Распределение сывороточных и эритроцитарных генетических маркёров у больных с вибрационной патологией

Кузбасс – это регион с развитой добывающей и металлургической промышленностью. Это в значительной мере обуславливает и профессиональный состав населения, где его значительную часть составляют шахтёры и металлурги. Как следствие, в структуре заболеваемости большая доля приходится на профессиональные болезни. Наиболее распространены они у шахтёров, например, болезни опорно-двигательного аппарата, нейросенсорная тугоухость, болезни органов дыхания. Развитию этих заболеваний способствуют неблагоприятные факторы при добыче полезных ископаемых. К таким факторам относятся воздействие вибрации, шума, пыли с содержанием различных химических элементов, а также физическое перенапряжение и статические нагрузки в условиях охлаждающего микроклимата. Эти факторы в комплексе после 10-15 лет стажа работы у шахтёров приводят к развитию у них нейроорто-педической патологии и болезней органов дыхания [1, 5].

Хотя профессиональные заболевания у шахтёров развиваются не изолированно, а в разных сочетаниях, вибрационная болезнь (ВБ) встречается в этих сочетаниях чаще всего. Это касается в первую очередь работников, занимающихся добычей угля и других ископаемых не только в шахтах, но и разрезах.

В основе формирования ВБ лежит сложный механизм нервно-рефлекторных и нейрогумо-ральных нарушений, приводящих к появлению очагов застойного возбуждения в различных отделах центральной нервной системы и симпатических ганглиях, изменениям периферического кровообращения и иннервации, развитию гипок-

сии и дистрофических поражений внутренних органов [1, 5]. ВБ характеризуется полиморфно-стью клинической симптоматики и своеобразием течения.

Больные в основном жалуются на боли в руках ноющего характера, чувство онемения, «ползанья мурашек». Снижается вибрационная чувствительность, кожная температура кистей (ниже 25 С), часто развивается цианоз, а также дистрофические нарушения в мышцах и астено-невротические реакции в виде головной боли, общей слабости, повышенной утомляемости, раздражительности. При этом клиника и характер течения ВБ определяются основными физическими параметрами вибрации, суммарным временем её воздействия, местом и площадью соприкосновения с вибрирующим источником, положением тела, а также сопутствующими гигиеническими факторами – шумом, физическим напряжением, микроклиматом и др.

Однако известно, что у лиц, работающих на одном и том же предприятии в однотипных условиях труда, ВБ может существенно различаться по срокам развития, степени тяжести и характеру своего течения [5]. Вероятно, это зависит от биологических особенностей организма, определяющих неодинаковую чувствительность людей к действию производственной вибрации. Такое предположение подкрепляется известным фактом, что различия в течении ВБ могут быть обусловлены особенностями анатомической конституции человека. В связи с этим исследование индивидуальных генетических систем у больных ВБ является актуальным. Целью данной работы было изучение особенностей генетического статуса лиц, страдающих вибрационной болезнью.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Основную группу составили шахтёры, работающие в контакте с вибрацией, у которых была диагностирована ВБ той или иной степени выраженности. Контрольную группу составили работники шахт, не страдающие ВБ. Возраст обследованных – от 30 до 60 лет, наиболее представлен возраст 40-50 лет, пол мужской. Материалом для исследования служили образцы венозной крови. Белки и изоферменты разделяли методом электрофореза в полиакриламидном и крахмальном геле [6]. Ингибитор протеаз α-I-антитрипсин разделялся методом изоэлектрофокусирования в полиакриламидном геле [8]. По этой системе регистрировали 6 генотипов ММ, а также редкие генотипы MS и MZ, которые объединялись в один класс MR. Разделение изоферментов кислой фосфатазы АсР эритроцитов проводилось в крахмальном геле, в трис-цитратной системе, рН – 6,8 [7]. Статистическая обработка материала проводилась по стандартным алгоритмам биометрии. Достоверность различий в распределении полиморфных вариантов между больных лицами и контролем оценивали по критерию χ2 с поправкой Йетса [3]. Об ассоциации разных генотипов с заболеванием судили по величине OR [8] при уровне значимости р≤0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В табл. 1 представлены данные по распределению частот генотипов HP, GC, EsD, AcP, PI в выборке здоровых и больных лиц. В группе шахтеров, больных ВБ, и в группе здоровых лиц по большинству изученных маркеров (НР, GC, EsD) наблюдаемое распределение генотипов соответствовало ожидаемому исходя из равновесия Харди-Вайнберга, за исключением локусов АСР и PI, по которым показано статистически значимое отклонение от равновесия Харди-Вайнберга в обеих изученных группах (табл. 1). В то же время по всем изученным маркерам в обследованных выборках частоты аллелей и генотипов находились в границах значений, показанных для европеоидного русского населения РФ и Сибири [2, 4, 6].

