Роль связывания кортикостероидов с белками плазмы крови у облучённых животных в реализации эффектов радиопротекторов

В современных отечественных исследованиях к настоящему времени представлены радиобиологические модели, в которых раскрыты механизмы и закономерности фармакологического эффекта противолучевых средств, на основе которых созданы их различные классификации. Описана роль и место химических радиопротекторов в общей системе противолучевых средств, а также механизмы, обуславливающие профилактические и лечебные свойства радиопротекторов при лучевой болезни [5-10]. Радиозащитные свойства химических радиопротекторов описаны и в зарубежных исследованиях [11, 12]. Важной проблемой остаётся применение химических радиопротекторов в клинической онкологии, поскольку они способны оказывать избирательную защиту для нормальных тканей [11-16].

Внимание исследователей привлекают вопросы, связанные с анализом радиорезистент-ных свойств радиопротекторов РС-10 и РС-11, обуславливающих их радиозащитную эффективность. Обоснована как профилактическая эффективность радиопротектора РС-10, так и его эффективность на ранних стадиях острой лучевой болезни. Наряду с положительными радиорези-стентными свойствами РС-10 и РС-11 отмечается токсичность данных радиопротекторов для организма человека [17-20].

Радиопротекторы оказывают стимулирующее действие на систему гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников, а при профилактическом введении предупреждают в разгар лучевой болезни развитие вторичной реакции коры надпочечников [21]. Противолучевой эффект радиопротекторов обусловлен закономерностями реакции гипофиз-адреналовой системы организма на лучевое поражение. Существующее в радиобиологии фундаментальное положение о реакции гипофиз-адреналовой системы в патогенезе острой лучевой болезни опирается на её двухфазную природу протекания: ранняя, когда общий уровень гормона повышается в первые часы после облучения, и поздняя - в разгаре лучевой болезни. Первая фаза считается защитной, тогда как вторая фаза - неблагоприятной, в которой необходимо снижение гиперкортицизма. Как показали наши исследования, ранняя или так называемая защитная реакция является защитной только в своём оптимальном уровне [21]. Адренокортикальная реакция на облучение практически у всех видов животных имеет двухфазную кривую, только у кроликов не обнаружено вторичного гипер-кортицизма после снижения общего уровня кортикостероидов в крови. Установлено, что лучевое поражение вызывает нарушение связывания кортикостероидов с белками плазмы крови, в результате чего наблюдается повышение уровня свободных гормонов в разгаре лучевой болезни, независимо от колебаний их общего уровня. Гиперкортикоидное состояние, как при нормальном, так и при пониженном уровне гормонов в крови, связано с наличием в плазме крови не связанных с белками стероидов. Фактором, усугубляющим развитие острой лучевой болезни, является длительное влияние «скрытого» гиперкортицизма [22].

Возникает необходимость исследования радиозащитной эффективности препаратов РС-10 и РС-11 в контексте анализа их влияния на процессы взаимодействия кортикостероидов с белками плазмы крови с учётом биологической активности разных фракций кортикостероидов и роли свободных кортикоидов в гормональном эффекте при лучевой болезни в условиях действия радиопротекторов. В связи с этим, актуальным является проведение сравнительного анализа влияния радиопротекторов РС-10 и РС-11 на связывание кортикостероидов с белками плазмы крови у облучённых животных. Целью исследования является выявление роли связывания кортикостероидов с белками плазмы крови у облучённых животных на модели резистентности радиопротекторов РС-10 и РС-11.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на 90 кроликах-самцах породы шиншилла весом 2,5-3,0 кг. Проведено 2 серии экспериментов. В первой серии изучали реакцию коры надпочечников и процессы связывания их с белками после введения РС-10 и РС-11 интактным животным; во второй серии - те же показатели в условиях профилактического введения РС-10 и РС-11 у облучённых животных. Все животные были предварительно были адаптированы к условиям эксперимента. Кролики были подвергнуты тотальному облучению Y -лучами в дозе 8 Гр, что вызывало лучевую болезнь IV степени тяжести. Препарат РС-10 (хитозана битартрат) вводили внутривенно из расчёта 10,0 мг/кг за 15 мин до облучения. Препарат РС-11, который является аналогом РС-10, но с меньшей средней молекулярной массой, вводили из расчёта 2-7 мг/кг за 15 мин до облучения. Контрольным животным вводили аналогичный объём физиологического раствора. Общее содержание 11-оксикортикостероидов (11-ОКС) в плазме крови определяли флуориметрическим методом Guillemin еt al. [22] в авторской модификации. Уровень свободных кортикостероидов определяли по разнице содержания их в цельной плазме и в её белковой фракции после разделения на Sephadex G-25. Связывающую способность кортикостероидсвязывающего глобулина (КСГ) определяли гель-фильтрацией De Moor еt al. [23] в авторской модификации [24].

