Радиационно-индуцированный «эффект спасения» в экспериментах на различных модельных объектах: феноменологические аспекты и возможные механизмы. Обзор

Автор: Когарко И.Н., Петушкова В.В., Когарко Б.С., Селиванова Е.И., Ктиторова О.В., Нейфах Е.А., Ганеев И.И., Кузьмина Н.С.

Журнал: Радиация и риск (Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра) @radiation-and-risk

Рубрика: Научные статьи

Статья в выпуске: 4 т.33, 2024 года.

Бесплатный доступ

В данной работе рассматриваются феноменологические аспекты недавно открытого общебиологического феномена - «эффекта спасения», при котором облучённые клетки или организмы проявляют биоположительную реакцию в результате действия сигналов обратной связи от контактирующих с ними необлучённых клеток/особей. Проведён анализ результатов, представленных в научных публикациях и полученных на различных экспериментальных моделях с применением первичных человеческих фибробластов (NHFL), нормальных дермальных фибробластов человека (NHDF), фибробластов эмбрионов Danio Rerio (ZF4), нормальных фибробластов лёгкого человека (W138); клеточных линий макрофагов и гепатоцитов человека (U9347 и HL-7702 соответственно), а также клеток «бессмертной» линии HeLa, меланомы человека (Me45), аденокарциномы лёгкого (A549). Показано, что индукция «эффекта спасения» зависит от комбинации клеточных линий, использованных в качестве облучённых мишеней и клеток-«свидетелей». Обсуждаются эффекты, полученные на модели эмбрионов Danio Rerio (исследования in vivo ). Рассматриваются механизмы, ассоциированные с индукцией «эффекта спасения» и растворимыми сигнальными факторами (химические мессенджеры), которые получают клетки/организмы как биологическую «помощь» в виде сигналов обратной связи, посылаемых необлучёнными клетками/особями. Обсуждаются пути реализации двух выявленных типов «эффекта спасения». Вид использованного ионизирующего излучения, его дозовый диапазон, спектр облучённых и необлучённых клеток, различные биологические конечные точки имеют решающее значение для того, чтобы дифференцировать или объединять два явления в один феномен. В будущем это будет иметь не только фундаментальное, но и большое практическое значение, связанное с разработкой лекарств, оптимизацией методов радиотерапии и улучшением результатов лечения онкологических больных.

Еще

Ионизирующее излучение, «немишенные эффекты», радиационно-индуцированный «эффект спасения», биологические модели, клеточные линии, модель эмбрионов danio rerio in vivo, радиобиология

Короткий адрес: https://sciup.org/170207409

IDR: 170207409   |   УДК: 576.53:57.085.23:539.1.047   |   DOI: 10.21870/0131-3878-2024-33-4-68-81

Текст научной статьи Радиационно-индуцированный «эффект спасения» в экспериментах на различных модельных объектах: феноменологические аспекты и возможные механизмы. Обзор

В последние 40-50 лет широко проводятся многогранные исследования по изучению эффектов ионизирующих излучений в различных группах людей: работников атомной промышленности, сотрудников медицинских учреждений (включая радиологов и радиационных техников), пациентов, подвергшихся воздействию диагностического облучения или лучевой терапии, а также жертв атомных бомбардировок. Многочисленные работы посвящены изучению действия радиации в различных дозах на лётчиков и космонавтов, а также жителей территорий с высоким естественным радиационным фоном [1].

Исследования последних 10-15 лет, проведённые с использованием различных экспериментальных моделей (культуры клеток, лабораторные животные), привели к обнаружению общебиологического феномена – «эффекта спасения» (radiation-induced rescue effect - RIRE) [2-5]. Последний представляет собой явление, при котором облучённые клетки или организмы прояв-

ляют биоположительную реакцию в результате действия сигналов обратной связи от контактирующих с ними необлучённых клеток/особей. Преимуществом такого взаимодействия является снижение количества радиационно-индуцированных повреждений ДНК в облучённых клетках.

«Феномен спасения» тесно связан с более широко изученным «немишенным эффектом» ионизирующего излучения, известным как радиационно-индуцированный «эффект свидетеля» (radiation-induced bystander effect - RIBE) [6-8]. Выявлены два механизма, лежащие в его основе: межклеточная коммуникация через щелевое соединение при наличии физических контактов между клетками/организмами и обмен растворимыми сигнальными факторами между ними через общую среду [3]. Растворимыми сигнальными факторами являются: фактор некроза опухоли ТNF- α [9], трансформирующий фактор роста β 1 (TGF- β 1) [10], Интерлейкин-6 [11], Интерлейкин-8 [12] и NO [13-18], а также АФК [19]. Те же самые сигнальные факторы характерны и для «эффекта спасения», причём, этот феномен, как уже сказано выше, заключается в биологической помощи, получаемой облучёнными клетками или организмами в виде сигналов обратной связи, которые посылаются неэкспонированными клетками/организмами [2].

