The content of TNF and IL-6 in liver tissue, ductal bile and blood serum in patients with benign obstructive jaundice
Автор: Hajiyev J.N., Tagiyev E.G., Hajiyev N.J., Guliyev M.R.
Журнал: Вестник Национального медико-хирургического центра им. Н.И. Пирогова @vestnik-pirogov-center
Рубрика: Оригинальные статьи
Статья в выпуске: 2 т.11, 2016 года.
Бесплатный доступ
In surgical treatment of 67 patients with obstructive jaundice, liver tissue taken during surgery, bile duct and blood serum in the comparative assessment of the dynamics of studied concentration TNFα and IL-6. All patients postoperatively received conventional basic intensive therapy. The degree of hepatic dysfunction was assessed using markers of cholestasis (total bilirubin level and the activity of alkaline phosphatase) and hepatocyte cytolysis (alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase). Our research has shown that the depth of the changes studied parameters depends on the severity of hepatic dysfunction. TNFα content was higher in the bile duct, then in the blood and liver tissue. For IL-6 is a characteristic higher concentration in the bile and then into the liver and blood. The simultaneous increase in the content of cytokines in obstructive jaundice in the liver, bile and blood indicates the development of cytokine imbalance at local and systemic level. In the postoperative period revealed the same type of directional changes in the level TNFα and IL-6 in the bile and the blood reflects the peculiarities of the pathological process.
Obstructive jaundice, suppurative cholangitis, cytokines
Короткий адрес: https://sciup.org/140188560
IDR: 140188560
Текст научной статьи The content of TNF and IL-6 in liver tissue, ductal bile and blood serum in patients with benign obstructive jaundice
Лечение желчнокаменной болезни (ЖКБ), осложненной синдромом механической желтухи (МЖ), остается одним из актуальных вопросов хирургии. ЖКБ в 78,6% случаев осложняется холедохолитиазом [2] и при этом у 60–70% больных холедохолитиаз сопровождается МЖ [4], а у 40,5% – развивается гнойный холангит (ГХ) [1].
Развивающееся нарушение иммунного статуса на фоне МЖ оказывает существенное влияние на течение патологического процесса, развитие гнойно-воспалительных осложнений и исход хирургического лечения [3, 5, 6].
Изучение роли цитокинов в иммунном и воспалительном ответе имеет важное значение не только для современной иммунологии, но и для хирургии. Известно, что цитокины являются важными участниками и связующими звеньями систем иммунитета, гомеостаза и неспецифической резистентности при любой патологии. Поскольку продукция цитокинов в основном индуцируется в патологическом очаге, их уровни целесообразно определить в соответствующих тканях или средах. Однако, до настоящего времени содержание цитокинов в ткани печени (ТП), протоковой желчи и сыворотке крови остается практически не изученным [3].
Целью данного исследования явилось сравнительное изучение содержания провоспалительных цитокинов TNF α и IL-6 в ТП, протоковой желчи и сыворотке крови у больных МЖ доброкачественного генеза.
Материалы и методы
Под наблюдением находились 67 пациентов (мужчин – 38, женщин – 29) в возрасте 16–84 лет с МЖ. У всех больных причиной МЖ был холедохолитиаз. Длительность желтухи составила от 1 до 17 дней. Все пациенты после адекватной предоперационной подготовки были оперированы спустя 1–3 сутки после госпитализации: холецистэктомия, холедохолитотомия и наружное дренирование холедоха по Керу выполнена у 37 больным, холецистэктомия и наложение билиодигестивного анастомоза – у 15 больным, малоинвазивные вмешательства – у 15 больных (одномоментная эндоскопическая папиллосфинктерото-мия – 10 и механическая литоэкстраксия –5 ).