Для изучения влияния радиопротектора РС-10 и РС-11 на белково-стероидное взаимодействие у интактных кроликов до и через 1, 2, 3, 6 и 24 ч после введения радиопротекторов определяли общее содержание 11-ОКС. Свободные, связанные с белками 11-ОКС, связывающую способность КСГ определяли до и через 2,5-3 ч после введения РС-10 и РС-11 в момент максимального подъёма общего уровня 11-ОКС. У облучённых животных, защищённых РС-10 и РС-11, а также у облучённых контрольных животных определяли общее содержание 11-ОКС до и через 2,5-3 ч, 4 и 8 сут после облучения.

Статистический анализ результатов исследования проводился по методу Стьюдента-Фишера. Достоверными являлись различия при р<0,05 и меньше.

Результаты и их обсуждение

В первой серии экспериментов в группах интактных кроликов были получены показатели общей концентрации 11-ОКС в плазме крови опытных кроликов при введении радиопротекторов и контрольных животных при введении физиологического раствора (табл. 1).

Результаты экспериментов показали, что как и при введении РС-10, так и при введении РС-11, в отличие от контрольных групп животных, наблюдается практически идентичная положительная динамика общего содержания 11-ОКС в крови через 1, 2 и 3 ч с максимальными значениями через 2,5-3 ч, которые оставались через 6 ч достоверно выше как исходного уровня (Р<0,01, Р<0,05), так и контрольных групп животных (Р 1 <0,001, Р 2 < 0,05). Однако к 6 сут уровень достоверности различий общего уровня 11-ОКС в крови опытных животных при введении радиопротекторов РС-11 по сравнению с контрольным уровнем ниже (Р < 0,05), в отличие от опытных животных при введении РС-10 (Р<0,001), что показывает более высокую тенденцию к нормализации общего уровня 11-ОКС и меньшую токсичность радиопротектора РС-11 по сравнению с РС-10. В течение первых суток выявлена нормализация общего уровня 11-ОКС в крови опытных животных при введении как РС-10, так и РС-11 (табл. 1). Полученные результаты подтверждают положения о стимулирующем влиянии полисахаридов на гипофиз, который регулируется пред-существующим уровнем циркулирующих глюкокортикоидов.

Таблица 1

Динамика изменения общей концентрации 11-ОКС в плазме крови интактных кроликов после введения РС-10, РС-11 и физиологического раствора

Группа кроликов	Показатели	Общее содержание 11-ОКС, мкг/100 мл
		До введения	После введения, ч
			1	2	3	6	24
ОГ1 (введение РС-10)	M±m n P	7,4±0,6 10 -	14,2±0,5 10 <0,001	18,7±2,1 10 <0,001	17,9±0,6 10 <0,001	11,6±0,8 10 <0,01	7,3±0,5 10 >0,05
ОГ2 (введение РС-11)	M±m n P	6,9±1,0 5 -	13,6±0,7 5 <0,001	18,1±2,3 5 <0,001	17,7±1,5 5 <0,001	11,5±1,1 5 <0,05	8,5±1,2 5 >0,05
КГ1 (введение физ. раствора)	M±m n P	7,5±0,4 4 -	7,45±0,3 4 >0,05	7,0±0,2 4 >0,05	7,25±0,4 4 >0,05	6,7±0,3 4 >0,05	7,3±0,2 4 >0,05
КГ2 (введение физ. раствора)	M±m n P	8,2±1,5 3 -	9,6±1,0 3 >0,05	7,8±1,7 3 >0,05	9,1±1,0 3 >0,05	8,0±0,9 3 >0,05	6,7±0,8 3 >0,05
Р 1 Р 2		- -	<0,001 <0,05	<0,001 <0,05	<0,001 <0,01	<0,001 ≤0,05	>0,05 >0,05

Примечание: P – критерий существенности различий у животных каждой группы по сравнению с исходным показателем; Р 1 – то же у животных между контрольной и опытной группой при введении РС-10 (ОГ1); Р 2 – то же у животных между контрольной и опытной группой при введении РС-11 (ОГ2); КГ1 (введение физраствора) – контроль с группой кроликов при введении РС-10; КГ2 (введение физраствора) – контроль с группой кроликов при введении РС-11.