Феноменология

Исследования in vitro . В качестве примера рассматриваемый в настоящей работе эффект может проявляться в уменьшении уровня радиационно-индуцированных повреждений ДНК. Chen и соавт. [2] наблюдали феномен, при котором клетки-«свидетели» посылали сигналы межклеточной обратной связи своим облучённым соседям, уменьшая, таким образом, негативные эффекты непосредственного воздействия радиации. «Эффект спасения», выявленный этими исследователями, характеризовался снижением показателей повреждённости генома облучённых клеток, а именно, уровня двухцепочечных разрывов ДНК, частоты микроядер, апоптотической гибели.

Ряд других исследователей Widal и соавт. [20] также наблюдали «эффект спасения» в облучённых клетках меланомы человека (Ме45), совместно культивируемых с необлучёнными клетками нормальных дермальных фибробластов человека. Desai и соавт. [21] выявили рассматриваемый феномен в облучённых клетках аденокарциномы лёгкого (А549), которые находились в контакте с необлучёнными нормальными фибробластами лёгкого человека (W138). He и соавт. [22] подтвердили «эффект спасения», индуцированный в результате совместного культивирования облучённых человеческих макрофагов (U937) и необлучённых гепатоцитов (HL-7702). Продемонстрированный «эффект спасения», по предположению авторов, опосредован циклическим аденозинмонофосфатом (сАМФ) через мембранный сигнальный путь. Lam и соавт. [23] также выявили «эффект спасения», возникающий в результате контакта облучённых и необлучённых клеток рака шейки матки человека (HeLa), доказав наличие сигнала спасения в среде их культивирования, при активации у последних пути ответа ядерного фактора NF-kB.

В 2011 г. Chen и соавт. [2] обнаружили «эффект спасения» (RIRE тип 1), характеризующийся уменьшением негативных эффектов в облучённых клетках-мишенях при получении сигналов обратной связи от клеток-«свидетелей». В работе оценивались следующие показатели: количество очагов белка p53 - 53BP-1, частота микроядер, уровни апоптотической гибели клеток и клеточной выживаемости.

В 2016 г. Fu и соавт. [24] выявили ещё один тип «эффекта спасения» (RIRE тип 2), при котором уровень повреждений, связанных с воздействием радиации, в облучённых клетках (клетках-мишенях), наоборот, увеличивался при взаимодействии с клетками-«свидетелями». В резу- льтате рассматриваются два типа «эффекта спасения». Под первым подразумевается явление, при котором повреждения в облучённых клетках снижаются за счёт взаимодействия с необлу-чёнными клетками-«свидетелями» либо со средой, в которой ранее культивировались неэкспонированные клетки. Второй тип «феномена спасения» - это явление, при котором возрастает повреждённость генома облучённых клеток в результате их взаимодействий с необлучёнными клетками-«свидетелями».

Далее Kong и соавт. в 2018 г. [25] отмечали, что комбинации клеточных линий (облучённые и необлучённые клетки), использованные в экспериментальной модели при выявлении «эффекта спасения» типа 2, технически отличаются от тех, которые использовались в исследованиях, продемонстрировавших «эффект спасения» 1-го типа. В 2018 г. Adrian и соавт . [26] сообщили об интересных потенциальных эффектах RIRE на традиционные показатели формирования колоний, которые впервые были введены Паком и Маркусом в 1956 г. [27]. Исследователи обнаружили, что при увеличении количества облучённых клеток их соответствующая выжившая фракция также возрастает. Таким образом, авторы предположили наличие «эффекта, подобного спасению, зависящего от плотности клеток» или, другими словами, «эффекта плотности клеток».

Кроме того, различные исследовательские группы учёных демонстрировали использование разных клеточных линий и разных видов ионизирующего излучения. От этой комбинации, как очевидно, изменяется конечный результат «эффекта спасения» в зависимости от типа облучённых и «свидетельских» клеток, дозы радиации и биологических конечных точек [2].

В 2007 г. Mackonis и соавт. [28] обнаружили повышенную выживаемость облучённых клеток при взаимодействии с клетками, подвергшимися воздействию радиации в низкой дозе. Это явление было названо «эффектом спасения» тип 3. Chen и соавт. [2] обсуждают разницу между рассматриваемыми эффектами 1-го и 3-го типов, подчёркивая, что при «эффекте спасения» 1 клетки-«свидетели» не облучались в отличие от «эффекта спасения» 3, где клетки-«свидетели» должны быть подвержены воздействию радиации в низкой дозе для регистрации рассматриваемого феномена.

В дальнейшем проводились исследования, которые подтверждали наличие «эффекта спасения» и вышеизложенных биологических конечных точек. Chen и соавт. [2] показали, что при контакте подвергшихся воздействию a -излучения NHLF клеток с клетками-«свидетелями» через 30 мин после облучения регистрировалось значительное увеличение числа 53ВР-1-положитель-ных очагов. В то же время, через 24 ч после экспонирования этот показатель в облучённых клетках значительно снизился. Наблюдаемые различия в проявлении «эффекта спасения» через 30 мин и 24 ч после радиационного воздействия вероятно связаны со временем, необходимым для репарации ДНК. Кроме того, эти авторы [2] показали, что через 24 ч после воздействия а -частиц на NHLF клетки увеличивается соотношение между числом двухъядерных клеток с микроядрами (МЯ) к их общему числу. В присутствии «свидетелей» индукция микроядер в облучённых клетках была значительно снижена, что может указывать на «помощь» клеток-«свидетелей», приводящую к снижению повреждённости генома, регистрируемой по микроядерному тесту.

