Противовоспалительное действие сухого экстракта спиреи иволистной

Воспаление - широко распространенный патологический процесс, сопровождающий практически каждое заболевание. Хорошо известны такие примеры тканевого воспаления, как пневмония, гепатит, нефрит, артрит и т.д. [7].

Из противовоспалительных средств нестероидные препараты прочно заняли свое место в медикаментозной терапии различных заболеваний, проявляющихся болью или воспалени ем . Их широкую распространенность обеспечило и отсутствие побочных эффектов, присущих опиатам : седации, угнетения дыхания и привыкания. Наиболее известные представители этой группы: аспирин, ибупрофен, диклофенак [6].

Расширение ассортимента растительных средств противовоспалительного действия для применения в медицинской практике остается актуальной задачей в медицине.

Одним из перспективных растений является спирея иволистная (Spiraea salicifolia L.). Она имеет широкое распространение на севере европейской части России, в Западной и Восточной Сибири, на Дальнем Востоке, а также в Средней Европе, Монголии, Китае, Корее, Японии, встречается и в Северной Америке. В Прибайкалье спирея иволистная встречается по берегам рек и ручьев, на лесных опушках и в подлеске даже заболоченных лесов. Это кустарник 1-2 м высотой с дугообразно изогнутыми, перекрученными светло-коричневыми ветвями и розовыми цветками в густых метельчатых соцветиях. Цветет с середины июня до поздней осени [3].

Исследования химического состава показали содержание в надземных органах спиреи флавоноидов, дубильных веществ, фенолкарбоновых кислот полисахаридов, кумаринов [5]. В народной медицине настой цветущих ветвей применяют при заболеваниях желудочнокишечного тракта, а также в гинекологии [3].

Содержание биологически активных веществ, обладающих широким спектром фармакологического действия, опыт применения в народной медицине и достаточная сырьевая база спиреи иволистной послужили основанием разработки из надземной части этого растения экстракта сухого.

Цель исследования

Изучить противовоспалительную активность сухого экстракта спиреи иволистной.

Материал и методы исследования

На первом этапе исследований сухой экстракт спиреи иволистной получали методом дробной мацерации в динамических условиях с использованием 40% спирта этилового. Состав полифенолов сухого экстракта спиреи иволистной изучали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Определение количественного содержание дубильных веществ проводили перманаганатометрическим методом, флавоноидов - методом дифференциальной спектроскопии с использованием реакции комплексообразования алюминия с хлоридом. Расчет процентного содержания суммы флавоноидов проводили в пересчете на рутин. Для количественного определения фенолкарбоновых кислот применяли метод прямой спектрофотометрии с использованием в качестве стандартного образца кофейную кислоту, так как максимум поглощения спиртового раствора экстракта сухого спиреи иволистной при 325 нм совпадает с кофейной кислотой. Спектральные исследования проводили на спектрофотометре СФ-46.

На втором этапе исследований оценку противовоспалительной активности изучаемого экстракта проводили на 60 крысах линии Wistar обоего пола массой 180-200 г, содержащихся на стандартном рационе питания при свободном доступе к воде и пище в условиях вивария. Исследования с животными проводились в соответствии с «Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей».

В эксперименте использовали методики изучения разных стадий процесса воспаления: альтерации – по И.А. Ойвину [9], экссудации – по Ю.Е. Стрельникову [10], пролиферации – по Ф.Н. Тринусу [8]. Сухой экстракт спиреи иволистной в дозе 10 мг/кг вводили крысам эн-терально в виде водного раствора в объеме 2 мл. Крысы контрольной группы получали дистиллированную воду в объеме 2 мл. В качестве препарата сравнения внутрижелудочно животным вводили отвар цветков ромашки аптечной (1:10) в объеме 2 мл.

Оценку влияния сухого экстракта спиреи иволистной на экссудативную фазу воспаления проводили путем однократного введения в лапку животного 0,1 мл 3% формалина. Исследуемые препараты вводили за 1 ч до инъекции, а затем через 5 и 18 ч. Оценку антиэкссу-дативной активности проводили онкометрическим методом.

О воздействии сухого экстракта спиреи иволистной на альтерацию тканей и интенсивность процессов регенерации судили по динамике заживления кожно-мышечного дефекта у крыс, вызванного подкожным введением в область спины 0,5 мл 9 %-ной кислоты уксусной с одновременным введением раствора декстрана в дозе 300 мг/кг массы животного. Первое введение препаратов осуществляли за 1 ч до введения уксусной кислоты, затем ежедневно 1 раз в сутки в течение 29 дней. На 9-е и 29-е сутки эксперимента оценивали площадь некротизированной ткани путем нанесения контура некроза на прозрачную пленку.

При изучении процесса образования фиброзно-грануляционной ткани стерильные ватные шарики массой 15 мг имплантировали крысам под кожу в области спины в асептических условиях. Изучаемые препараты вводили 1 раз в сутки в течение 7 дней. Затем образовавшиеся гранулемы взвешивали на аналитических весах сразу после извлечения и после высушивания (при 70 0С в течение 24 ч до постоянной массы).