Изучение фракционного состава в период максимальной выраженности реакции коры надпочечников после введения радиопротекторов через 2,5-3 ч показало, что уровень свободных кортикостероидов в группе опытных кроликов при введении РС-10 достигал 6,2 ± 0,9 мкг%, что составляло 32% от общего количества 11-ОКС, тогда как в норме у кроликов свободные кортикостероиды практически отсутствуют, а содержание связанных с белками плазмы 11-ОКС достоверно увеличивалось до 13,0 ± 0,8 мкг/100 мл (Р<0,001) (табл. 2).

В группе опытных кроликов при введении РС-11 уровень свободных кортикостероидов достигал 4,1 ± 0,4 мкг/100 мл, что составляет 23,2% от общего количества 11-ОКС, что ниже по сравнению с показателями опытной группы кроликов, которым был введён РС-10 на этот срок. Содержание связанных с белками плазмы 11-ОКС достоверно увеличивалось до 13,4 ± 1,2 мкг/100 мл (Р<0,001). Связывающая способность КСГ после введения РС-11 практически не изменялась. В контрольных группах интактных животных введение физиологического раствора не вызывало достоверных изменений ни в концентрации кортикостероидов, ни в связывающей способности КСГ (табл. 2).

Таким образом, у интактных животных при введении радиопротекторов, в отличие от животных контрольных групп, в период максимальной выраженности реакции наблюдается не только повышение общего уровня 11-ОКС, но и повышение уровня свободных кортикостероидов и содержания связанных с белками плазмы 11-ОКС при отсутствии изменений связывающей способности КГС. Повышение свободной фракции гормона у кроликов при введении радиопротекторов РС-10 и РС-11 в этот период обусловлено повышением общего уровня 11-ОКС, так как связывающая способность КСГ при этом не изменялась.

Во второй серии экспериментов на облучённых животных через 2,5 ч после облучения наблюдалась картина, аналогичная изменениям фракционного состава 11-ОКС у интактных кроликов, защищённых радиопротекторами (табл. 3).

Таблица 2

Влияние радиопротекторов РС-10 и РС-11 на фракционный состав 11-ОКС, связывающую способность КСГ в крови интактных животных

Группа кроликов	Стати-стиче-ские показатели	До начала опыта					Че	ез 2,5-3 ч после начала опыта
		общий уровень гормона, мкг/100 мл	свободный гормон		связанный гормон, мкг/100 мл	связывающая способность КСГ, мкг/100 мл	общий уровень гормона, мкг/100 мл	свободный гормон		связанный гормон, мкг/100 мл	связывающая способность КСГ, мкг/100 мл
			5 с l: 2 2	%				5 q l: 2 2	%
ОГ1 (введение РC-10)	М m n P	7,9 0,6 7	Практически отсутствует		7,7 0,6 7	12,5 0,6 7	19,2 1,0 7 <0,001	6,2 0,9 7 <0,	32 001	13,0 0,8 7 <0,001	11,8 0,7 7 >0,05
ОГ2 (введение РC-11)	М m n P	6,9 1,1 5	Практически отсутствует		6,9 1,0 5	13,2 0,8 5	17,7 1,5 5 <0,001	4,1 0,4 5 <0,01	23,2	13,4 1,2 5 <0,01	13,6 0,9 5 >0,05
КГ1 (введение физ. раствора)	М m n P	8,7 1,0 3	Практически отсутствуют		8,7 1,0 3	13,8 1,0 3	9,5 0,7 3 >0,05	0,3 0,1 >0	0 ,05	9,2 0,8 3 >0,05	12,7 0,8 3 >0,05
КГ2 (введение физ. раствора)	М m n Р	8,2 1,5 3	Практически отсутствует		8,2 1,5 3	15,4 1,3 3	7,0 1,2 3 >0,05	Практически отсутствует		9,3 1,4 3 >0,05	14,0 1,0 3 >0,05
Р 1 Р 2							<0,001 <0,01			<0,001 <0,05	>0,05 >0,05

Примечание: P – критерий существенности различий у животных каждой группы по сравнению с исходным показателем; Р 1 – то же у животных между контрольной (КГ1) и опытной группой (ОГ1) при ведении РС-10; Р2 – то же у животных между контрольной (КГ2) и опытной группой (ОП2) при введении РС-11; КГ1 (введение физраствора) – контроль с группой, защищённых РС-10; КГ2 (введение физраствора) – контроль с группой, защищённых РС-11.