Кроме того, количество облучённых апоптотических клеток, которые были аннексин-поло-жительными (FL-1H), было значительно увеличено через 72 ч после облучения. В то же время, значительно уменьшается уровень клеток-«свидетелей» с такой характеристикой [2]. Что касается анализа образования колоний, то выжившая фракция через 24 ч после облучения была ниже, хотя различия не были статистически значимыми. Эти результаты показывают, что контакт облучённых клеток с клетками-«свидетелями» приводит к уменьшению уровня радиационно-индуцированного апоптоза и росту выживаемости облучённых клеток.

Chen и соавт. [2] также подтвердили, что необлучённые клетки (NHLF) значительно снижают индукцию микроядер в облучённых клетках через 24 ч после облучения, что указывает на то, что клетки-«свидетели» могут «спасать» облучённые, трансформированные клетки.

Widel и соавт. [20] подтвердили «эффект спасения» на модели облучённых клеток меланомы человека (Ме45), совместно культивируемых с необлучёнными нормальными дермальными фибробластами человека (NHDF), проявляющийся в снижении частоты микроядер и выраженности апоптоза. Интересен факт, что необлучённые клетки Ме45 не «спасали» совместно культивируемые облучённые клетки этой же линии, а также NHDF клетки. Кроме того, не выявлены значимые проявления «эффекта спасения» в облучённых фибробластах при их взаимодействии с необлучёнными фибробластами этой линии. Полученные в этой работе результаты очевидно контрастировали с таковыми, опубликованными Chen и соавт. [2]. Расхождения, вероятно, связаны с разными типами и используемыми дозами ионизирующего излучения. Widel и соавт. [20] применили редкоионизирующее рентгеновское излучение в дозах 2 или 4 Гр, а Chen и соавт. [2] воздействовали на клетки а -частицами в дозах 20 или 40 сГр.

Widel и соавт. [20] обнаружили, что «эффект спасения» в облучённых клетках Ме45, совместно культивируемых с необлучёнными клетками NHDF, вероятно, связан со значительным снижением уровня АФК в облучённых клетках. Этот эффект не наблюдался при контакте облучённых и необлучённых клеток Ме45. Уровень АФК в экспонированных клетках NHDF, совместно культивируемых с необлучёнными клетками NHDF, был также снижен.

Desai и соавт. [21] обнаружили «эффект свидетеля» и «эффект спасения» в результате совместного культивирования клеток аденокарциномы лёгкого (A549) и нормальных лёгочных фибробластов человека (W-138) (микропучковые протоны, диаметр пучка - 2 мкм). Кроме того, исследуемая биологическая конечная точка определялась интенсивностью флюоресценции очагов Y -H2AX (на ядро клетки). Показано, что этот показатель в экспонированных клетках в присутствии необлучённых клеток значительно возрастает со временем. Такого рода наблюдения предполагают уменьшение протон-индуцированного повреждения ДНК в облучённых клетках.

В дальнейшем изучали участие щелевых взаимодействий (GJIC) в «эффекте спасения» в эксперименте с облучёнными клетками W138. Результаты позволяют предположить, что механизмы таких взаимодействий (GJIC) в этом «эффекте спасения» отсутствуют и, вероятно, растворимые факторы могут играть важную роль в регистрируемых эффектах [3].

Таким образом, по данным литературы «эффекты спасения» подтверждены в экспериментах с применением различных комбинаций облучённых клеток и клеток-«свидетелей», включая первичные фибробласты человека (NHFL) и клетки HeLa, клетки меланомы человека (Me45) и нормальные дермальные человеческие фибробласты (NHDF) [20], облучённые и необлучённые фибробласты эмбрионов Danio Rerio (ZF4); клетки аденокарциномы лёгкого (A549) [21] и нормальные лёгочные фибробласты человека (W138), макрофаги (U9347) и гепатоциты человека (HL-7702) [22], а также облучённые и необлучённые клетки «бессмертной» линии рака шейки матки человека (HeLa-клетки). Очевидно, данное разнообразие использованных клеточных линий и их комбинаций дало возможность показать реальность радиационно-индуцированного «эффекта спасения».

Изучены в эксперименте in vitro биологические конечные точки, определённые по показателям: количество очагов 53BP-1, число очагов γ -H2AX или интенсивность флюоресценции (на ядро клетки), частота микроядер, уровень апоптоза и деполяризации мембран митохондрий, клеточная выживаемость. Степень выраженности «эффекта спасения» (в % снижения радиационно-индуцированных эффектов в облучённых клетках) значительно варьировала в зависимости от типа клеток (облучённые и клетки-«свидетели»), от биологических конечных точек и от дозы облучения [3].

