Противовоспалительное действие сухого экстракта «Панкафит»

Препараты, получаемые из лекарственного растительного сырья, могут занять достойное место в комплексном лечении воспалительных заболеваний, поскольку наряду с достаточно выраженным противовоспалительным действием лишены известных побочных эффектов, присущих большинству синтетических средств [6]. Поэтому поиск новых растительных средств, обладающих противовоспалительным действием, является актуальной задачей [3].

Цель работы – определение противовоспалительной активности двухсоставного экстракта сухого (ЭС) из панцерии шерстистой и ортилии однобокой, условно названного «Панкафит», предназначенного для профилактики и лечения женских заболеваний и состоящего из трав пан-церии шерстистой и какалии копьевидной.

Методы исследования

Исследования проведены в летне-осенний период на 150 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 160–170 г., которых содержали в условиях естественного светового режима и на стандартной диете при свободном доступе к воде и пище. Из эксперимента животных выводили в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей.

ЭС «Панкафит» стандартизован по содержанию флавоноидов [9]. Для стандартизации «Панкафита» предложена спектрофотометрическая методика определения флавоноидов в пересчете на лютеолин.

При определении противовоспалительной активности данного средства использовали классические модели асептического воспаления, позволяющие оценить влияние «Панкафита» на основные стадии этого процесса, а также выявить некоторые аспекты механизма его противовоспалительного действия.

О характере влияния испытуемого средства на альтерацию тканей и интенсивность процессов регенерации судили по динамике заживления кожно-мышечного дефекта у крыс, индуци- рованного подкожным введением 0,5 мл 9%-ной уксусной кислоты с одновременным введением раствора декстрана в дозе 300 мг/кг массы животного [4]. Первое введение водного раствора ЭС «Панкафит» в дозе 100 мг/кг осуществляли внутрижелудочно за 1 час до введения флого-генных агентов, а затем ежедневно 1 раз в сутки на протяжении всего эксперимента (29 дней). Животные контрольной группы получали экви-объемное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме.

В качестве препарата сравнения другой группе крыс вводили деалкоголизированныи раствор спиртового экстракта календулы. Экстракт календулы вводили в изоэффективной дозе 100 мг/кг массы животного.

Площадь некротизированной ткани оценивали планиметрическим методом на 9-е и 29-е сутки эксперимента.

Оценку влияния «Панкафита» на экссудативную фазу воспалительной реакции проводили на моделях острого асептического воспаления у животных с использованием флогогенных агентов с различными механизмами противовоспалительного действия (формалин, декстран (СН3СООН), гистамин). Асептическое воспаление у крыс в соответствующих группах вызывали путем однократного субплантарного введения в заднюю конечность белых крыс 0,1 мл 3%-ного раствора формалина [8], 6%-ного водного раствора декстрана в объеме 0,1 мл [1] и 0,1%-ного раствора гистамина гидрохлорида в объеме 0,1 мл [5]. ЭС «Панкафита» и экстракт календулы в соответствующих группах животных вводили внутрижелудочно за 1 час до инъекции, а затем через 5 и 18 часов. Оценку антиэкссуда-тивного действия вычисляли, рассчитывая процент угнетения отека по отношению к контролю. Влияние «Панкафита» на образование фиброзно-грануляционной ткани осуществляли по методу Ф. Тринус и соавт. [6]: стерильные ватные шарики массой 15 мг имплантировали белым крысам под кожу в области спины в асептических условиях. Испытуемое средство и препарат сравнения вводили крысам внутрижелу- дочно с 1-го дня опыта в указанном объеме и дозах 1 раз в сутки в течение 7 дней. После этого образовавшиеся гранулемы взвешивали на аналитических весах в сыром виде (сразу после извлечения) и после высушивания (при 70 °С в течение 24 ч. до постоянного веса).

В работе использованы стандартный набор реактивов для биохимической лаборатории ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск, Россия).

Для оценки достоверности различий использовали t-критерий Стьюдента [2].

Результаты и их обсуждение

Результаты исследований показали, что при внутрибрюшинном введении больших доз ЭС «Панкафит» наблюдали признаки интоксикации, которые проявлялись в замедлении ориентировочной реакции, появлении тонико-клонических судорог. Животные погибали в течение 1-2-х суток. LD5o при внутрибрюшинном введении испытуемого экстракта составила 1960,0±60,77 мг/кг массы животных. При внутрижелудочном введении испытуемого экстракта в дозах до 10000 мг/кг гибели животных не наступало и не было отмечено явных признаков интоксикации. Полученные результаты позволяют отнести ЭС «Панкафит» к группе практически нетоксичных веществ по классификации К.К. Сидорова (1973) [7].