Таблица 3

Влияние радиопротекторов РС-10 и РС-11 на фракционный состав 11-ОКС, связывающую способность КСГ в крови облучённых животных

Группа кроликов	С о	До облучения		После облучения
		о _ с; Ш S р ^ (О 5	™£§ Н = 1 8 °о S “^	2,5 ч				4-е сут				8-е сут
				ё oh § s^g О 1" § S	■s^g Ho ^^ g“ 1	свободный гормон		2 oh § 2^8 О 1" § S	8i i ■s^g Ho^^ 8“ 1	свободный гормон		2 oh i 2^8 О 1" § S	8i i ■s^g Ho ^^ ЮШ I	свободный гормон
						мкг/100 мл	%			мкг/100 мл	%			мкг/100 мл	%
ОГ1	М	7,5	12,9	12,3	15,6	4,0	25	8,3	8,0	0,8	10	9,6	8,2	практи-	4
защи-	m	0,5	0,6	0,8	1,3	0,8		0,8	0,8	0,2		0,2	0,7	чески
щённые	n	10	10	10	10	10		8	8	8		7	7	отсут-
РС-10	P			˃0,05	˂0,001	˂0,001		˂0,001	˃0,05	˃0,05		˂0,001	˃0,05	ствуют
ОГ2	М	7,6	15,2	15,0	14,7	3,0	20,4	11,3	8,5	0,9	8	13,4	9,0	практи-
защи-	m	0,9	0,7	0,9	0,7	0,5		0,9	1,0	0,5		1,0	0,9	чески
щённые	n	8	8				8	8	8			8	8	отсут-
РС-11	P			>0,05	<0,001	<0,05		<0,05	>0,05	>0,05		>0,05	>0,05	ствуют
	М	7,3	13,1	11,9	12,2	1,8	15	3,8	5,8	2,3	39	5,0	4,5	0,6	13
	m	0,9	0,8	0,9	1,0	0,5		0,5	0,6	0,3		0,6	0,4	0,2
КГ1
	n	8	8	8	8	8		6	6	6		5	5	5
	P			>0,05	˂0,01			˂0,001	>0,05	˂0,05		˂0,001
	М	8,8	15,5	14,8	11,9	1,9	15,9	5,3	6,0	2,46	41	6,7	5,5
	m	1,0	1,1	1,0	0,8	0,4		0,7	0,4	0,2		0,9	0,6
КГ2
	n	5	5	5	5	5		5	5	5		5	5
	P			>0,05	<0,05	<0,05			<0,05			<0,001	<0,05
Р 1				˃0,05	˂0,05	˂0,05		˂0,001	˂0,05	<0,01		˂0,01	˂0,001	>0,05
Р 2				>0,05	<0,05			<0,001	<0,05	<0,01		<0,001	˂0,001	>0,05

Примечание: P – критерий существенности различий у животных каждой группы по сравнению с исходным показателем; Р 1 – то же у животных между контрольной (КГ1) и опытной группой при введении РС-10 (ОГ1); Р 2 – то же у животных между контрольной и опытной группой при введении РС-11 (ОГ2); КГ1 – облучённый контроль с группой, защищённых РС-10; КГ2 – облучённый контроль с группой, защищённых РС-11.

В опытной группе защищённых РС-10 кроликов выявлено достоверное повышение уровня суммарных 11-ОКС с 7,5 ± 0,5 до 15,6 ± 1,3 мкг/100 мл по сравнению с исходным показателем (Р<0,001). Содержание свободных кортикостероидов при этом так же было достоверно увеличено и достигало 4,0 ± 0,8 мкг/100 мл, что составляет 25% от общего уровня 11-ОКС (Р<0,001). Связывающая способность КСГ при этом не изменялась, составляя 12,3 ± 0,8 мкг/100 мл. В крови контрольных облучённых кроликов (КГ1) общее содержание 11-ОКС достоверно увеличивалось до 12,2 ± 1,0 мкг/100 мл (Р<0,01), но оставалось достоверно ниже, чем у защищённых РС-10 кроликов (Р 1 ˂0,05). Уровень свободного гормона был равен 1,8 ± 0,5 мкг/100 мл, что составляло 15% от общего уровня кортикостероидов в крови, в то время как в норме эта фракция практически отсутствовала.

