Содержание меди в нейтрофилах крови животных при остром и хроническом действии сероводорода

Zaporizhzhian National University, Zaporizhzhya, Ukraine

В результате острого воздействия сероводорода наблюдается дефицит меди в нейтрофилах крови животных, а в хроническом эксперименте – повышение концентрации металла. Полученные результаты можно отнести соответственно к стадиям тревоги и истощения общего адаптационного синдрома.

As a result of sharp influence of the sulphuretted hydrogen there is a deficit of copper in the blood neutrophils animals, and in a chronic experiment is an increase concentration of metal. The goten results could be attributed to the stages of alarm and exhaustion of general adaptation syndrome accordingly.

В литературе недостаточно изучен вопрос о роли меди в механизмах клеточных реакций на действие стрессогенных факторов, что связано с методическими сложностями определения этого металла. Последний, как известно, играет важную роль в системе антиоксидантной защиты организма. Медь нейтрализует свободные радикалы, поскольку является кофактором фермента супероксиддисмутазы [1]. Учитывая это, можно предположить, что изменения клеточной концентрации меди при стрессе являются одним из важных факторов, который обусловливает такую реакцию [2].

В качестве стресс-фактора был выбран сероводород – газ обладающий удушающим и общеотравляющим действием. Вдыхание воздуха с повышенным содержанием сероводорода вызывает раздражение верхних дыхательных путей, повреждение легочной ткани, потерю обоняния и спазм голосовой щели.

Влияние повышенного содержания сероводорода в атмосферном воздухе на состояния здоровья населения является актуальным вопросом экологии и медицины. В крупных промышленных центрах, где расположены предприятия химической, нефтехимической, целлюлозно-бумажной, металлургической отраслей, регулярно фиксируются высокие уровни содержания сероводорода в воздухе, в пределах от незначительного (в 1,5 раза выше нормы) и до пятнадцатикратного превышения предельно допустимой концентрации [3].

Исходя из важности биологических функций меди, как эссенциального микроэлемента, стоящего на третьем месте по содержанию в организме человека после железа и цинка, представляло интерес исследование изменения внутриклеточного содержания этого металла в нейтрофильных гранулоцитах крови в условиях острого и хронического стрес-сирования сероводородом. Для цитохимического определения меди использовали высокочувствительную реакцию дитиооксамида. Применение реакции позволило выявить медь в нейтрофилах крови, в цитоплазме которых и находится металл, легко доступный для взаимодействия с дитиооксамидом. Метод защищен патентом на изобретение [4].

Для моделирования ситуации токсического действия сероводорода в эксперименте были использованы белые нелинейные мыши и крысы. Подопытных животных помещали в герметично закрывающуюся камеру, в которой находилась емкость объемом 100 мл, содержащая дистиллированную воду, 50 г сульфида натрия и 20 мл концентрированной серной кислоты. Животные находились в камере на протяжении 2 часов в остром эксперименте. В хроническом эксперименте такую процедуру повторяли на протяжении 3 суток.

После окрашивания мазков крови животных дитиооксамидом, на препаратах в цитоплазме нейтрофилов выявляются гранулы темно-зеленого цвета. Количество окрашенных гранул является показателем содержания меди в клетках. В дальнейшем интенсивность цитохимической реакции оценивали полуколичественным методом по трехбальной системе.

В контрольных (интактных) группах мышей и крыс интенсивность цитохимичной реакции дитиооксамида в нейтрофильных гранулоцитах составляла 0,5±0,05 и 0,6±0,06 условных единиц соответственно. В результате острого стрессирования дефицит меди в нейтрофильных гранулоцитах крови мышей составлял 20 % (0,4±0,04 условных едини; р > 0,05), а у крыс – 17 % (0,5±0,06 условных единиц; р > 0,05). Многоразовое влияние сероводорода вызвало повышение внутриклеточного содержания меди у мышей на 33 % (0,7±0,06 уловных единиц.; р > 0,05) и на 40 % (0,8±0,07 условны единиц; р < 0,05) у крыс.

Прикладные аспекты экологии человека

ÐÀЗÄÅЛ 3

Дефицит меди в нейтрофилах крови остро стрессированных мышей и крыс отвечает стадии тревоги общего адаптационного синдрома, а накопление металла в исследуемых клетках животных в условиях хронического эксперимента – стадии истощения стресса.