Разнообразие аллельного состояния генов Glu-1 в коллекции образцов твердой пшеницы (Triticum durum Desf.)

Твердая пшеница (Triticum durum Desf.) — одна из основных культур, возделываемых для производства продуктов питания. Ее зерно широко используется в макаронной и крупяной промышленности, а также в хлебопечении (1). Для получения высококачественной макаронной продукции зерно твердой пшеницы должно обладать соответствующими показателями по таким признакам, как стекловидность, содержание белка, клейковины и каротиноидных пигментов (2-4). В связи с тем, что потребители проявляют интерес к продуктам с улучшенными свойствами, возрастают и требования производителей к качеству сырья (5). Особое внимание уделяется клейковине, состояние которой оценивают с помощью индекса глютена, характеризующего силу внутри- и межмолекулярных связей. Индекс глютена также используют в селекционной работе для отбора наиболее перспективных линий твердой пшеницы наряду с такими классическими методами, как анализ фаринограмм и миксограмм или определение SDS-седиментации (6, 7). Индекс глютена крайне важен для современной технологии высокотемпературной сушки макаронных изделий, которая широко применяется в производстве пасты в Северной Америке, Австралии и странах Европы. Эта технология, увеличивающая как объем, так и эффективность производства макаронной продукции, используется и в России, однако ее широкому распространению в нашей стране и странах СНГ препятствует малое число сортов твердой пшеницы с требуемой генетической основой, обеспечивающей клейковину определенного качества (8, 9).

Качество клейковины твердой пшеницы, определяемое ее реологическими свойствами, зависит от компонентов глиадиновой и глютениновой фракций белка, соотношения глиадинов и глютенинов, аллельных вариантов глиадиновых и глютениновых локусов, а также от взаимодействия генотип—среда (10-12). Глютенины — запасные белки пшеницы, состоящие из связанных между собой многочисленных полипептидных цепей (субъединиц) (13, 14). Глютениновая фракция белка образуется высокомолекулярными (high molecular weight, HMW) и низкомолекулярными (low molecular weight, LMW) глютенинами. Гены, кодирующие высокомолекулярные глютенины, находятся в локусе Glu-1 , гены низкомолекулярных глютенинов локализованы в Glu-3 (15).

Высоко- и низкомолекулярные глютенины неодинаковы по своему влиянию на качество клейковины твердой пшеницы и макаронных изделий. На качество зерна и конечной продукции наибольшее влияние оказывают LMW-глютенины (10, 16, 17). Вместе с тем влияние HMW-глютенинов также немаловажно (11, 18, 19). Высокомолекулярные глютенины у твердой пшеницы кодируются локусами Glu-A1 и Glu-B1 , каждый из них кодирует x- и y-субъединицы, возникшие в результате древней дупликации, при этом y-субъединица у Glu-A1 не экспрессируется (13). О влиянии аллельного состояния Glu-A1 на качество изделий из твердой пшеницы нет однозначного мнения из-за фактической фиксации нуль-аллеля Glu-A1c в большинстве мировых коллекций современных сортов (19, 20). К аллелям Glu-B1 с положительным влиянием на качество клейковины твердой пшеницы и макаронных изделий относят, например, Glu-B1b (Bx7 + By8), Glu-B1al (Bx7^OE + By8), Glu-B1d (Bx6 + By8), Glu-B1h (Bx14 + By15), Glu-B1z (Bx7 + By15), к аллелям с негативным эффектом — Glu-B1e (Bx20 + By20) (19, 21, 22).

Поскольку гены высокомолекулярных глютенинов характеризуются значительным разнообразием аллельных вариантов субъединиц белков, различающихся по степени влияния на качество зерна твердой пшеницы, вызывает интерес изучение распространения аллельных вариантов генов HMW-GS, а также сочетания их аллелей в разных коллекциях твердой пшеницы (16, 19, 23). Несмотря на точность таких методов детекции субъединиц запасных белков зерна, как lab-on-a-chip, жидкостная хроматография и масс-спектрометрия, электрофорез белков в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE) остается наиболее доступным и широко используемым (11, 21, 22).

