Практическое значение полимеразной цепной реакции для обнаружения и генотипирования Pasteurella multocida

Автор: Нефедченко А.В., Глотов А.Г., Глотова Т.И., Судоргина Т.Е.

Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета @vestnik-kgau

Рубрика: Ветеринария и зоотехния

Статья в выпуске: 7, 2019 года.

Бесплатный доступ

Представлены результаты изучения практической значимости способа выявления и определения принадлежности к генотипу патогенных вариантов культур бактерии Pasteurella multocida. Он включает проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующей электрофоретической детекцией, перенос продуктов амплификации на гель и анализ проведения реакции. Исследование проб проводят в двух реакциях с помощью подобранных пар олигонуклеотидных праймеров.Первая дает возможность обнаружить бактерию P. multocida и определить серогруппы А и D, а вторая - В, Ε и F. Чувствительность метода составила 103 КОЕ/мл и 105 КОЕ/г ткани соответственно. Этот способ выявляет и типирует бактерию P. multocida пяти капсульных групп - A, B, D, E, и F. Исследовать можно чистые и смешанные культуры, а так-же пробы биологического материала от животных. Геном бактерии выявили в 126 образцах, что составило 48,5 % от общего количества исследованных проб биоматериала. В113 (89,7 %) присутствовали бактерии капсульной группы А, а в 15 (13,3 %) - D...

Еще

Полимеразная цепная реакция, генотипирование, капсульные группы, крупный рогатый скот

Короткий адрес: https://sciup.org/140245639

IDR: 140245639   |   УДК: 619:616.98:579.843.95-07:636.2

Practical importance of polymerase chain reaction for the detection and genotipiving Pasteurella multocida

The results of the study of practical significance of the method of identifying and determining the genotype of pathogenic variants of Pasteurella multocida bacteria were presented. It included carrying out polymerase chain reaction (PCR) with subsequent electrophoretic detection, transfer of amplification products to the gel and analysis of the reaction. The study of samples was carried out in two reactions using selected pairs of oligonucleotide primers. The first made it possible to detect theP. multocida bacterium and determine the serogroups A and D, and the second B, Ε and F. The sensitivity of the method was 103 CFU / ml and 105 CFU / g of tissue, respectively. This method identified and typed the bacterium P. multocida of five capsular groups - A, B, D, E and F. One can examine pure and mixed cultures, as well as samples of biological material from animals. The bacteria genome was detected in 126 samples, which accounted for 48.5 % of the total number of studied biomaterial samples...

Еще

Список литературы Практическое значение полимеразной цепной реакции для обнаружения и генотипирования Pasteurella multocida

  • Глотов А.Г., Глотова Т.И., Петрова О.Г. и др. Распространение вирусных респираторных болезней крупного рогатого скота//Ветеринария. -2002. -№ 3. -С. 17-21.
  • Frank G.H. Bacteria as etiologic agents in bovine respiratory disease. In: Bovine respiratory disease. Ed. Loan R.W. College Station (TX): Texas A&M University Press; 1984. -P. 342-362.
  • Wilkie I.W., Harper M., Boyce J.D., Adler B. Pasteurella multocida: diseases and pathogenesis//Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2012. -Vol. 361. -P. 1-22.
  • Griffin D., Chengappa M.M., Kuszak J., McVey D.S. Bacterial Pathogens of the Bovine Respiratory Disease Complex//Veterinary Clinics of North America: Food Animal Practice. -2010. -Vol. 26. -P. 381-394.
  • Шегидевич Э.А. Роль пастерелл в респираторной патологии овец и крупного рогатого скота: дис.. д-ра ветеринар. наук. -М., 1993.
  • Глотов А.Г., Терентьева Т.Е., Нефедченко А.В., Глотова Т.И. и др. Гетерогенность пастерелл, выделенных от крупного рогатого скота на молочных комплексах//Ветеринария. -2014. -№ 12. -С. 23-26.
  • Adhikary S., Bisgaard M., Foster G. et al. Comparative study of PCR methods to detect Pasteurella multocida//Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. -2013. -Vol. 126. -P. 415-422.
  • Peng Z., Liang W., Wang Y. et al. Experimental pathogenicity and complete genome characterization of a pig origin Pasteurella multocida serogroup F isolate HN07//Vet. Microbiol. -2017. -Vol. 198. -P. 23-33.
  • Kim J., Kim J.W., Oh S.I. et al. Characterization of Pasteurella multocida isolates from pigs with pneumonia in Korea//BMC Vet Res. 2019. -Vol. 15(1). -P. 119.
  • Глотов А.Г., Глотова Т.И., Нефедченко А.В. и др. Типирование культур бактерии Pasteurella multocida, выделенных от крупного рогатого скота при помощи ПЦР//Сиб. Вестник с-х науки. -2013. -№ 2. -С. 88-93.
  • Нефедченко А.В., Шиков А.Н., Глотов А.Г., Глотова Т.И. и др. Разработка метода идентификации и генотипирования бактерий Pasteurella multocida и Mannheimia haemolytica на основе полимеразной цепной реакции и филогенетический анализ культур бактерий, выделенных от крупного рогатого скота//Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -2016. -№ 2. -С. 62-66.
  • Peng Z., Liang W., Wu B. Molecular typing methods for Pasteurella multocida-A review//Wei Sheng Wu Xue Bao. -2016. -Vol. 56 (10). -P. 1521-1529.
Еще