В опытной группе облучённых кроликов, предварительно защищённых РС-11, так же наблюдалось достоверное повышение общего содержания 11-ОКС в крови по сравнению с исходным показателем с 7,6 ± 0,9 до 14,7 ± 0,7 мкг/100 мл (Р<0,001). Уровень свободной фракции гормона был равен 3,0 ± 0,5 мкг/100 мл, что составляло 20,4% от общего содержания 11-ОКС (Р<0,05). Связывающая способность КСГ при этом не изменялась, составляя 15,0 ± 0,9 мкг/100 мл против 15,2 ± 0,7 мкг/100 мл в норме. В крови контрольных облучённых кроликов (КГ2) общее содержание 11-ОКС увеличивалось до 11,9 ± 0,8 мкг/100 мл (Р<0,05). Уровень свободного гормона был равен 1,9 ± 0,4 мкг/100 мл, что составляло 15,9% от общего уровня кортикостероидов в крови (Р<0,05), в то время как в норме эта фракция практически отсутствовала, а связывающая способность КСГ практически не изменялась, составляя 14,8 ± 1,0 мкг/100 мл против 15,5 ± 1,1 мкг/100 мл в норме.

Таким образом, появление свободной фракции гормона в первые часы после облучения у кроликов как контрольных групп, так и у кроликов, защищённых радиопротекторами РС-10 и РС-11, обусловлено повышением общего уровня 11-ОКС, так как связывающая способность КСГ при этом не изменялась.

Влияние радиопротекторов позволило оценить роль функционального состояния коры надпочечников в исходе лучевой болезни. Для этого проведены исследования измерения общего уровня 11-ОКС в крови отдельно у погибших и выживших животных.

В группе защищённых РС-10 животных реакция коры надпочечников была более выраженной у погибших, чем у выживших животных, составляя 17,3 ± 1,3 и 12,3 ± 0,7 мкг/100 мл (Р<0,001). В группе контрольных (облучённых без защиты) наоборот: реакция коры надпочечников у погибших была менее выраженной, чем у выживших, составляя 9,0 ± 0,4 и 12,8 ± 1,4 мкг/100 мл (Р<0,05). В группе защищённых РС-11 животных погибло 2 кролика, у которых в первые часы после облучения был высокий уровень 11-ОКС (16,9 и 16,1 мкг/100 мл). В группе контрольных облучённых животных погиб 1 кролик, у которого общий уровень 9,5 мкг/100 мл.

Необходимо обратить внимание на общую закономерность, согласно которой у всех погибших животных в первые часы после облучения реакция коры надпочечников была либо слабее, либо значительно сильнее, чем у выживших. Это показывает, что выраженность первичной реакции коры надпочечников связана с механизмами, определяющими радиорезистентность организма животных. При условии, когда первичная реакция чрезмерна или слишком слаба, нарушены механизмы, её обуславливающие, а значит, степень лучевого повреждения весьма велика и прогноз неблагоприятен. Результаты экспериментов показали, что реакция коры надпочечников у выживших без защиты животных является своеобразным маркером «оптимального» уровня гормона, так как она является защитной только в своём оптимальном уровне.

Таким образом, величина первичной реакции коры надпочечников является одним из показателей степени тяжести лучевой болезни. Одним из механизмов радиозащитного эффекта радиопротекторов является установление оптимальной реакции коры надпочечников в первые часы после облучения. Отличие ранней адренокортикальной реакции у облучённых и защищённых радиопротекторами животных от оптимальной в сторону как усиления её, так и ослабления, служит показателем тяжести лучевой болезни и прогностическим признаком её исхода.