Аллельное состояние генов Glu определяют с помощью классической полимеразной цепной реакции (ПЦР) с разделением продуктов амплификации в агарозном или полиакриламидном геле, а также конкурентной аллель-специфичной ПЦР, или KASP (kompetitive allele specific PCR) (24). KASP-маркеры позволяют различать однонуклеотидные полиморфизмы между аллелями (single nucleotide polymorphisms, SNPs) за счет конкуренции между двумя прямыми праймерами — олигонуклеотидными последовательностями, которые комплементарны целевому участку ДНК, но различаются на 3′-конце целевыми SNP, а на 5′-конце имеют разные «хвосты» с уникальными последовательностями. В набор для KASP помимо двух альтернативных прямых и одного общего обратного праймера входят две FRET-кассеты (fluorescence resonance energy transfer, перенос энергии резонанса флуоресценции), каждая из которых представляет собой двуцепочечный олигонуклеотид. Одна цепочка FRET-кассеты с 3′-конца комплементарна уникальному «хвосту» того или иного прямого праймера, а на 5′-конце несет ковалентно связанный флуорофор (как правило, одна кассета несет FAM, другая — HEX); вторая цепочка FRET-кассеты (комплементарная первой) на 3′-конце несет гаситель флуорофора.

В первом раунде ПЦР происходит отжиг одного из альтернативных прямых праймеров: в конкуренции между прямыми альтернативными праймерами преимуществом обладает праймер, соответствующий SNP матричной ДНК, с которой проходит ПЦР. Во втором раунде ПЦР происходит отжиг обратного (общего) праймера. В третьем раунде ПЦР на «хвосте» прямого праймера происходит отжиг той из двух FRET-кассет, которая комплементарна «хвосту» прямого праймера, имевшего преимущество. В результате происходит пространственная изоляция флуорофора и гасителя и наблюдается испускание сигнала (FAM или HEX). В случае если анализируется гетерозигота, детектируются одновременно два сигнала (24). Благодаря тому, что KASP-метод основан на детекции сигнала в ПЦР в реальном времени, в нем отсутствует этап разделения фрагментов в геле, что значительно ускоряет процедуру генотипирования.

Использование маркеров системы KASP позволяет эффективно выявлять как однонуклеотидные полиморфизмы, так и инсерции/делеции специфического участка ДНК (25). Основой KASP-маркеров могут быть как ранее созданные классические ПЦР-маркеры, разработанные на полиморфизмы между аллелями генов, так и однонуклеотидные полиморфизмы, выявленные методами ассоциативной генетики с помощью высокопроизводительного SNP-генотипирования (26). KASP-маркеры широко применяются в селекции сельскохозяйственных растений, в том числе пшеницы, благодаря высокой точности, эффективности и производительности, что позволяет выполнять масштабный скрининг коллекций сортов, расщепляющихся популяций и селекционных линий (27). KASP-маркеры используются для анализа аллельного состояния генов хозяйственно ценных признаков пшеницы, в том числе генов запасных белков (28-30).

В предыдущих исследованиях в коллекциях сортов и селекционных образцов озимой твердой пшеницы (23) и сортообразцов из питомника конкурсного сортоиспытания яровой твердой пшеницы (21), собранных в Национальном центре зерна (НЦЗ) им. П.П. Лукьяненко, мы проанализировали эффекты аллельных вариантов Glu-A1 и Glu-B1 в отношении качества зерна и макаронных изделий.

В настоящей работе впервые определена структура обширной коллекции сортов и селекционных линий-двуручек твердой пшеницы по сочетанию аллельных вариантов генов локуса Glu-1 .

Цель работы состояла в идентификации аллельного состояния генов высокомолекулярных глютенинов Glu-A1 и Glu-B1 с применением методов SDS-PAGE и KASP-анализа в коллекции, включающей сорта и перспективные селекционные линии двуручек твердой пшеницы, и оценке их влияния на индекс глютена.

Методика. Материалом для исследований служила коллекция из 198 селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы, собранная в НЦЗ им. П.П. Лукьяненко.

Аллельное состояние HMW-GS оценивали методом SDS-PAGE согласно ранее описанной методике (23, 31). Величину индекса глютена измеряли с помощью системы Perten Glutomatic® 2100 System («PerkinElmer», США) согласно протоколу (23, 32).

Геномную ДНК выделяли из 4-суточных проростков СТАВ-методом с некоторыми изменениями с использованием титер-трубок для массового анализа (33).