При отдельном рассмотрении каждого из вышеупомянутых факторов обнаружено, что при оценке числа очагов 53BP-1 в качестве биологической конечной точки величина «эффекта спасения» составляла около 13%. Оценка количества фокусов γ -H2AX или интенсивности флюоресценции (на ядро клетки) степень выраженности «эффекта спасения» составила от 62 до 89%. При использовании МЯ-теста обнаружено, что степень выраженности «эффекта спасения» составляет 33% при облучении в дозе 20 сГр и 25% при облучении в дозе 40 сГр [3].

Widel и соавт. [20] обнаружили, что через 24 ч после облучения клеток Ме45 в дозе 2 Гр степень выраженности «эффекта спасения» составляет 13% и 46% при контакте с необлучён-ными клетками-«свидетелями» Ме45 и клетками NHDF соответственно; 7% и 50% - через 48 ч после облучения, 7% и 63% - через 72 ч после облучения. При воздействии радиации в дозе 4 Гр выраженность рассматриваемого феномена составила соответственно 12% и 57% (через 24 ч после облучения), 4% и 47% (через 48 ч после облучения), 10% и 54% (через 72 ч после облучения). Полученные результаты подчёркивают важное значение величины дозы облучения для индукции «эффекта спасения».

Приведённые выше факты могут быть доказательством обнаружения «феномена спасения» типа 1 и актуальны для понимания и применения этого недавно открытого «немишенного эффекта» радиации. Chen и соавт. [2] обнаружили, что «спасение» облучённых клеток HeLa клет-ками-«свидетелями» NHFL не было таким значимым с точки зрения фракции выживания клеток HeLa (в процентном отношении). Widel и соавт. [20] показали отсутствие выраженной индукции «эффекта спасения» в облучённых клетках Ме45 при их совместном культивировании с необлу-чёнными клетками этой же линии. Полученные данные могут означать, что такой эффект является результатом переходного периода между наступлением «эффекта спасения» 1 и «эффекта спасения» 2.

Исследования in vivo . «Эффект спасения» изучался также in vivo на эмбрионах рыб Danio rerio. Рыбы Danio rerio являются хорошо зарекомендовавшей себя в радиобиологии моделью, так как обладают высокой степенью гомологии генома с геномом млекопитающих и, в частности, человека [29]. При этом особенно высокой гомологией характеризуются гены, вовлечённые в клеточную сигнализацию. Choi и соавт. [30] выявили «эффект спасения» между подвергшимися воздействию α -излучения (источник 241Am) в дозе ~4,4 мГр и необлучёнными эмбрионами рыб Danio rerio, которые содержались в одной среде. Результат заключался в снижении количества апопто-тических сигналов у облучённых эмбрионов.

Pereira и соавт. [31] сравнивали количество очагов γ-H2AX, индуцированных в эмбриональных клетках фибробластов Danio rerio (ZF4) при двух различных схемах облучения: 1) воздействие гамма-излучения 137Cs в течение 4 ч (суммарная доза 12 мГр или 92 мГр) и после перерыва в 1 ч дальнейшее облучение ещё 20 ч (суммарная доза 58 или 460 мГр); 2) непрерывное воздействие гамма-излучения в течение 24 ч. В эксперименте с облучением по схеме 1 обнаружено значительно меньшее количество очагов Y-H2AX и, таким образом, «эффект спасения» между клетками был успешно продемонстрирован. Интервал в 1 ч позволил облучённым клеткам развить адаптацию, поэтому в этом случае наименьшее значение рассматриваемого показателя может быть связано с сочетанием «эффекта спасения» и радиоадаптации.

«Эффект спасения» на уровне организма изучался также в работах И.Н. Когарко и соавт. [32, 33]. В 2023 г. было установлено статистически значимое снижение частоты нормальных хромато-фильных эритроцитов (НХЭ) с микроядрами в группе облучённых мышей, содержащихся с необ-лучёнными «свидетелями» в одной клетке по сравнению с показателями гамма-контроля. У облучённых мышей отмечалось снижение частоты НХЭ с микроядрами на 3-и сут после начала эксперимента при содержании в клетке без перегородки; на 14-е сут при содержании животных как с перегородкой, так и без неё; на 60-е сут в группе, где животные содержались с необлучён-ными мышами-«свидетелями» в клетках без перегородки [33].

Возможные механизмы

Механизмы и химические посредники, ответственные за реализацию «эффектов спасения», успешно исследуются. Во-первых, они должны будут объяснить результаты оценки биологических конечных точек, включая «содействие» (активизацию) репарации повреждений ДНК. Следствием этого является уменьшение количества очагов 53BP-1 и Y -H2AX или снижение интенсивности их флюоресценции (на ядро клетки), ослабление выраженности эффектов деполяризации мембран митохондрий и апоптоза, возрастание выживаемости облучённых клеток. «Содействие» правильной репарации повреждений ДНК отражается в снижении образования микроядер. МЯ-тест обычно используется для оценки уровня повреждённости генома и может являться инструментом для иллюстрации наличия «эффекта спасения» [2, 3, 32, 33].