Степень печеночной дисфункции (ПД) оценивали с помощью маркеров холестаза (уровень общего билирубина и активность щелочной фосфотазы) и цитолиза гепатоцитов (активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы): ПД 1 степени (уровень общего билирубина до 50 мкмоль/л) была у 21 больных, ПД 2 степени (уровень общего билирубина от 50 до 100 мкмоль/л) – у 14, ПД 3 степени (уровень общего билирубина от 100 до 200 мкмоль/л) – у 10, ПД 4 степени (уровень общего билирубина свыше 200 мкмоль/л) – у 9 больных. У 13 больных на фоне МЖ был гнойный холангит (ГХ).
Определение концентраций TNF α и IL-6 в ТП, протоковой желчи и сыворотке крови выполнено методом
Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.
СОДЕРЖАНИЕ TNF α И IL-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА
ИФА с использованием реактивов Dender Medsistems (USA).
Концентрацию TNF α и IL-6 определяли в супернатантах в ТП, взятых во время операции, в протоковой желчи – в первой порции взятой во время операции, на 3-и, 7-е сутки после наружной билиарной декомпрессии, а в сыворотке крови – до, на 3-и и 7-е сутки после операции. Цитокины в сыворотке крови определяли у 67 больных: у 21 – с ПД 1 степени, у 14 – с ПД 2 степени, у 10 – с ПД 3 степени, у 9 – с ПД 4 степени и у 13 – с МЖ и ГХ. Из них у 42 также исследовали первую порцию протоковую желчь взятой во время операции (ПД 1 степени – 6, ПД 2 степени – 7, ПД 3 степени – 7, ПД 4 степени – 9, МЖ и ГХ – 13) и у 42 в также ТП (ПД 1 степени – 6, ПД 2 степени – 7, ПД 3 степени – 7, ПД 4 степени – 9, МЖ и ГХ – 13). После наружной билиарной декомпрессии концентрация TNF α и IL-6 были исследованы в динамике у 37 больных (с каждой степени ПД- у 6 и с ГХ- у 13).
Всем больным была проведена стандартная общепринятая консервативная терапия. Концентрацию TNF α и IL-6 в сыворотке крови у 15 практически здоровых лиц приняли в качестве контроля. Локальное содержание обеих цитокинов изучали в гепатобиоптатов, взятых у 10 здоровых добровольцев с помощью пункционной биопсии.
Математическая обработка результатов проведена с использованием методов вариацинной статистики и непараметрической критерии Уилкоксона-Манна-Уитни.
Результаты и обсуждения
В целом по группе установлено, что концентрация обоих провоспалительных цитокинов в ТП и протоковой желчи отличалась от таковой в сыворотке крови (табл. 1).
В целом по группе концентрация TNF α в ТП превышал показателя у здоровых лиц в 12,0 раза (p < 0,001), а в крови – в 2,3 раза (p < 0,001). Содержание IL-6 у этих больных в ТП превышал контроля в 12,5 раза (p < 0,001), а в крови в 2,1 раза (p < 0,001).
Как видно из таблицы 1, в целом по группе в желчи концентрация TNF α в значительной степени превышала его содержание в ТП и в сыворотке крови. В то же время концентрация IL-6 в желчи и ТП была больше, чем в крови.
Как видно из таблицы 1, с увеличением степени ПД параллельно повышается содержание обоих цитокинов во всех 3-х биосредах. Однако, при всех степенях тяжести ПД содержание TNF α было больше в желчи, чем в крови и ТП. А у больных МЖ и ГХ концентрация данного цитокина в крови соответствовала её значению в протоковой желчи, но в обеих биосредах была больше, чем в ТП.
У больных с различными степенями ПД отмечалось превышение уровня IL-6 в желчи такового в ТП и крови, а при МЖ с ГХ в ТП- было больше чем желчи и крови.
Таким образом, содержание TNF α было более высоким в протоковой желчи, затем в крови и ТП. А для IL-6 являлось характерным более высокая концентрация в желчи, затем в ТП и крови.