Для выявления аллельных вариантов гена Glu-A1 применяли маркер Glu-Ax1/x2*_SNP, включающий FAM-праймер 5´-AAGTGTAACTTCTCC-GCAACG-3´ (соответствует нуль-аллелю Glu-A1c , Ax-null), HEX-праймер 5´-ACCTAAGTGTAACTTCTCCGCAACA-3´ (соответствует наличию аллеля Glu-A1a , кодирующего субъединицу Ax1, или аллеля Glu-A1b , кодирующего субъединицу Ax2*), общий праймер 5´-CGAAGAAGCTTGGCCTGGATAG-TAT-3´ (28).

Поскольку образцы с аллелем Glu-B1b (Bx7 + By8), несущие одну копию Bx7, и образцы с аллелем Glu-B1al (Bx7^OE + By8), характеризующиеся чрезмерной экспрессией Bx7 в результате дупликации фрагмента локуса (34), неотличимы при анализе методом SDS-PAGE, был использован KASP-маркер BX7OE_866_SNP, включающий HEX-праймер 5´-GTGGAATATTA-GTGATGGCGTGAC-3´ (соответствует наличию аллеля Glu-B1al , кодирующего субъединицы Bx7^ОЕ + By8), FAM-праймер 5´-GTGGAATATTAGTG-ATGGCGTGAG-3´ (соответствует отсутствию аллеля Glu-B1al ) и общий праймер 5´-TTCTTCTCTCGTTGGCCTTATCGC-3´ (33). Маркер основан на SNP в промоторной области: вариант С ассоциирован с аллелем Glu-B1al , несущим двойную копию Bx7, вариант G — с отсутствием двойной копии Bx7 (28, 29).

ПЦР проводили в 96-луночном ПЦР-планшете. ПЦР-смесь объемом 10 мкл содержала 5 мкл Master mix KBS-1050-102 с присутствием красителей FAM, HEX, ROX («LCG Biosearch Techhnologies», Великобритания), 1,5 пМ аллель-специфических праймеров, 3,75 пМ общего праймера и 5 мкл матричной ДНК (50 нг на лунку). Использовали протокол touchdown: 15 мин при 94 ° С (активация фермента); 20 с при 94 ° С, 60 с при 61-55 ° С (снижение температуры с каждым циклом на 0,6 ° С), 30 с при 94 ° С (10 циклов); 20 с при 94 ° С, 60 с при 55 ° С (35 циклов); считывание сигнала 60 с при 37 ° С. ПЦР проводили в BIO-RAD CFX96 («Bio-Rad Laboratories, Inc.», США) с использованием программного обеспечения Bio-Rad CFX Manager 3.1.

Вывод об аллельном состоянии генов HMW-GS Glu-A1 и Glu-B1 делали на основании сравнения результатов, полученных с помощью KASP-анализа и SDS-PAGE.

При статистической обработке данных по индексу глютена, выраженного в процентах, проводили трансформация logit (35), после чего все расчеты велись с преобразованными значениями. Для различных состояний входных категорий значимость различий среднего индекса глютена оценивали по критерию Тьюки для множественных парных сравнений при 95 % доверительном интервале для однофакторных моделей ANOVA .

Результаты. По результатам KASP-анализа и SDS-PAGE были получены данные о структуре коллекции селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы (рис. 1, приложение 1; полностью данные приложения по 198 образцам см. на .

Рис. 1. Распределение сочетаний аллелей генов HMW-GS у образцов из коллекции селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы ( Triticum durum Desf.) (Национальный центр зерна имени П.П. Лукьяненко, 2021 год) .

Приложение 1. .Аллельные варианты генов HMW-GS в коллекции селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы I kiricum durum Dexf.). собранно!

в НПЗ имени П.П. Лукьяненко (Национальный центр зерна имени П.П. Лукьяненко. 2021 гол)
№ н/п	Образен	Аллель Glu-Al	Аллель Glu-Bl
1	480111142	Qu-Ak	Glu-Blal
2	48221119	Qu-A к	Glu-Blal
3	3902113-18-3	Qu-A lb	Glu-BH
4	46461)22	Qu-Ak	Glu-Blal
5	45831147	Qu-А к	Glu-Blal
6	47841126	Qu-Ak	Glu-Blal
7	429004	Qu-А к'	Glu-Blal
X	47541176	Qu-Ak	Glu-Blal
Ч	45071114	Qu-Ak	Glu-Blal
10	47991138	Qu-Ak	Glu-BIb
11	4387118	Qu-Ak	Glu-Blal
12	4782hb7	Qu-Ak	Glu-BIb
13	45031123	Qu-A к	Glu-BIb
14	42931125	Qu-Ak	Glu-BIb
15	4810054	Qu-Ak	Glu-Blal
10	4814020	Qu-A lb	Glu-BH
17	4291083	Qu-A к	Glu-Blal
18	4297012	Qu-Ak	Glu-Blal
19	4316090	Qu-Ak	Glu-Blal
20	42490103	Qu-A к	Qu-Bid

