Рациональное использование видов рода Hedysarum L., произрастающих в Самарской области

Род Hedysarum L. (сем. Fabaceae , Legumi-nosae ) насчитывает около 200 видов, из них в бассейне Средней Волги достоверно произрастает только три: копеечник крупноцветковый ( Hedysa-rum grandiflorum Pall.), копеечник Разумовского ( Н. razoumovianum Fisch. et Helm) и копеечник Гмелина ( Н. Gmelinii Ledeb.), два первых вида занесены в Красную книгу РСФСР [4, 7]. Растения, произрастающие, в Самарской области имеют свою экологию и биологию. H. grandiflorum Pall. – травянистый стержнекорневой многолетник высотой 15-35 см. Листья непарноперистые, с обеих сторон серебристо-волосистые. Венчики, беловатожелтые. Цветет в мае-июне. Размножение исключительно семенное [5, 6]. H. razoumovianum Fisch. et Helm – полукустарничек высотой 20-45 см, с многочисленными восходящими побегами. Стебли прижатоволосистые, с непарноперистыми листьями. Венчик бледно-розовый или лиловый. Цветет в июне [5, 6]. H. Gmelinii Ledeb. – многолетнее травянистое растение высотой 15-60 см. Стебли восходящие или прямостоячие, ребристые, покрытые густыми волосками. Листья сверху почти голые, снизу прижатоопушенные, яйцевидно-эллиптические. Венчик розово-пурпуровый. Окраска лепестков изменяется при смене субстрата: на мелах она ближе к палевому цвету, на известняках – к розовому. Цветет в июне-июле [5, 6]. По отношению к субстрату копеечники являются

Попова Ирина Александровна, аспирантка

Тарасенко Kюбовь Владимировна, ассистент кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии кальцефилами, произрастают в условиях карбонатных грунтов [3], в связи с этим они обычно встречаются в составе каменистых степей, кустарниковых опушек на известняковой, меловой, доломитовой, мергелистой литологии [1]. H. grandiflorum произрастает на меловых обнажениях и карбонатных почвах с недостаточной увлажненностью. Вид предпочитает открытые пространства с разреженным травостоем. H. razoumovianum встречается на каменистых склонах с крутизной 45-60 градусов, что превышает оптимальный уклон местообитаний копеечника крупноцветкового, либо виды соседствуют.

Популяция H. grandiflorum и H. Razou-movianum (с которой были собраны нами образцы для анализа) – Самарская область, Кинельский район, с. Преображенка, склоны пермских отложений Татарского яруса верхнепермской системы. На 100 м² простирается с востока на запад около 1 км, 55-60 особей. Популяция H. Gmelinii (с которой были нами собраны образцы для анализа) – Самарская область, Шигонский район. Окрестности Ле-вашовки, на меловых обнажения, за рекой Мазой (направление от Левашовки, популяция около 200м², около 40 особей, в цветущем состоянии).

Цель исследования: выявление перспективности использования видов рода Hedysarum , произрастающих в Самарской об-ласти, с дальнейшим выведением их в культуру.

Материалы и методы. Объектами настоящих исследований являлись: гербарные образцы и органы растений трех видов рода Hedysarum: H. grandiflorum Pall., H. Gmelinii Ledeb., H. Razou-movianum Fisch. Et Helm. Экземпляры растений заготавливались в период с июня по август 2010 г. в Кинельском районе Самарской области. Сушка сырья производилась естественным способом, под навесами, без доступа прямых солнечных лучей. В качестве сравнения использовали лист манго сухой (Аргентина, 2008 г.), достоверный образец манги-ферина полученный на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета. Для изучения возможностей диагностики видов копеечника использовали морфологический и анатомогистологический метод анализа. Изучение анатомии и гистологии образцов проводили при помощи световых микроскопов марки Motic: DM111, DM-39С-N9GO-A. Подготовка микропрепаратов осуществлялась по общей фармакопейной методике на траву [2]. В качестве методов выделения и идентификации химических структур из исследуемых образцов использовали: метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» в различных системах растворителей: хлороформ, этанол, вода, бутанол, ледяная уксусная кислота, препаративной колоночноч-ной хроматографии; метод спектроскопии и спектрофотометрии проводился на спектрофотометре “Specord 40” (Analytik Jena) в кюветах с толщиной слоя 10 мм, в качестве раствора сравнения использовали спирт этиловый 95%.