Сравнительная динамика показателей TNF α и IL-6 в послеоперационном периоде представлена в табл. 2. В протоковой желчи на 3-и сутки после операции наблюдалось статистически недостоверное повышение концентрации обеих провоспалительных цитокинов по сравнению с показателями до наружной декомпрессии. На 7-е сутки после операции отмечалось в значительной степени снижение содержания TNF α и IL-6 в желчи по сравнению с предыдущим сроком. После операции в динамике изменений обеих цитокинов в крови тоже
Табл. 1. Содержание цитокинов в ТП, протоковой желчи и в крови больных с МЖ
|
Цито– кины, пкг/мл |
Биосреда |
В целом по группе |
Больные с МЖ 1 степени |
Больные с МЖ 2 степени |
Больные с МЖ 3 степени |
Больные с МЖ 4 степени |
Больные с МЖ и ГХ |
Здоровые люди (контроль) |
|
TNF α |
ТП |
63,4 ± 3,4 26,8–120 *** |
46,4 ± 6,2 26,8–68,1 *** |
58,8 ± 6,5 36,7–86,3 *** |
66,7 ± 8,1 40,1–98,6 *** |
69,5 ± 6,4 41,5–103,1 *** |
72,2 ± 9,1 51,8–120 *** |
5,3 ± 0,5 1,6–7,2 |
|
Желчь |
109,2 ± 3,5 75–148 |
82,4 ± 3,0 75–94,2 |
99,2 ± 6,3 76,1–122 |
115,8 ± 9,3 76,5–142 |
118,3 ± 9,2 78,1–148 |
118,5 ± 3,8 98,2–136 |
– |
|
|
Сыворотка крови |
94,8 ± 3,4 56,2–166 *** |
78,4 ± 3,2 56,2–96,1 *** |
87,2 ± 6,5 56,2–121 *** |
105,6 ± 8,9 59,5–136 *** |
110,7 ± 9,6 61,5–141 *** |
109,9 ± 8,7 66,2–166 *** |
40,5 ± 1,7 28,6–51,2 |
|
|
IL–6 |
ТП |
55,5 ± 5,0 16,3–125 *** |
30,8 ± 8,5 16,3–71,5 ** |
49,6 ± 7,1 18,6–76,4 *** |
60,3 ± 12,1 21,8–115,8 *** |
63,8 ± 10,4 23,1–121 *** |
67,7 ± 13,7 26,1–125 *** |
4,4 ± 0,6 0,9–6,9 |
|
Желчь |
57,5 ± 5,1 12,1–133 |
48,3 ± 7,2 17,7–69,1 |
57,2 ± 9,4 19,8–89,4 |
65,1 ± 13,7 23,6–121 |
67,5 ± 11,9 23,8–123 |
50,4 ± 11,9 12,1–133 |
– |
|
|
Сыворотка крови |
38,8 ± 2,5 12,6–101 *** |
26,8 ± 1,3 19,6–39,7 *** |
33,4 ± 1,7 21,1–40,3 *** |
49,4 ± 4,4 21,1–61,5 *** |
53,1 ± 6,1 25,7–71,6 *** |
46,0 ± 10,0 12,6–101 ** |
18,3 ± 1,2 12,2–26,6 |
Примечание: достоверность с показателями контрольной группы: * – p < 0,05; ** – p < 0,01; *** – p < 0,001.
Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.