К генотипам риска относится НР 1-1. С возрастом (от 40 до 60 лет и старше) частота этого генотипа снижается с 17,6% до 11,1%. С увеличением возраста и стажа работы частота развития ВБ возрастает [5]. Таким образом, в данной ситуации наблюдается сопряжённый процесс. С одной стороны, с возрастом возрастает число больных ВБ, и при этом наиболее подвержены ВБ обладатели генотипов НР 1-1. С другой стороны, по мере увеличения возраста (и, соответственно, стажа работы) убывает число обладателей таких генотипов именно в силу их большей подверженности ВБ и более быстрому выбыванию с производства.

Концентрация белка гаптоглобина НР в выборке обследованных лиц колебалась от 90 до 360 мг%, но в основном её значения составляли 150-200 мг%, т.е. в пределах нормы. Соотношение концентраций гаптоглобина по генотипам НР1-1 / НР1-2 / НР 2-2 в изученной нами выборке (табл. 2) составляет 183:185:161 мг%. В табл. 3 представлены данные по концентрации НР и Hb в 3-х возрастных группах больных лиц.

Таблица 1. Частоты генотипов и аллелей биохимических маркеров генов в группе больных вибрационной болезнью (ВБ) и в контроле

Локус	Генотип	Сравниваемые группы		OR	p
		Больные ВБ	Контроль
1	2	3	4	5	6
HP	1-1	0,1297	0,0704	1,97	0,02
	1-2	0,4616	0,4648	0,99	0,99
	2-2	0,4087	0,4648	0,80	0,17
	N	663	213
	Частота аллеля Hp2	0,6395	0,6972
	χ2	0	2,16
GC	1-1	0,4838	0,4714	0,95	0,80
	1-2	0,4336	0,4449	1,05	0,82
	2-2	0,0826	0,0837	1,01	0,93
	N	678	227
	Частота аллеля Gc2	0,7001	0,6938
	χ2	0,76	0,51
EsD	1-1	68,99	81,78	0,50	0
	1-2	24,39	16,71	1,61	0,005
	2-2	6,62	1,51	4,63	0
	N	287	862
	Частота аллеля EsD1	0,8118	0,9014
	χ2	11,67	3,13
AcP	AA	4,19	9,57	0,41	0,005
	AB	27,97	35,25	0,71	0,02
	BB	51,06	39,08	1,63	0,0003
	AC	0,69	5,31	0,13	0,001
	BC	12,94	9,57	1,40	0,12
	CC	3,15	1,21	2,63	0,03
	N	286	11,49
	Частота аллеля a	0,1853	0,2985

Окончание таблицы 1

1 2 3 4 5 6 Частота аллеля b 0,7150 0,6149 χ2 21,36 6,38 PI M1M1 48,98 58,98 0,67 0,001 M1M2 30,41 22,17 1,53 0,002 M2M2 4,39 4,17 1,06 0,98 M1M3 8,11 7,47 1,09 0,79 M2M3 1,01 2,79 0,36 0,11 M3M3 1,69 1,98 0,85 0,91 MR (M1S, M2S) 5,41 2,44 2,28 0,007 N 296 1967 Частота аллеля M1 0,6824 0,7379 Частота аллеля M2 0,201 0,1665 Частота аллеля M3 0,0625 0,0712 Частота аллелей R 0,0541 0,0244 χ2 30,56 138,4 Примечания: N – объём выборки; χ2 – тест для оценки соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому исходя из равновесия Харди-Вайнберга; OR – отношение шансов; р –уровень значимости значения χ2 при сравнении различий в распределении генотипов между больными и контролем