Результаты эксперимента статистически обрабатывали при доверительной вероятности 95% [4].

Результаты исследований и их обсуждение

По результатам I этапа исследований установлено следующее. В химическом составе сухого экстракта спиреи иволистной установлено содержание следующих флавоноидов: лю-теолин-7-глюкозида, витексина, кверцетина, робинина, дигидрокверцетина, кемпферола. Из фенолкарбоновых кислот в экстракте сухом содержатся кислоты: галловая, хлорогеновая, кофейная, феруловая. Кроме того, в сухом экстракте содержатся танин, эпикатехин.

Количественное содержание дубильных веществ в экстракте сухом составляет 10,51%, суммы флавоноидов – 7,72%, суммы фенолкарбоновых кислот – 6,54%.

На II этапе исследований установлен фармакологический эффект изучаемого средства. Испытанная доза сухого экстракта спиреи иволистной оказывает антиэкссудативное действие, снижая отек лапки животных на 37 % по сравнению с контрольной группой. Отвар ромашки аптечной при этом снижает отек в 1,5 раза (табл. 1).

Таблица 1

Влияние сухого экстракта спиреи иволистной на экссудативную фазу воспаления (M±m), n=6

Группа животных	Разность между объемами воспаленной и невоспаленной лапок, мл
Контроль (H 2 O)	2,44±0,034
Ромашка аптечная	1,01±0,01
Спирея иволистная	1,55±0,10

Как видно из таблицы 2, сухой экстракт спиреи иволистной в дозе 10 мг/кг оказывает противовоспалительное действие, о чем свидетельствуют уменьшение степени альтерации ткани и повышение интенсивности регенерации процессов в очаге воспаления. Площадь повреждения тканей на 9-й и 29-й день уменьшается на 15 и 20 % соответственно. Отвар ромашки аптечной при этом оказывает более выраженное влияние на альтеративную фазу воспаления.

Таблица 2

Влияние сухого экстракта спиреи иволистной на альтерацию и регенерацию при остром асептическом воспалении (M±m), n=6

Группа животных	9-е сутки	29-е сутки
	Площадь некротизи-рованной тка- 2 ни, см	Площадь некротизи-рованной ткани, см2
Контроль (H 2 O)	5,50±0,20	3,26±0,10
Ромашка аптечная	4,43±0,10	2,03±0,20
Спирея иволистная	4,68±0,12	2,71±0,11

Результаты изучения влияния исследуемого лекарственного средства на стадию пролиферации представлены в таблице 3.

Таблица 3

Влияние сухого экстракта спиреи иволистной на пролиферативную фазу воспаления

(M±m), n=6

Группа животных	Масса образовавшейся грануляционно-фиброзной ткани, мг
Контроль (H 2 O)	93,80±1,54

Ромашка аптечная	99,65±2,17
Спирея иволистная	122,78±2,51

Процент стимуляции образования гранулемы под влиянием отвара ромашки составляет 6%. Стимуляция образования гранулемы сухим экстрактом возрастает, по сравнению с контролем, на 31%.

Обсуждение результатов

Проведено предварительное хроматографическое изучение соединений спиреи иво-листной, произрастающей на территории Иркутской области и сопредельных территориях, и использующейся в народной медицине при лечении заболеваний желудочно-кишечного тракта. Исследование показало, что спирея является перспективным растением для дальнейшего углубленного химического изучения. Установлено содержание следующих классов биологически активных веществ: дубильные вещества, суммы флавоноидов, суммы фенолкарбоновых кислот.

Известно, что воспаление - это патологический процесс, возникающий в ответ на повреждение (альтерацию) клеточных структур организма или действие патогенного раздражителя и проявляющийся в реакциях (экссудации), направленных на устранение продуктов повреждения и агентов (раздражителей), а также приводящий к максимальному для данных условий восстановлению (пролиферация) в зоне повреждения [1].

Полученные результаты в эксперименте на животных свидетельствуют о том, что сухой экстракт спиреи иволистной оказывает умеренное влияние на каждую стадию воспаления. Его относительно активное действие проявляется при экссудации и пролиферации.

Противовоспалительное действие сухого экстракта спиреи иволистной, вероятно, зависит от наличия суммы флавоноидов в химическом составе растения. Известно, что флавоноиды обладают противовоспалительным действием [2], которое может состоять из капилляро-и сосудоукрепляющего, антиоксидантного, мембраностабилизирующего эффектов.

Таким образом, сухой экстракт спиреи иволистной обладает умеренным противовоспалительным действием.

Выводы

• 1.    Установлено, что в спирее иволистной содержатся в химическом составе следующие классы биологически активных веществ: дубильные вещества, суммы флавоноидов, суммы фенолкарбоновых кислот.

• 2.    Сухой экстракт спиреи иволистной проявляет умеренную противовоспалительную активность.