Установлено, что 194 образца из коллекции (98 %) имели аллель Glu-A1c , что свидетельствовало об отсутствии у них субъединицы Ax. Также были обнаружены образцы с аллелями Glu-A1a (1 образец) и Glu-A1b (3 образца), несущие соответственно субъединицы Ax1 и Ax2*.

По локусу Glu-B1 мы выявили 8 вариантов аллелей. Аллель Glu-B1b , соответствующий наличию субъединиц Bx7 + By8, был обнаружен у 6 образцов. Сочетание субъединиц Bx6 + By8, присущее Glu-B1d , выявлено у 34 образцов, что составляет 17 % изучаемой коллекции. Аллель Glu-B1e несли 24 образца с субъединицами Bx20 + By20. Редкими аллелями были Glu-B1h (Bx14 + By15) и Glu-B1i (Bx17 + By18), каждый из которых встречался только у двух образцов (соответственно у 3552h59-18-7 и COLOSSEO и у 4814h20 и 3902h3-18-3). Наибольшая часть коллекции (118 образцов, или 60 %) была представлена аллелем Glu-B1al (Bx7^OE + Bx8), для которого характерна чрезмерная экспрессия субъединицы Bx7, обусловленная дупликацией фрагмента локуса (34). В образцах с субъединицами Bx7 + By15 наблюдался полиморфизм по KASP-маркеру: два образца (4636h22 и 4593h36) показали вариант G, 10 образцов — вариант С в промоторной области, в связи с чем первый вариант мы назвали Glu-B1z (Bx7 + By15), второй — Glu-B1z* , субъединицы условно обозначены Bx7(С) + By15 (рис. 2). Glu-A1a и Glu-A1b в изученной коллекции твердой пшеницы встречались только в комбинации с Glu-B1d и Glu-B1i . Glu-B1d также встречался в сочетании с Glu-A1c .

На рисунке 2 представлены паттерны белковых субъединиц высокомолекулярных глютенинов, идентифицированные в процессе анализа методом SDS-PAGE и дополненные результатами KASP-анализа.

Рис. 2. Паттерны сочетаний субъединиц HMW-GS, детектированные у образцов из коллекции селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы ( Triticum durum Desf.) методом SDS-PAGE и подтвержденные с помощью KASP-анализа: 1 — 4598h48 (Bx6 + By8), 2 — ALLEMANNO (Bx7 + By8), 3 — 4583h47 (Bx7OE + By8), 4 — 4814h20 (Ax2*; Bx17 + By18), 5 —SAN MARCO (Bx20 + By20), 6 — 4593h36 (Bx7 + By15), 7 — 4808h8 (Bx7(C) + By15), 8 — 4626h42 (Ax1; Bx6 + By8), 9 — 4391h47 (Ax2*; Bx6 + By8), 10 — 3552h59-18-7 (Bx14 + By15) (Национальный центр зерна имени П.П. Лукьяненко, 2021 год) .

Влияние аллелей высокомолекулярных глютенинов и составляющих их субъединиц на индекс глютена отражено в таблице. Ввиду отсутствия выборки у образцов с сочетаниями аллелей Glu-A1a + Glu-B1d и Glu-A1b + Glu-B1d статистические данные не представлены.

