^ жирные кислоты ^ углекислый газ и вода.

Из литературных данных следует, что нерастворимая плёнка нефти, находящаяся на поверхности воды, препятствует доступу в нее кислорода и света. Присутствие свободного кислорода является необходимым условием деструкции нефти любой химической структуры. Количество кислорода, расходуемое на окисление 1 мг различных углеводородов, варьирует от 3 до 4 мг [1]. Полученные нами в ходе исследований данные свидетельствуют о том, что процесс аэрации ускоряет рост численности УОМ, что отражается на эффективности деструкции нефтепродуктов. При этом зафиксировано увеличение степени окисления товарной нефти до 91%, бензина до 94%, солярового масла до 83%, машинного масло до 80% (табл. 2).

Таблица 2. Эффективность деструкции нефтяных загрязнений сообществами нефтеокисляющих микроорганизмов в условиях периодической аэрации, %

Известно, что температура среды так же, как и аэрация, оказывает значительное влияние на процесс биодеструкции нефти и нефтепродуктов и является наиболее значимым лимитирующим фактором всех метаболических процессов, определяющих скорость окисления нефти и нефтепродуктов, осуществляемых бактериями [1]. Микробиологическое разрушение нефти происходит при температуре от 2 до 700С, оптимальной для культивирования большинства мезофильных микроорганизмов, и биодеструкции ими нефтепродуктов считается интервал +20-+300С. Так как нефтепродукты богаты мембрано-токсичными компонентами, воздействие которых увеличивается при температуре свыше +300С, то они максимально деградируют при температуре менее +300С, то есть в мезофильных условиях +25-+280С. Но есть данные о способности отдельных видов бактерий к росту и деструкции нефти при более высоких температурах. Так, выделенные термофильные актинобактерии активно окисляют углеводороды при 50-600С [8]. Для естественных микробных сообществ, развивающихся в водоемах, оптимальная температура для микробиологического окисления углеводородов нефти обычно составляет от +20 до +370С. Поэтому исследования проводили в интервале температур 20-370С.

Таблица 3. Эффективность деструкции нефтяных загрязнений сообществами нефтеокисляющих микроорганизмов в стационарных условиях при разных температурах (С⁰)

Примечание: все значения достоверны по отношению к контролю (P<0,01).

Нашими исследованиями показано, что оптимальный температурный интервал для роста и развития используемых сообществ УОМ является 230С-280С. Это, в свою очередь, было констатировано ранее в работах [1]. Установлено, что при указанных температурных интервалах углеводороды разрушаются культурами, участвующими в эксперименте с эффективностью 80-91% (табл. 3). Максимальный уровень загрязнения снимается при t=280C. Отклонения от этой температуры как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения, замедляют процесс деструкции. Это связано с тем, что исследуемая группа УОМ является мезофильной и указанные температурные условия для них наиболее оптимальны. Следует также учесть, что при повышении температуры наблюдается уменьшение растворимости кислорода в воде, что отрицательно сказывается на росте и развитии сообщества бактерий.

Вывод: зная основные параметры роста и развития микробиологических сообществ, можно целенаправленно стимулировать их деятельность, достигая высокую степень биодеградации углеводородов разных классов.