В разгар лучевой болезни обнаружены отчётливые различия по показателям белково-сте-роидного взаимодействия у защищённых радиопротекторами РС-10 и РС-11 и контрольных животных. У защищённых РС-10 облучённых животных на 4 сут лучевой болезни общее содержание 11-ОКС было достоверно выше, чем у контрольных животных (8,0 ± 0,8 мкг/100 мл и 5,8 ± 0,6 мкг/100 мл в КГ1, Р 1 <0,05), но уже не имел достоверных отличий по сравнению с исходным уровнем до облучения (7,5 ± 0,5 мкг/100 мл, Р>0,05). Связывающая способность КСГ у защищённых РС-10 облучённых животных хотя и была снижена, но более чем в 2 раза превышала данный показатель у контрольных облучённых кроликов (8,3 ± 0,8 мкг/100 мл и 3,8 ± 0,5 мкг/100 мл в КГ1, P i <0,001). В результате данного соотношения между общей концентрацией 11-ОКС и связывающей способностью КСГ у защищённых РС-10 облучённых кроликов выявлено достоверно меньшее количество свободного гормона 0,8 ± 0,2 мкг/100 мл при 2,3 ± 0,3 мкг/100 мл в контроле (Р1<0,01).

У защищённых РС-11 животных на 4-е сутки после облучения общий уровень гормона также оставался в пределах нормы (8,5 ± 1,0 мкг/100 мл) и был достоверно выше, чем у контрольных животных (6,0 ± 0,4 мкг/100 мл в КГ2, Р 2 <0,05). Уровень свободного гормона находился в пределах 0,9 ± 0,5 мкг/100 мл и составлял лишь 8% от общего уровня 11-ОКС в отличие от контроля - 2,46 ± 0,2 мкг/100 мл, который составлял 41% от общего уровня 11-ОКС (Р 2 <0,01). Связывающая способность КСГ у защищённых РС-11 кроликов в этот срок эксперимента также была снижена по сравнению с нормальными значениями (11,3 ± 0,9 и 15,2 ± 0,7 мкг/100 мл соответственно, Р<0,01), однако была достоверно выше, чем у контрольных животных (5,3 ± 0,7 мкг/100 мл, Р2<0,001).

Таким образом, на 4-й день после облучения у защищённых радиопротекторами животных, несмотря на более высокий общий уровень гормона, содержание его свободной фракции за счёт более высокой связывающей способности КСГ было ниже, чем у контрольных облучённых животных.

В динамике острой лучевой болезни на 8-е сут у защищённых РС-10 и РС-11 животных общий уровень 11-ОКС также не отличался от нормы (8,2 ± 0,7 мкг/100 мл и 9,0 ± 0,9 мкг/100 мл соответственно), будучи достоверно выше, чем в контроле (4,5 ± 0,4 мкг/100 мл, Р 1 <0,001 в КГ1 и 5,5 ± 0,6 мкг/100 мл, Р 2 <0,001 в КГ2). Однако, у защищённых РС-11 кроликов общий уровень гормона в этот период несколько выше исходного уровня в отличие от опытной группы животных, защищённых РС-10.

Связывающая способность КСГ у защищённых РС-10 животных была достоверно сниженной по сравнению с исходным уровнем (9,6 ± 0,2 мкг/100 мл, Р<0,001) в отличие от опытной группы животных, защищённых РС-11, данный показатель у которых в этот срок не отличался от исходного уровня (13,4 ± 1,0 мкг/100 мл, Р>,05), что демонстрирует более высокую радиозащитную эффективность препарата РС-11. В отличие от опытных групп связывающая способность КСГ у облучённого контроля была практически в 2 раза меньше (5,0 ± 0,6 мкг/100 мл, Р 1 <0,01 в КГ1 и

6,7 ± 0,9 мкг/100 мл, Р 2 <0,001 в КГ2), у которого любые стрессорные воздействия на фоне сниженной связывающей способности КСГ могли привести к появлению значительных количеств свободных 11-ОКС.

Свободные 11-ОКС у защищённых радиопротекторами РС-10 и РС-11 и контрольных кроликов практически отсутствовали. Таким образом, профилактическое введение животным радиопротекторов РС-10 и РС-11 приводило к снижению уровня свободного гормона и вследствие этого - к уменьшению гиперкортицизма, повышая резервные возможности связывающей способности КСГ в разгар лучевой болезни.