Величина индекса глютена у образцов из коллекции селекционных линий и сортов-двуручек твердой пшеницы ( Triticum durum Desf.) в зависимости от аллелей и субъединиц HMW-GS (Национальный центр зерна имени П.П. Лукьяненко, 2021 год)

	Фактор		Индекс глютена, %	Число образцов
By	By15		94,37ab	14
	By18		99,11ab	2
	By20		94,09b	24
	By8		97,63a	158
Glu-A1	Glu-A1b		98,91a	3
	Glu-A1c		97,15a	194
Glu-A1+Glu-B1	Glu-A1b +	Glu-B1i	99,11ab	2
	Glu-A1c +	Glu-B1al	97,46ab	118
	Glu-A1c +	Glu-B1b	98,29ab	6
	Glu-A1c +	Glu-B1d	97,98a	32
	Glu-A1c +	Glu-B1e	94,09b	24
	Glu-A1c +	Glu-B1h	89,45ab	2
	Glu-A1c +	Glu-B1z	97,81ab	2
	Glu-A1c +	Glu-B1z*	94,05ab	10
Glu-B1	Glu-B1al		97,46ab	118
	Glu-B1b		98,29ab	6
	Glu-B1d		98,03a	34
	Glu-B1e		94,09b	24
	Glu-B1h		89,45ab	2
	Glu-B1i		99,11ab	2
	Glu-B1z		97,81ab	2
	Glu-B1z*		94,05ab	10

П р им еч ани е. Статистически незначимые средние значения на основании критерия Тьюки обозначены одинаковыми буквами.

Максимальное значение индекса глютена в 2021 году наблюдалось у образцов с аллелем Glu-B1i. Ввиду низкой встречаемости этого аллеля среди изученных образцов нам не удалось выявить для него статистически значимых отличий от других, однако он вызывает несомненный интерес для дальнейшего изучения. Если рассматривать вклад каждой из субъединиц в повышение индекса глютена, то можно заметить, что присутствие By8 значительно увеличивало этот показатель. Статистически достоверное снижение индекса глютена связано с присутствием субъединицы By20, характерной для Glu-B1e.

Локус Glu-A1 в наших исследованиях был представлен тремя вариантами аллелей с преобладанием Glu-A1c (98 %). Преобладание аллеля Glu-A1c прослеживается и во многих других коллекциях твердой пшеницы вне зависимости от региона происхождения сортов (36-38). И хотя аллель Glu-A1c повсеместно распространен и зафиксирован даже у сортов современной селекции, среди образцов твердой пшеницы встречаются генотипы с аллелями Glu-A1a и Glu-A1b (19, 23, 38). В нашей коллекции на их долю пришлось соответственно 0,5 и 1,5 %. По сравнению с современными сортами повышенной частотой встречаемости аллеля Glu-A1a (до 38 %) характеризуются ландрасы и стародавние сорта Средиземноморья (37, 39). Аллели Glu-A1a и Glu-A1b представляют интерес для дальнейшего изучения, поскольку у образцов, в которых они комбинировались с аллелями локуса Glu-B1 , наблюдались высокие показатели индекса глютена. Например, наибольшее значение индекса глютена было отмечено в образце с сочетанием Glu-A1b + Glu-B1i , однако ввиду малой выборки нам не удалось выявить статистически значимых различий между этим сочетанием аллелей и другими сочетаниями (см. табл.).

Локус Glu-B1 был представлен 8 аллельными вариантами. Доминирующее положение среди всех обнаруженных вариантов занимал аллель Glu-B1al (60 %) с субъединицами Bx7^OE + By8. В связи с тем, что SDS-PAGE не позволяет отличить Bx7^OE + By8 ( Glu-B1al ) от Bx7 + By8 ( Glu-B1b ), мы провели анализ с помощью KASP-маркера, выявляющего полиморфизм С/G в промоторной области гена, кодирующего субъединицу Bx7 (28). В большинстве других исследований KASP-анализ не проводился, а состав субъединиц определялся с помощью SDS-PAGE. Если объединить полученные данные по Glu-B1b и Glu-B1al , то мы получим долю в 63 % (124 образца), близкую к показателям в европейских (37) и австралийских (38) коллекциях твердых пшениц. По нашим данным, образцы с аллелями Glu-B1al и Glu-B1b обладали высокими значениями индекса глютена (см. табл.).

Сочетание субъединиц Bx6 + By8 ( Glu-B1d ) в сортах мягкой пшеницы приводит к ухудшению хлебопекарных качеств, а в сортах твердой пшеницы, напротив, ассоциировано с высокими показателями качества клейковины (37, 38, 40). По нашим данным, образцы, несущие Glu-B1d , также характеризовались высокими показателями индекса глютена (см. табл.). Этот аллель умеренно распространен в средиземноморских сортах (37), где на его долю приходится около 20 % образцов, как и в наших исследованиях. Значительное распространение Glu-B1d наблюдается в сортах США и Канады (около 70 %) (38, 41).