Desai и соавт. [21] обнаружили интересный факт: «эффект спасения» между клетками аденокарциномы лёгкого А549 и нормальными лёгочными фибробластами человека W138 не был сопряжён с щелевыми переходами. Авторы пришли к выводу, что, вполне вероятно, «эффект спасения» опосредован каким-либо растворимым сигнальным фактором. Растворимыми факторами, как было продемонстрировано выше, являлись сАМФ, предложенный He и соавт. [22], и TNF- a , который индуцирует активацию NF-kB и участвует в реализации рассматриваемого феномена. В другой работе Widel и соавт. [20] обнаружили, что «эффект спасения» в облучённых клетках Ме45, совместно культивируемых с необлучёнными клетками NHFL, связан со снижением уровня АФК в экспонированных клетках. Отсюда, предлагаемый механизм «эффекта спасения» включает в себя правильную репарацию повреждений ДНК (например, стимулирование гомологичной рекомбинации (HR) по сравнению с негомологичным соединением концов); учитывая роль сАМФ и модулирование внутриклеточного уровня АФК в облучённых клетках растворимые сигнальные факторы способствуют выживанию клеток.

Как пример, для подтверждения реальности предполагаемого механизма «спасения» оценивали ассоциативную связь выявленных проявлений данного феномена с активизацией пути NF-kB, показанную в работах Ivanov и соавт. [34] в 2010 г. и Lam и соавт. [23]. Получен результат, свидетельствующий о том, что экспрессия генов-мишеней NF-kB в целом способствует выживанию клеток; антиапоптотические белки, регулируемые NF-kB, влияют на «эффект спасения» в частности через HR. Возможно также повышение экспрессии MDM 2 для антагонизма пути p53, так как индукция последнего может активировать программу апоптоза. NF-кВ играет, очевидно, важную роль в репарации ДНК. Кроме того, NF-kB - опосредованная HR «уравновешивала» подавление HR двухцепочечных разрывов в p53 локусе. Далее, растворимый компонент сАМФ может связываться и активировать сАМФ-зависимую протеинкиназу, которая обычно не активна, чтобы позволить ей фосфорилировать серин 276, так как в ядре увеличивается сродство к транскрипционным коактиваторам. Кроме того, некоторые гены, регулируемые NF-kB, необходимые для репарации ДНК, играют важную роль в регуляции внутриклеточных уровней АФК. Таким образом, показана активация пути NF-kB, предложенная Lam и соавт. [23] для «эффекта спасения», и, по-видимому, данная схема совместима со всеми предыдущими исследованиями.

«Эффект спасения» и радиотерапия опухолей

Проведены исследования, в которых использовались ионизирующие излучения для лечения опухолей [35-38]. Традиционная радиоиммунотерапия направлена на доставку «уничтожающей» дозы радиации в опухолевый очаг с помощью моноклонального антитела, меченного радионуклидом, которое обладает специфичностью к антигену, связанному с опухолевыми клетками. Отсюда радиоиммунотерапия может являться инструментом для лечения локальных и диффузных опухолей при помощи ионизирующего излучения. Однако, эффективность радиоиммунотерапии может быть угнетена индуцированным «эффектом спасения». Обнаружено, что необлу-чённые нормальные клетки-«свидетели» могут «спасти» облучённые опухолевые клетки. Предполагается, что вышеописываемый путь активации Nf-KB в облучённых клетках может являться решающим механизмом возникновения «эффекта спасения». Фактически реализация Nf-KB-за-висимых внутриклеточных сигнальных путей может привести к ослаблению токсического потенциала противоопухолевого лечения. Высказано предположение, что пациенты с иммунодефицитом и мутациями генов, ассоциированными с Nf-KB-зависимыми механизмами, будут более чувствительными к генотоксической терапии. По-видимому, значительные положительные результаты от возникновения «эффекта спасения» (тип II) с целью повышения эффективности радиоиммунотерапии могут быть получены в результате поиска иных способов активации или инактивации пути Nf-KB.

В работе Chen и соавт. [2] представлены данные, демонстрирующие различные эффекты в клетках после применения радиоиммунотерапевтических средств. С одной стороны, клетки-«мишени» повреждаются в результате непосредственного действия на них радиации, а клетки-«свидетели» - за счёт индуцированных в них «немишенных эффектов» («эффект свидетеля»). С другой стороны, индуцированный в результате контакта облучённых и необлучённых клеток «эффект спасения» может приводить к уменьшению повреждаемости экспонированных клеток. Таким образом, между необлучёнными клетками-«свидетелями» и облучёнными клетками происходит передача сигналов «эффекта свидетеля» и «эффекта спасения», то есть реализуются перекрестные эффекты. Существенным негативным следствием последних является снижение эффективности радиотерапии (радиоиммунотерапии) опухолей и её побочные эффекты, заключающиеся в индукции повреждений в клетках близлежащей здоровой ткани.

С другой стороны, возможность индукции «эффекта спасения», продемонстрированного в экспериментах с эмбрионами рыб Danio Rerio, должна быть учтена при разработке методов радиоиммунотерапии солидных опухолей. Возможно выявление проявления «эффекта спасения» между опухолевыми очагами на олигометастатической стадии течения заболевания, при которой также применяется радиоиммунотерапия.

