Роль ГАМКергических рецепторов нейронов зоны А5 моста в регуляции реакции дыхательного центра при болевой стимуляции у крыс

Актуальность. Норадренергические А5 нейроны локализованы в каудальных вентролатеральных отделах моста и участвуют в регуляции дыхания и ноцицепции. Эти функции могут осуществляться за счёт моносинаптических связей с задними рогами спинного мозга и вентральной дыхательной группой. В нашей лаборатории было выявлено, что норадренергические А5 нейроны активируются как при стимуляции периферических хеморецепторов гипоксией, так и при температурной стимуляции ноцицепторов (“tail-flick” тест). Также, в этой области моста идентифицирована высокая ГАМКергическая иммунореактивность нейронных структур, роль которой остается мало исследованной. Мы предположили что, ГАМКергические рецепторы нейронов зоны А5 могут влиять на выраженность дыхательной реакции при боли. Методы исследования. Исследование выполнено на анестезированных пентобарбиталом 12 взрослых белых крысах, сохраняющих спонтанное дыхание. Хирургическим путем открывали вентральную поверхность моста. Диафрагмальный нерв выделяли на протяжении 5-6 мм, периферический конец пересекали и накладывали на биполярные вольфрамовые электроды, соединенные с усилителем переменного тока (NBL 312; Neurobiolab Company; Россия). Данные обрабатывали и сохраняли с использованием АЦП (L-Card E14-440, FBM Engineering) и программного обеспечения PowerGraph software (version 3.3. Professional). Для ноцицептивной стимуляции использовали модель термического раздражения ноцицепторов хвоста (“tail-flick” тест). Для этого конец хвоста (примерно 1/3 всей длины) погружали в термостатированную ячейку, заполненную водой (52 °С), до появления болевого рефлекса движения хвоста. После этого хвост вынимали из водной термоячейки его помещали в воздушную термоячейку (37 °С) для восстановления исходной температуры. Вычисляли время до появления первых движений хвоста и в опытах использовали одинаковые термические стимулы на 1-2 с меньшей длительностью для раздражения ноцицепторов. Микроинъекции в зону А5 объемом 50 нл производи в течение 1 минуты через стеклянную микропипетку с диаметром кончика 20-30 мкм с помощью нанолитрового микроинъектора. В исследованиях использовали γ-амино-масляную кислоту (ГАМК) в концентрации 4 мМ/л (RBI, Natick, USA). Интервал между микроинъекциями составлял не менее 1 часа. Данные обрабатывали и сохраняли с использованием АЦП (L-Card E14-440, FBM Engineering) и программного обеспечения PowerGraph software (version 3.3. Professional). Статистический анализ осуществляли с помощью стандартного статистического пакета «SigmaStat 2.0» («Jandel Scientific», USA) с использованием критериев ANOVA, Dunnetts и Tukey. Изменения средних величин считались статистически значимыми при Р