Аллель Glu-B1e (Bx20 + By20) ухудшает показатели качества клейковины (22, 40, 42). В современных сортах он встречается реже, чем в ланд-расах и сортах старой селекции (16, 37). Хотя он и снижает значение индекса глютена, этот аллель присутствует (15-20 %) в современных сортах твердой пшеницы (19, 21, 39). Это может объясняться тем, что индекс глютена не единственный показатель, определяющий качество макаронных изделий. Поскольку Bx20+By20 по-прежнему встречается у современных сортов коммерческого использования, такие сорта интересны для поиска и изучения других генетических систем, определяющих высокое качество 846

макаронных изделий (LMW-GS, содержание крахмала и белка, глиадины, индекс цвета).

Интерес представляют выявленные редкие аллели Glu-B1h , Glu-B1z , Glu-B1z* , Glu-B1i , поскольку новые аллели позволяют разнообразить генофонд твердой пшеницы и расширить спектр технологических качеств продуктов питания, произведенных из сортов твердой пшеницы. Небольшая численность образцов с аллелями Glu-B1i (Bx17 + By18) и Glu-B1h (Bx14 + By15) не позволила в полной мере оценить их влияние на индекс глютена, однако они характеризовались соответственно самым высоким и самым низким средним значением индекса глютена (см. табл.). Другие исследователи отмечают сниженное значение показателя SDS-седиментации при оценке клейковины у образцов с субъединицами Bx14+By15 по сравнению с образцами, имеющими Bx17+By18 (20).

С помощью KASP-анализа мы выявили два варианта Glu-B1z (Bx7 + By15) c двумя вариантами SNP в промоторной части гена, кодирующего субъединицу Bx7. Образцы с полиморфизмом G — Glu-B1z (2 образца), образцы с полиморфизмом С были обозначены нами Glu-B1z* (10 образцов). Поскольку промотор влияет на экспрессию белка, можно ожидать, что выявленные SNP приводят к фенотипическим различиям между сортами, обладающими аллелями Glu-B1z и Glu-B1z* . Косвенно это подтверждают различия средних значений индекса глютена между образцами, несущими два указанных аллеля (см. табл.). Из-за малого объема выборки разница была статистически недостоверной, поэтому влияние этого SNP требует дальнейшего изучения. Кроме того, интересно, что число образцов с аллелем Glu-B1z* (5 %) преобладало над числом образцов с широко используемым в селекции твердой пшеницы аллелем Glu-B1b (3 %), то есть аллель Glu-B1z* постепенно распространяется и закрепляется в современных сортах твердой пшеницы.

Таким образом, в результате анализа 198 линий и сортов-двуручек твердой пшеницы из коллекции НЦЗ имени П.П. Лукьяненко мы установили, что в подавляющем большинстве изученных образцов присутствовал аллель Glu-A1c (98 %), а на долю образцов с Glu-A1a и Glu-A1b приходилось соответственно 0,5 и 1,5 %. По локусу Glu-B1 наблюдалось численное превосходство образцов с аллелем Glu-B1al (60 %) над образцами, несущими Glu-B1d (17 %) и Glu-B1e (12 %). На долю образцов с субъединицами Bx7 + By8 ( Glu-B1b ) пришлось 3 % от числа исследованных. Кроме того, мы выявили редкие аллели Glu-B1h (1 %), Glu-B1i (1 %), а также Glu-B1z (1 %) и Glu-B1z* (5 %). Два последних различались однонуклеотидным полиморфизмом в промоторной области гена, кодирующего субъединицу Bx7. Прослеживалась тенденция к распространению и закреплению в сортах твердой пшеницы аллеля Glu-B1z* . Также было отмечено положительное влияние Glu-B1d на индекс глютен и оказываемый на его величину негативный эффект Glu-B1e . Результаты анализа образцов двуручек, описанные в настоящей статье, вместе с ранее опубликованными данными, полученными при анализе коллекции озимой твердой пшеницы и перспективных сортообразцов яровой твердой пшеницы, расширяют представления о влиянии высокомолекулярных глютенинов на качество зерна, клейковины и макаронных изделий и могут быть полезны в селекционной работе по улучшению твердой пшеницы и созданию востребованных в производстве сортов.