Радиоиммунотерапия успешно применяется для лечения лимфомы, при этом лечение солидных опухолей сталкивается с рядом препятствий, таких как неоднородность кровотока, строма опухоли, экспрессия антигенов-мишеней и радиорезистентность.

Немногие опубликованные исследования по лечению солидных опухолей с помощью радиоиммунотерапии продвинулась не дальше фазы II схемы лечения. Для преодоления препятствий и усиления клинического ответа солидных опухолей при радиоиммунотерапии может быть полезна модель эмбриона Danio Rerio с целью изучения закономерностей проявления «эффекта спасения», в том числе при неравномерности доз облучения. Последнее является крайне важным, так как в этом случае не исключена индукция наблюдаемого эффекта в пределах самой опухоли в результате контакта клеток участка ткани, получившего наибольшую дозу облучения, и наименее поражённых клеток.

В последнее время наблюдается тенденция по исследованию роли антигенов, связанных с сигнальными путями, имеющими решающее значение для роста и выживания опухолей. Модель эмбриона Danio Rerio также может быть применена для изучения разнообразных схем радиационного воздействия на опухоли.

Заключение

Итак, в 2011 и 2016 гг. было обнаружено общебиологическое явление - «эффект спасения». В дальнейшем были проведены исследования по изучению механизмов и химических растворимых мессенджеров, ассоциированных с первым и вторым типами «эффекта спасения». Lam и соавт. [23] предложили активацию пути ответа NF-kB в облучённых клетках как основной механизм для «эффекта спасения» типа 1. Авторы объясняют полученные данные, демонстрирующие проявления этого феномена как «содействие» выживанию облучённых клеток со стороны необлучённых, сопряженное с корректной репарацией повреждений ДНК, модуляцией внутриклеточного уровня АФК в экспонированных клетках, а также зависимое от сАМФ.

Fu и соавт. [24] подтвердили, что индуцированный а-частицами «эффект спасения» II включает в себя активацию МАРК и NF-кВ путей, а также факторов TNF-а и IL-8 в клетках-«свидете-лях», которые ретранслировались на активированный ERK и пути р38 в облучённых клетках. NO стимулирует или ингибирует активность NF-кВ-зависимых внутриклеточных сигнальных путей и приводит к радиационно-индуцированным NO-опосредованным «эффектам свидетеля», которые также могут быть вовлечены в реализацию «эффекта спасения» 1 и «эффекта спасения» 2. Недавно Kong и соавт. [25] в 2018 г. предположили, что «эффект спасения» тип 1 был инициирован факторами «эффекта свидетеля», высвобождаемыми при облучении клеток, которые индуцировали аутофагию и активировали STAT3 для производства IL-6 в клетках-«свидетелях», а секретируемый IL-6 активировал путь NF-кВ в облучённых клетках. Эти механизмы и химические мессенджеры в облучённых и необлучённых клетках очевидно участвуют в работе «эффекта спасения» 1 и «эффекта спасения» 2. Вид использованного ионизирующего излучения, его дозовый диапазон, спектр облучённых и необлучённых клеток, различные биологические конечные точки имеют решающее значение для того, чтобы дифференцировать или объединять два явления в один феномен. В будущем, это будет иметь не только фундаментальное, но и большое практическое значение, связанное с разработкой лекарств, оптимизации методов радиотерапии и улучшения результатов лечения онкологических больных.

Работа выполнена в рамках государственного задания Минобрнауки России за счёт субсидии, выделенной ФИЦ ХФ РАН на выполнение государственного задания, тема: «Фундаментальные физико-химические исследования механизмов физиологических процессов и создание на их основе фармакологических веществ и лекарственных форм для лечения и профилактики социально значимых заболеваний», № 122040400089-6. Часть исследования выполнено в рамках темы государственного задания Минобрнауки России «Механизмы генетических процессов у микроорганизмов, растений, животных и человека» (№ 122022600163-7), подтема: «Генотоксиканты и антигеноксиканты окружающей среды: маркеры отдалённого воздействия и генетические риски развития широко распространённых заболеваний».

Список литературы Радиационно-индуцированный «эффект спасения» в экспериментах на различных модельных объектах: феноменологические аспекты и возможные механизмы. Обзор

