Роль комбинированной диагностики с применением ПЦР и иммуноцитохимии в определении ВПЧ у пациентов со злокачественными новообразованиями глотки и полости рта

лась методом ПЦР в реальном времени. В качестве биологического материала использовали соскоб эпителиальных клеток ротоглотки или биопсийный материал. Все образцы были протестированы на 14 генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 генотипы). Тестирование проводилось в 2 этапа: экстракция ДНК из биологического материала (коммерческим набором АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ) и не-посредственно этап ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (коммерческий набор Амлисенс ВПЧ ВКР генотип-титр FL). Иммуноцитохимическое исследование проводили с использованием методов Ultra Vision, EnVision FLEX. В качестве маркеров интегрированных форм ВПЧ использовали оценку экспрессии белка p16ink4a (Набор CINtec® Plus «Цитология» предназначен для качественного одновре-мен-ного выявления белков p16INK4a и ki-67 в цитологическом материале методом иммуноцитохимии (ИЦХ) Биовитрум).

Результаты. У 5 больных из 54 (9.3%) выявлена инфекция ВПЧ (4 пациента с 16 типом, 1 пациент с 18 типом) методом ПЦР. Гиперэкспрессия белка супрессора опухолевого роста p16INK4а, являющегося биомаркером при диагностике интегрированных форм вируса при ВПЧ-положитель-ных плоскоклеточных раках, выявлена в 17 (33%) случаях. Гиперэкспрессия p16INK4 в сочетании с наличием ВПЧ-ин-фекции, согласно большинству авторов может предсказать хороший прогноз.

Выводы. Комбинация ПЦР и иммуоцитохимиии оптимальное сочетание для более точного определения активной ВПЧ-ин-фекции при плоскоклеточном раке, чем раздельно статус ДНК ВПЧ или экспрессия p16INK4а, что является полезным и надежным способом для диагностики и определения прогноза ВПЧ-позитивного плоскоклеточного рака. Данная комбинация различных методов позволяет повысить точность диагностики в группе пациентов с плоскоклелеточным раком орофарингеальной области. Планируется дальнейшая обработка полученных данных, для выявления оптимальной последовательности диагностических методов.