Сравнительный анализ механизма влияния радиопротекторов РС-10 и РС-11 на функцию коры надпочечников у интактных животных показал в обоих случаях повышение общего уровня 11-ОКС в крови, достигающего максимума через 2,5-3 ч с дальнейшей нормализацией гипофизарно-надпочечниковой активности через 24 ч. В период максимальной выраженности реакции влияние РС-10 на повышение величины свободного гормона у интактных животных достоверно выше, чем у РС-11 (6,2 ± 0,9 и 4,1±0,4 соответственно) при одинаковом повышении содержания связанных с белками плазмы 11-ОКС и отсутствии влияния на связывающую способность КСГ обоих радиопротекторов.

Сравнительный анализ механизма влияния радиопротекторов РС-10 и РС-11 на функцию коры надпочечников облучённых животных показал, что общей закономерностью повышения радиорезистентности организма облучённых животных в условиях действия радиопротекторов является положение, согласно которому их профилактическое введение в разгар лучевой болезни тормозит снижение связывающей способности КСГ, а, вследствие этого, и повышение уровня свободного гормона. Более высокая радиозащитная эффективность РС-11 по сравнению с РС-10 подтверждается достоверно меньшим количеством погибших животных в ходе эксперимента (41% в группе защищённых РС-10 и 20% в группе защищённых РС-11 кроликов). В патогенезе острой лучевой болезни в механизме уменьшения пострадиационного гиперкортицизма в условиях действия радиопротекторов основное значение имеет меньшая степень нарушения связывающей способности КСГ, а не изменение общего уровня 11-ОКС в крови.

Выявлены общие механизмы радиозащитного действия радиопротекторов РС-10 и РС-11 в контексте их влияния на изменение связывания кортикостероидов с белками плазмы крови у здоровых и облучённых животных. У интактных животных при введении радиопротекторов в период максимальной выраженности реакции наблюдается повышение свободной фракции гормона, которое обусловлено повышением общего уровня 11-ОКС, так как связывающая способность КСГ при этом не изменяется. Первичная реакция коры надпочечников в патогенезе острой лучевой болезни является показателем степени её тяжести, поскольку одним из механизмов ра-диозащитного эффекта радиопротекторов выступает оптимальная реакция коры надпочечников в первые часы после облучения. В разгар лучевой болезни профилактическое введение животным радиопротекторов РС-10 и РС-11 приводит к снижению уровня свободного гормона и, вследствие этого, - к уменьшению гиперкортицизма, повышая резервные возможности связывающей способности КСГ. В механизме уменьшения пострадиационного гиперкортицизма в условиях действия радиопротекторов основное значение имеет меньшая степень нарушения связывающей способности КСГ, а не изменение общего уровня 11-ОКС в крови, что является общей радиобиологической закономерностью.

Заключение

Результаты, полученные в данной серии экспериментов, позволили сделать следующие выводы:

• 1.    Введение интактным животным радиопротекторов РС-10 и РС-11 приводит в первые часы после введения к повышению общей концентрации 11-ОКС плазмы крови и к увеличению количества свободного гормона. Влияние РС-10 на повышение уровня свободного гормона выше, чем у РС-11 при одинаковом повышении содержания связанных с белками плазмы 11-ОКС и отсутствии влияния на связывающую способность КСГ обоих радиопротекторов.

• 2.    Механизмом радиозащитного действия радиопротекторов у облучённых животных является установление оптимальной реакции коры надпочечников в первые часы после облучения. Отличие ранней адренокортикальной реакции у облучённых и защищённых радиопротекторами животных от оптимальной в сторону как её усиления, так и ослабления служит показателем тяжести лучевой болезни и прогностическим признаком её исхода.

• 3.    В разгар лучевой болезни профилактическое введение РС-10, РС-11 облучённым животным тормозит снижение связывающей способности КГС плазмы крови, а вследствие этого и повышение уровня свободного физиологически активного гормона при более высоком общем уровне гормонов в крови.

• 4.    В механизме уменьшения пострадиационного гиперкортицизма в условиях защиты препаратами РС-10 и РС-11 основное значение имеет меньшая степень нарушения связывающей способности КСГ, а не изменение общего уровня гормонов в крови.

• 5.    Более высокая радиозащитная эффективность РС-11 по сравнению с РС-10 подтверждается достоверно высоким показателем связывающей способности КСГ в разгар лучевой болезни и более благоприятным исходом лучевой болезни в ходе эксперимента.

Таким образом, существующее в радиобиологии фундаментальное положение о реакции гипофиз-адреналовой системы в патогенезе острой лучевой болезни и в условиях повышенной резистентности действия радиопротекторов нуждается в уточнении.