Повреждение ДНК у больных раком шейки матки с наличием и отсутствием хламидийной инфекции

Роль Chlamydia trachomatic (Ch. tr.) как фактора риска развития цервикальной неоплазии широко обсуждается. Однако молекулярные механизмы, с помощью которых Ch. tr. может внести свой вклад в канцерогенез, до конца не установлены. Известно, что Ch. tr. инициирует активацию компонентов онкоген проводящих путей Ras-Raf-MEK-ERK [Gurumurthy R. К. et al., 2010; Vignola M. J. et al., 2010] и производство активных форм кислорода для поддержания своего развития [Abdul-Sater A.A. et al., 2010].

Цель. Целью данной работы явилась сравнительная оценка уровня поврежденности ДНК в лейкоцитах крови у больных раком шейки матки (РШМ) с сопутствующей хламидийной инфекцией и у неинфицированных женщин, как больных РШМ, так и без онкопатологии.

Материалы и методы. Одним из методов, позволяющих оценить повреждение ДНК, является клеточный щелочной гель-электрофорез (метод ДНК-комет). С использованием этого метода показана в частности роль вируса папилломы человека в вирус-индуцированном мутагенезе, приводящем к клеточной трансформации [Williams V. M., 2014]. Данный метод позволяет судить о модификации оснований ДНК, приводящих к образованию щелочелабильных сайтов. После проведения электрофореза (20 мин., 300мА, 20В, 2В/

202 Журнал «Злокачественные опухоли» • № 4, Спецвыпуск 1 – 2016 г. (21) •

ТЕЗИСЫ

ОНКОГЕНЕТИКА И ПАТАНАТОМИЯ

см, 4°С) препараты окрашивали в растворе этидиум бромида и микроскопировали на люминесцентном микроскопе Axio Imager M2, Zeiss при длине волны возбуждения 520 нм, волны эмиссии – 640 нм. На каждом микропрепарате анализировали не менее 200 клеток. В качестве показателя повре-жденности ДНК использовали процентное содержание ДНК в «хвосте» кометы (T%DNA). Оценка уровня повреждения ДНК была проведена у 12 больных РШМ и 13 женщин без онкопатологии. Данные анализировали с помощью приложений Exsel и Statistika 6.0 с использованием U-критерия Манна-Уитни и t-критерия Стьюдента.

Результаты. Согласно полученным данным у обследованных 8 больных РШМ, не инфицированных хламидиями, среднее значение T%DNA составило 4,35±0,63, значимо (р=0,012580) превышая на 53,7% величину данного показателя у женщин без онкологической патологии (2,83±0,20). У больных РШМ, инфицированных Ch. tr., T%DNA составил 10,44±0,11, что было статистически значимо выше, чем у больных РШМ без хламидийной инфекции – в 2,4 раза (р=0,000056) и здоровых женщин – в 3,7 раза (р=0,000000).

Таким образом, наличие хламидийной инфекции способствует более чем двукратному увеличению уровня поврежденности ДНК у онкогинекологических больных. Представленные результаты согласуются с данными, полученными ранее при исследованиях, проведенных на культурах клеток, согласно которым хламидии вызывают модификацию гистонов и двунитевые разрывы ДНК [Chumduri C. et al., 2013]. Повреждение ДНК может быть вызвано индуцируемым Ch. tr. снижением антиоксидантного потенциала, приводящим к образованию свободных радикалов (Yau Belinda et al., 2016). Данные, полученные нами при исследовании клеток крови больных РШМ, являются подтверждением роли хламидийной инфекции в повреждении ДНК, способствующем развитию злокачественного повреждения органов женской половой системы.