Таблица 2. Распределение генотипов гаптоглобина НР и его концентрация в мг% у здоровых и больных лиц

Контингент	Генотипы			Количество лиц
	НР 1-1	НР 1-2	НР 2-2
Здоровые лица	6,94%	45,83%	45,83%	213
Больные	10,89 %	47,21%	41,90%	358
Концентрация НР у больных ВБ	183,19± 5,49	184,97± 3,03	161,11± 3,72

Таблица 3. Концентрация белка гаптоглобина НР и гемоглобина Hb у больных ВБ разного возраста

Возраст	Концентрация НР, мг%	Концентрация Hb, мг%
До 40 лет	171,04±6,38	155,61±2,15
41-50 лет	178,48±2,96	150,41±1,07
Больше 50 лет	186,72±3,59	147,65±1,28
Количество больных	384	384

По мере уменьшения количества гемоглобина в крови возрастает количество НР, который связывает свободный гемоглобин, таким образом, частично компенсирует потерю организмом железа. Это тем более важно, так как с возрастом интенсивность гемопоэза снижается, уменьшается количество как связанного, так и свободного гемоглобина. Такой компенсаторный механизм может играть определённую роль при ВБ, когда нарушается микроциркуляция и ухудшается трофика и газообмен в тканях конечностей и соединительной ткани. Это не единственное объяснение этого феномена. Нельзя исключать возрастание концентрации НР как белка «острой фазы» при воспалительных процессах, которые, как правило, сопровождают ВБ. Наконец, это может быть и чисто возрастным процессом, не связанным с ВБ. Для выяснения этого необходимы исследования на больших выборках здоровых людей.

По системе GC не обнаружено каких-либо значимых различий по частотам отдельных генотипов между здоровыми и больными лицами ни по отдельным выборкам, ни суммарно (табл. 1). В целом распределение генотипов характерно для русского и европеоидного населения. В дальнейшем анализе в качестве контроля использовались данные, полученные для практически здорового взрослого населения г. Новокузнецка.

Среди генотипов флуоресцентной эстеразы (табл. 1) самым распространённым оказался EsD 1-1, который достоверно чаще (р<0,001) встречается в выборке населения города по сравнению с больными ВБ. Показана положительная ассоциативная связь EsD 1-2 с ВБ. Третий полиморфный вариант этой системы (EsD 2-2) достоверно чаще встречается и у больных лиц и может рассматриваться как генотип риска.

По системе ингибитора протеаз (табл. 1) к генотипам риска относятся редкие варианты, главным образом M1S и M2S, связанные с пониженной ингибиторной емкостью крови. К генотипам резистентности можно отнести наиболее распространённый вариант М1М1. Генотип М1М2 показывает положительную ассоциативную связь с ВБ.

По системе АсР были обнаружены все возможные полиморфные варианты (табл. 1). Генотипами риска оказались гомозиготные варианты АсР bb и AcP cc, генотипами резистентности – AcP aa, AcP ab, AcP ac. По распределению генотипов население Новокузнецка в основном сходно с населением других регионов Сибири и России.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, проведённое исследование выявило статистическую сопряжённость некоторых маркёров, или генотипов, с вибрационной болезнью. К ним относятся НР 1-1, EsD 2-2, АсР bb и AcP cc, MS и MZ ингибитора протеаз PI. Выявлены генотипы, которые, наоборот, реже встречаются у больных лиц, чем у здоровых. Это EsD 1-1, М1М1 ингибитора протеаз PI, изоферменты кислой фосфатазы AcP aa, AcP ab, AcP ac. Полученные результаты можно использовать для своевременной профилактики развития этой профессиональной патологии у работников угольной промышленности.