Результаты и обсуждение. Сравнительное ТСХ исследование водно-спиртовых извлечений из органов Н. grandiflorum , H. Razoumovia-num, H. Gmelinii позволило выявить наличие в них структур фенольной природы, при этом доминирующее количество фенолов было обнаружено в листьях и цветках анализируемых объектов. Фенольную природу обнаруженных структур подтверждали на хроматограммах обработкой раствором диазобензолсульфокислоты (ДСК), при этом наблюдалось окрашивание пятен с R f = 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 в яркооранжевый цвет (рис. 1).

А                     Б

Рис. 1. Хроматограмма анализа органов H. Ra-zoumovianum : А – детекция пятен в видимой области спектра; Б – обработка реактивом ДСК .

1, 2, 3 – водно-спиртовые извлечение листа на 96%, 70%, 40% этиловом спирте; 4, 5, 6 – водно-спиртовые извлечения цветков на 96%, 70%, 40% этиловом спирте; 7, 8, 9 – водно-спиртовые извлечения из корней на 96%, 70%, 40% этиловом спирте

Сравнение с достоверно известным образцом ксантонового гликозида мангиферина позволило обнаружить сходную с ним структуру в листьях копеечника Разумовского. Анализ спектральных кривых показал наличие характерных максимумов поглощения для флавоноидов и ксантонов. Батохромный сдвиг, указывающий на наличие флавоноидных структур в объекте, сильно выражен в водно-спиртовых извлечениях из листьев и цветков всех видов копеечника (рис. 2).

Рис. 2. Спектральный анализ водно-спиртовых извлечений образцов цветов H. Gmelinii:

А – батахромный сдвиг электронного спектра, Б – дифференциальная кривая электронного спектра. 1 – извлечение из цветков H.G.на 70% этиловом спирте; 2 – извлечение из цветков H.G. на 70% этиловом спирте (+AlCl 3 )

Результаты спектрофотометрического определения количественного содержания флавоноидов в анализируемых объектах показали, что наибольшее их содержание имеет копеечник Разумовского в листьях – 3%, в цветках – 1,5%. Содержание флавоноидов в корнях всех, проанализированных видов копеечников не значительно и не превышает 0,2%.

Диагностика анатомо-гистологии позволила выявить отличия в строении близкородственных видов. При этом основным отличительным признаком на уровне анатомии и гистологии явилась петиолярная анатомия, позволившая выявить явные различия в строении рахиса исследуемых видов копеечников (рис. 3) [8, 9].

Выводы: проведены сравнительные хроматографические и спектроскопические исследования надземных и подземных органов копеечников. Выявлено наличие флавоноидных структур во всех анализируемых образцах, в частности, обнаружено присутствие мангиферина в листьях копеечника Разумовского. Проведенный анатомо-гистологический анализ позволил выявить отличительные признаки в строении близкородственных видов. Полученные данные фитохимического анализа свидетельствуют о перспективности дальнейших исследований по углубленному изучению химического состава видов копеечника, а также изучению возможностей введения их в культуру.

А

Б

Рис. 3. Поперечный срез рахисов листьев копеечников (х40): А – Hedysarum grandiflorum окраска раствором сернокислого анилина, Б – Hedysarum razoumovianum общий вид. 1 – эпидермис; 2 – паренхима первичной коры; 3 – колленхима; 4 – склеренхима; 5 – флоэма; 6 – ксилема; 7 – полость; 8 – клетки с пигментом; 9 – паренхима сердцевины