  • Lowe D., Roy L., Tabocchini M.A., Rühm W., Wakeford R., Woloschak G.E., Laurier D. Radiation dose rate effects: what is new and what is needed? //Radiat. Environ. Biophys. 2022. V. 61, N 4. P. 507-543.
  • Chen S., Zhao Y., Han W., Chiu S.K., Zhu L., Wu L., Yu K.N. Rescue effects in radiobiology: unirradiated bystander cells assist irradiated cells through intercellular signal feedback //Mutat. Res. 2011. V. 706, N 1-2. P. 59-64.
  • Lam R.K., Fung Y.K., Han W., Yu K.N. Rescue effects: irradiated cells helped by unirradiated bystander cells //Int. J. Mol. Sci. 2015. V. 16, N 2. P. 2591-2609.
  • Yu K.N. Radiation-induced rescue effect //J. Radiat. Res. 2019. V. 60, N 2. P. 163-170.
  • Yu K.N. Radiation-induced rescue effect: insights from microbeam experiments //Biology (Basel). 2022. V. 11, N 11. P. 1548. DOI: 10.3390/biology11111548.
  • Mothersill C., Seymour C. Radiation induced bystander effects: past history and future directions //Radiat. Res. 2001. V. 155, N 6. P. 759-767.
  • Morgan W.F., Sowa M.B. Non-targeted bystander effects induced by ionizing radiation //Mutat. Res. 2007. V. 616, N 1-2. P. 159-164.
  • Nikitaki Z., Mavragani I.V., Laskaratou D.A., Gika V., Moskvin V.P., Theofilatos K., Vougas K., Stewart R.D., Georgakilas A.G. Systemic mechanisms and effects of ionizing radiation: a new 'old' paradigm of how the bystanders and distant can become the players //Semin. Cancer Biol. 2016. V. 37-38. P. 77-95.
  • Shareef M.M., Cui N., Burikhanov R., Gupta S., Satishkumar S., Shajahan S., Mohiuddin M., Rangnekar V.M., Ahmed M.M. Role of tumor necrosis factor-alpha and TRAIL in high-dose radiation-induced bystander signaling in lung adenocarcinoma //Cancer Res. 2007. V. 67, N 24. P. 11811-11820.
  • Iyer R., Lehnert B.E., Svensson R. Factors underlying the cell growth-related bystander responses to alpha particles // Cancer Res. 2000. V. 60, N 5. P. 1290-1298.
  • Chou C.H., Chen P.J., Lee P.H., Cheng A.L., Hsu H.C., Cheng J.C. Radiation-induced hepatitis B virus reactivation in liver mediated by the bystander effect from irradiated endothelial cells //Clin. Cancer Res. 2007. V. 13, N 3. P. 851-857.
  • Facoetti A., Ballarini F., Cherubini R., Gerardi S., Nano R., Ottolenghi A., Prise K.M., Trott K.R., Zilio C. Gamma ray-induced bystander effect in tumour glioblastoma cells: a specific study on cell survival, cytokine release and cytokine receptors //Radiat. Prot. Dosim. 2006. V. 122, N 1-4. P. 271-274.
  • Matsumoto H., Hayashi S., Hatashita M., Shioura H., Ohtsubo T., Kitai R., Ohnishi T., Yukawa O., Furusawa Y., Kano E. Induction of radioresistance to accelerated carbon-ion beams in recipient cells by nitric oxide excreted from irradiated donor cells of human glioblastoma //Int. J. Radiat. Biol. 2000. V. 76, N 12. P. 1649-1657.
  • Matsumoto H., Hayashi S., Hatashita M., Ohnishi K., Shioura H., Ohtsubo T., Kitai R., Ohnishi T., Kano E. Induction of radioresistance by a nitric oxide-mediated bystander effect //Radiat. Res. 2001. V. 155, N 3. P. 387-396.
  • Shao C., Furusawa Y., Aoki M., Matsumoto H., Ando K. Nitric oxide-mediated bystander effect induced by heavy-ions in human salivary gland tumour cells //Int. J. Radiat. Biol. 2002. V. 78, N 9. P. 837-844.
  • Matsumoto H., Hamada N., Takahashi A., Kobayashi Y., Ohnishi T. Vanguards of paradigm shift in radiation biology: radiation-induced adaptive and bystander responses //J. Radiat. Res. 2007. V. 48, N 2. P. 97-106.
  • Matsumoto H., Tomita M., Otsuka K., Hatashita M. A new paradigm in radioadaptive response developing from microbeam research //J. Radiat. Res. 2009. V. 50 (Suppl. A). P. A67-A79.
  • Matsumoto H., Tomita M., Otsuka K., Hatashita M., Hamada N. Nitric oxide is a key molecule serving as a bridge between radiation-induced bystanderand adaptive responses //Curr. Mol. Pharmacol. 2011. V. 4, N 2. P. 126-134.
  • Shao C., Furusawa Y., Kobayashi Y., Funayama T., Wada S. Bystander effect induced by counted high-LET particles in confluent human fibroblasts: a mechanistic study //FASEB J. 2003. V. 17, N 11. P. 1422-1427.
  • Widel M., Przybyszewski W.M., Cieslar-Pobuda A., Saenko Y.V., Rzeszowska-Wolny J. Bystander normal human fibroblasts reduce damage response in radiation targeted cancer cells through intercellular ROS level modulation //Mutat. Res. 2012. V. 731, N 1-2. P. 117-124.