Как следует из данных, проведенных в таблице 1, ЭС «Панкафит» в указанном объеме оказывает противовоспалительное действие, о чем свидетельствует уменьшение степени альтерации тканей и повышение интенсивности регенераторных процессов в очаге воспаления. Введение белым крысам ЭС «Панкафит» оказывает антиальтеративное действие, снижая степень деструкции ткани при воздействии флогогенно-го агента. Так, на 9-е и 29-е сутки эксперимента площадь повреждения тканей снижается на 32 и 46% соответственно по сравнению с контролем (табл. 1).

Таблица 1

Группа животных	Площадь альтерации, см2
	9-е сутки	29-е сутки
Контрольная (СН3СООН+дист. вода) (п=10)	5,00±0,20	2,40±0,10
СН 3 СООН+спирт. экстракт календулы (п=10)	4,00±0,14*#	1,85±0,10*#
СНзСООН + «Панкафит» (п=10)	3,40±0,20*	1,30±0,22*

Примечание : здесь и далее различия статистически достоверны при Р ≤ 0,05.

Влияние «Панкафита» на альтерацию и регенерацию при остром асептическом воспалении у белых крыс

«Панкафит» оказывает существенное анти-экссудативное действие, о чем свидетельствует уменьшение выраженности отека конечности животных при асептическом воспалении, индуцированном формалином, на 47%, декстраном и гистамином – на 22% по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы (табл. 2). При этом антиэкссудативная активность «алкофоба» превосходит таковую у препарата сравнения – экстракта календулы.

Влияние «Панкафита» на образование грануляционно-фиброзной ткани в очаге воспаления у белых крыс

Таблица 2

Группа животных	Средняя масса сухих гранулем (мг)	Разность по сравнению с контролем (мг)	Степень стимуляции образования гранулемы (в%)
Контрольная группа (диет, вода) (п=10)	25,0±0,77		0

спиртовый экстракт календулы (п=10)	20,0±1,0*#	4,1	-6,4
«Панкафит» (п=10)	30,4=Ы,10*	5,4	+7,8

При определении влияния исследуемого средства на пролиферативную стадию воспаления установлено, что средняя масса соединительнотканной капсулы в очаге воспаления воз- растает на 7,8% по сравнению с показателями у животных с контрольной группы (табл. 3), т.е. обладает умеренным пролиферативным действием.

Таблица 3

Группа животных	Разность между объемами воспаленной и невоспаленной лапок	% угнетения отека
Формалиновый отек
Контрольная 1 (формалин+дист. вода) (п=10)	1,17±0,05	-
формалин+ спирт, экстракт календулы (п= 10)	0,98±0,05*	16,2
формалин+ «Панкак» (п=10)	0,82±0,72*#	38,5
Декстрановый отек
Контрольная (декстран+дист. вода) (п=10)	1,15±0,1	-
Декстран + спирт, экстракт календулы (п= 10)	1,09±0,Г	5,2 '
Декстран + «Панкафит» (п=10)	0,90±0,10*#	21,7
Гистаминовый отек
Контрольная (гистамин+дист. вода) (п=10)	0,45±0,01	-
Гистамин + спирт, экстракт календулы (п=10)	0,40±0,0Г	11
Гистамин + «Панкафит» (п=10)	0,35±0,0f#	22

Влияние «Панкафита» на экссудативную фазу воспаления у белых крыс

Таким образом, внутрижелудочное введение ЭС «Панкафита» в дозе 100 мг/кг массы крысам при остром асептическом воспалении оказывает антиальтеративное и антиэкссудативное действие, а также способствует ускорению регенерации, в результате чего наблюдается заживление ткани на более ранних сроках патологического процесса. Указанные эффекты подтверждают о наличии у испытуемого средства выраженной противовоспалительной активности.

Очевидно, что реализация указанного действия ЭС «Панкафита» обеспечивается высоким содержанием в нем биологически активных веществ, таких как флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, дубильные вещества, органические кислоты, тритерпеноиды, антоцианы, полисахариды и другие водорастворимые вещества [3]. Известно, что указанные биологически активные вещества оказывают антиоксидантное, мембраностабилизирующее, противовоспалительное действие. Этим можно объяснить указанное выраженное противовоспалительное действие ЭС «Панкафита».

Выводы

Внутрижелудочное введение крысам линии Wistar, ЭС «Панкафита» в дозе 100 мг/кг массы при остром асептическом воспалении сопровождается антиальтеративным и антиэкссудатив-ным действием, а также ускорением регенерации.