Профиль метилирования цитозинов промоторной области гена GSTP1 в крови и моче больных раком простаты

Актуальность. В последние годы прирост заболевших раком предстательной железы (РПЖ) в мире составляет в среднем 3 % в год, что позволяет прогнозировать удвоение числа случаев заболевания РПЖ в 2030 г. Из-за отсутствия ранних клинических симптомов злокачественные опухоли простаты распознаются, как правило, на стадии генерализации онкологического процесса, что является причиной высоких показателей летальности больных РПЖ. Актуальной проблемой при онкологических заболеваниях ПЖ является разработка диагностических методов, обеспечивающих выявление предраковых заболеваний (облигатных и факультативных) и ранних стадий развития злокачественной опухоли. Показано, что метилирование промоторной области гена GSTP1 в опухолевых тканях с вероятностью 90 % коррелирует с РПЖ и, таким образом, является перспективным маркером этого заболевания.

Целью исследования является изучение профиля метилирования цитозинов в составе СрG-островков промоторной области гена GST-P1 во внеклеточной ДНК крови и мочи здоровых доноров, больных раком предстательной железы и доброкачественной гиперплазией простаты для разработки методов ранней диагностики заболеваний предстательной железы, основанных на ПЦР-анализе внеклеточных ДНК крови и мочи.

Материал и методы. В работе были использованы образцы ДНК, полученные от здоровых доноров, больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы и раком простаты. Профиль метилирования цитозинов в промоторной области гена GSTP1 исследовали при помощи секвенирования методом Сенгера внеклеточной ДНК мочи, плазмы крови и элюатов с поверхностей клеток крови после бисульфидной обработки.

Результаты. Выбор праймеров для анализа метилирования промоторной области гена GSTP1 обычно выполняется на основе данных о метилировании этого гена в клетках линии LNCaP, которое зачастую не совпадает с метилированием гена GSTP1 у больных. Нами было показано, что у больных раком предстательной железы в промоторной области гена GSTP1 ме- тилирование отличается от такового в клетках линии LNCaP, при этом профиль метилирования не отличается во фракциях циркулирующей ДНК и между больными РПЖ. Тем не менее наблюдаются отличия в сайтах и степени метилирования внеклеточной ДНК между исследуемыми группами больных пациентов и здоровых доноров.

Выводы. Полученные данные позволяют выбрать праймеры для разработки анализа, основанного на использовании внеклеточной ДНК и направленного на выявление метили- рованных цитозинов в составе CpG-островков промоторной области гена GSTP1. Литерату-трые данные о диагностическом потенциале внеклеточной ДНК и полученные нами данные о метилировании цитозинов в составе CpG-островков промоторной области гена GSTP1 при РПЖ позволяют надеяться на создание анализа, пригодного для ранней диагностики и мониторинга рака предстательной железы.

Работа поддержана грантом Фонда содействия отечественной науке.