  • Desai S., Kobayashi A., Konishi T., Oikawa M., Pandey B.N. Damaging and protective bystander cross-talk between human lung cancer and normal cells after proton microbeam irradiation //Mutat. Res. 2014. V. 763-764. P. 39-44.
  • He M., Dong C., Xie Y., Li J., Yuan D., Bai Y., Shao C. Reciprocal bystander effect between -irradiated macrophage and hepatocyte is mediated by cAMP through a membrane signaling pathway //Mutat. Res. 2014. V. 763-764. P. 1-9.
  • Lam R.K., Fung Y.K., Han W., Li L., Chiu S.K., Cheng S.H., Yu K.N. Modulation of NF-κB in rescued irradi-ated cells //Radiat. Prot. Dosim. 2015. V. 167, N 1-3. P. 37-43.
  • Fu J., Wang J., Wang X., Wang P., Xu J., Zhou C., Bai Y., Shao C. Signaling factors and pathways of -particle irradiation induced bilateral bystander responses between Beas-2B and U937 cells //Mutat. Res. 2016. V. 789. P. 1-8.
  • Kong E.Y., Cheng S.H., Yu K.N. Induction of autophagy and interleukin 6 secretion in bystander cells: meta-bolic cooperation for radiation-induced rescue effect? //J. Radiat. Res. 2018. V. 59, N 2. P. 129-140.
  • Adrian G., Ceberg C., Carneiro A., Ekblad L. Rescue effect inherited in colony formation assays affects radiation response //Radiat. Res. 2018. V. 189, N 1. P. 44-52.
  • Puck T.T., Marcus P.I. Action of x-rays on mammalian cells //J. Exp. Med. 1956. V. 103, N 5. P. 653-666.
  • Mackonis E.C., Suchowerska N., Zhang M., Ebert M., McKenzie D.R., Jackson M. Cellular response to modulated radiation fields //Phys. Med. Biol. 2007. V. 52, N 18. P. 5469-5482.
  • McAleer M.F., Davidson C., Davidson W.R., Yentzer B., Farber S.A., Rodeck U., Dicker A.P. Novel use of zebrafish as a vertebrate model to screen radiation protectors and sensitizers //Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2005. V. 61, N 1. P. 10-13.
  • Choi V.W.Y., Ng C.Y.P., Cheng S.H., Yu K.N. -Particle irradiated zebrafish embryos rescued by bystander unirradiated zebrafish embryos //Environ. Sci. Technol. 2012. V. 46, N 1. P. 226-231.
  • Pereira S., Malard V., Ravanat J.-L., Davin A.-H., Armengaud J., Foray N., Adam-Guillermin C. Low doses of gamma-irradiation induce an early bystander effect in zebrafish cells which is sufficient to radioprotect cells //PLoS One 2014. V. 9, N 3. P. e92974. DOI: 10.1371/journal.pone.0092974.
  • Когарко И.Н., Петушкова В.В., Когарко Б.С., Пряхин Е.А., Нейфах Е.А., Ктиторова О.В., Андреев С.С., Ганеев И.И., Кузьмина Н.С., Селиванова Е.И., Пелевина И.И. Исследование действия ионизирующего излучения на радиационно-индуцируемые изменения клеток системы крови мышей на уровне организма //Радиация и риск, 2023 Т. 32. № 1. C. 48-60.
  • Пелевина И.И., Аклеев А.В., Когарко И.Н., Петушкова В.В., Когарко Б.С., Пряхин Е.А., Нейфах Е.А., Ктиторова О.В., Андреев С.С. Радиационно-химическое воздействие ионизирующего излучения на организм и генотоксические нарушения системы крови //Химическая физика. 2021. Т. 40, № 12. C. 48-55.
  • Ivanov V.N., Zhou H., Ghandhi S.A., Karasic T.B., Yaghoubian B., Amundson S.A., Hei T.K. Radiation-induced bystander signaling pathways in human fibroblasts: a role for interleukin-33 in the signal transmission //Cell Signal. 2010. V. 22, N 7. P. 1076-1087.
  • Tardito S., Oudin A., Ahmed S.U., Fack F., Keunen O., Zheng L., Miletic H., Sakariassen P.Ø., Weinstock A., Wagner A., Lindsay S.L., Hock A.K., Barnett S.C., Ruppin E., Mørkve S.H., Lund-Johansen M., Chalmers A.J., Bjerkvig R., Niclou S.P., Gottlieb E. Glutamine synthetase activity fuels nucleotide biosynthesis and supports growth of glutamine-restricted glioblastoma //Nat. Cell Biol. 2015. V. 17, N 12. P.1556-1568.
  • Das S.K., Eder S., Schauer S., Diwoky C., Temmel H., Guertl B., Gorkiewicz G., Tamilarasan K.P., Kumari P., Trauner M., Zimmermann R., Vesely P., Haemmerle G., Zechner R., Hoefler G. Adipose triglyceride lipase contributes to cancer-associated cachexia //Science. 2011. V. 333. P. 233-238.
  • Suchowerska N., Ebert M.A., Zhang M., Jackson M. In vitro response of tumour cells to non-uniform irradi-ation //Phys. Med. Biol. 2005. V. 50, N 13. P. 3041-3051.
  • Bromley R., Oliver L., Davey R., Harvie R., Baldock C. Predicting the clonogenic survival of A549 cells after modulated x-ray irradiation using the linear quadratic model //Phys. Med. Biol. 2009. V. 54, N 2. P. 187-206.
Еще