Применение озонохемилюминесценции для экспресс-диагностики мочевины в биологических жидкостях

Поиск адекватных показателей эффективности гемодиализа и разработка методов его мониторинга – одно из важнейших направлений в области развития методов заместительной терапии при терминальной почечной недостаточности.

Для определения степени очищения от мочевины, содержащейся в организме, используется индекс Дау-гирдаса. Он позволяет определить минимальную дозу диализа при стандартной трехразовой программе. Для определения мочевины в крови у пациента раз в месяц отбирают кровь до и после диализа. Определение показателя Kt/V по пробам крови в рутинной практике диализа длительно и трудоемко, а получаемые результаты далеко не всегда отражают истинное положение вещей, поскольку контроль процесса очищения организма от токсичных веществ при каждой процедуре гемодиализа в насто- ящее время невозможен. Важным вопросом в этой сфере остается создание индивидуального контроля за эффективностью гемодиализа при каждой процедуре [1 – 5].

Для решения проблемы контроля процесса гемодиализа предложено использовать метод озонохемилюминес-ценции (ОХЛ), применяемый для исследований растворенного органического вещества природных вод [6 – 8].

Таким образом, целью данного исследования является разработка бесконтактного экспресс-метод диагностики эффективности гемодиализа.

В группу исследования вошли 16 пациентов хронического гемодиализа, находящиеся на данном лечении от 6 до 14 лет. Гемодиализ проводили на аппаратах Вellco Formula 2000, Hospal Integra, Fresenius 4008 B .

Продолжительность гемодиализа составляла от 3,5 до 4,5 часов, скорость потока крови (230 – 270) мл/мин, скорость потока диализата 500 мл/мин.

Пробы отработанного диализата отбирали через 3, 10, 30, 60, 120, 180 минут от начала диализа и в конце процедуры.

У всех пациентов определяли вес, артериальное давление (систолическое, диастолическое, среднее), коэффициент ультрафильтрации, концентрацию креатинина, мочевины, калия, кальция, натрия и фосфата крови, а также степень снижения мочевины и эффективность гемодиализа, которую оценивали по величине дозы диализа (Kt/V).

Отбор проб производился из сливного крана аппарата «искусственная почка» в течение 20 секунд. Объем пробы составлял 100 мл. Проба не разбавлялась, анализ пробы производился в течение (2-3) часов после отбора. Озонолиз отработанного диализата проводили на анализаторе «OSM-2». Статистическая обработка материала выпол- нялась с использованием стандартного пакета программ прикладного статистического анализа (SPSS v10.0.7 for Windows) и программы EXCEL.

Анализатор предназначен для непрерывного контроля содержания органических веществ в природных и сточных водах и представляет собой регистратор оптического излучения, возникающего в результате химических реакций озона с содержащимися в исследуемой пробе органическими примесями.

Проведен озонохемилюминесцентный анализ диализата и получены кривые озонолиза. Получены кривые озонолиза, одна из которых приведена на рисунке 1. В качестве аналитических параметров использованы: интенсивность озонохемилюминесценции ( I ОХЛ ), возникающая при обработке пробы озоновоздушной смесью и общая площадь под кривой озонолиза, соответствующее интегральному показателю – суммарному содержанию растворенных органических веществ в пробе [2].

Рисунок 1. Кривые озонолиза

По полученным результатам значений максимальной интенсивности ОХЛ и

Применение озонохемилюминесценции для экспресс-диагностики мочевины в биологических жидкостях общей площади под кривыми озонолиза, построены графики зависимостей, представленные на рисунках 2 и 3.

Г.Л.М.         Д.Г.Н.          Ш.Б.И.

Д.К.В.          Р.А.А1         Р.Н.М.

П.М.П.         Р.А.А.8        К.А.П.

К.Н.А.          К.А.Н.          З.Э.Е.

Рисунок 2. Графики интенсивностей

Рисунок 3. Графики площадей

Выводы

Впервые в процессе исследования выявлено, что метод озонолитического контроля растворенного органического вещества может быть использован не только для мониторинга окружающей среды, но и в медицинских целях – для экспресс- контроля эффективности гемодиализа.

Исследованы процессы озонолитической деструкции рабочих растворов гемодиализа и определены их кинетические характеристики. Выявлено, что наиболее информативными параметрами являются интенсивность хемилюминесценции и площадь под кривой озонолиза.

Исследования показали высокую корреляцию между отношениями интенсивностей измеряемых величин и отношениями мочевины и креатинина, а также возможность получения оценки эффективности гемодиализа без забора крови у пациента по отработанному диализату, что очень важно для проведения гемодиализа.