СОДЕРЖАНИЕ TNF α И IL-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА
Табл. 2. Сравнительная динамика TNF α и IL-6 в разных средах в зависимости от степени ПД
|
Цито– кины, пкг/ мл |
Биосреда |
Степень ПД |
До операции (интраопер.) |
На 3–и сутки по-слеопер. |
На 7–е сутки после опер. |
Здоровые люди (контроль) |
|
TNF α |
Желчь |
ПД 1 ст |
82,4 ± 3,0 75–94,2 |
90,1 ± 3,1 85–105 |
40,6 ± 9,2 22,6–85,1 ^^ |
– |
|
ПД 2 ст |
99,2 ± 6,3 76,1–122 |
117,9 ± 5,4 95,1–133 ^ |
79,8 ± 7,6 58,3–120 |
|||
|
ПД 3 ст |
115,8 ± 9,3 76,5–142 |
131,7 ± 10,3 89,3–163 |
101,3 ± 10,8 65,6–148 |
|||
|
ПД 4 ст |
118,3 ± 9,2 78,1–148 |
135,6 ± 9,1 90,5–167 |
106,1 ± 10,8 68,3–151 |
|||
|
МЖ и ГХ |
118,5 ± 3,8 98,2–136 |
138,9 ± 8,9 102–195 |
111,7 ± 4,1 95,5–144 |
|||
|
Кровь |
ПД 1 ст |
78,4 ± 3,2 56,2–96,1 *** |
95,1 ± 3,1 74,6–121 *** ^^^ |
88,0 ± 3,9 66,2–115 *** |
40,5 ± 1,7 28,6–51,2 |
|
|
ПД 2 ст |
87,2 ± 6,5 56,2–121 *** |
115,8 ± 6,3 69,4–141 *** ^^ |
101,3 ± 6,2 56,1–125 *** |
|||
|
ПД 3 ст |
105,6 ± 8,9 59,5–136 *** |
130,0 ± 9,7 69,7–161 *** |
124,1 ± 8,0 58,1–143 *** |
|||
|
ПД 4 ст |
110,7 ± 9,6 61,5–141 *** |
138,0 ± 10,5 76,1–171 *** |
129,9 ± 10,6 58,5–156 *** |
|||
|
МЖ и ГХ |
109,9 ± 8,7 66,2–166 *** |
130,5 ± 11,1 74,9–193 *** |
123,0 ± 10,6 72,6–187 *** |
|||
|
IL–6 |
Желчь |
ПД 1 ст |
48,3 ± 7,2 17,7–69,1 |
60,8 ± 8,7 39,6–95,3 |
24,4 ± 4,2 14,6–41,3 ^ |
– |
|
ПД 2 ст |
57,2 ± 9,4 19,8–89,4 |
68,8 ± 9,0 41,7–112 |
33,6 ± 2,2 28,6–46,7 ^ |
|||
|
ПД 3 ст |
65,1 ± 13,7 23,6–121 |
80,5 ± 11,8 40,3–135 |
60,7 ± 11,7 35,4–116 |
|||
|
ПД 4 ст |
67,5 ± 11,9 23,8–123 |
83,3 ± 9,8 40,1–135 |
62,1 ± 8,8 31,6–115 |
|||
|
МЖ и ГХ |
50,4 ± 11,9 12,1–133 |
62,1 ± 11,8 14,6–138 |
57,1 ± 8,5 28,2–124 |
|||
|
Кровь |
ПД 1 ст |
26,8 ± 1,3 19,6–39,7 *** |
62,2 ± 3,2 43,4–91,6 *** ^^^ |
57,5 ± 3,8 34,1–86,3 ***^^^ |
18,3 ± 1,2 12,2–26,6 |
|
|
ПД 2 ст |
33,4 ± 1,7 21,1–40,3 *** |
69,8 ± 6,7 41,7–116 ***^^^ |
60,5 ± 4,8 39,3–96,1 ***^^^ |
|||
|
ПД 3 ст |
49,4 ± 4,4 21,1–61,5 *** |
81,6 ± 11,3 39,3–131 *** ^ |
74,3 ± 10,1 39,3–126 ***^ |
|||
|
ПД 4 ст |
53,1 ± 6,1 25,7–71,6 *** |
83,5 ± 11,9 38,3–135 *** ^ |
78,8 ± 10,3 35,6–125 *** ^ |
|||
|
МЖ и ГХ |
46,0 ± 10,0 12,6–101 ** |
64,4 ± 9,8 29,9–136 *** |
55,5 ± 10,9 16,1–131 ** |
Примечание: достоверность относительно к исходной: ^ – p0< 0,05; ^^ – p0< 0,01; ^^^ – p0< 0,001.
наблюдалось аналогичная закономерность. При этом следует отметить, что на 7-е сутки при всех степенях ПД и МЖ с ГХ содержание обеих цитокинов в крови было больше, чем в желчи.
Выводы
-
1. Одновременное повышение содержание цитокинов при механической желтухе в ткани печени, желчи и крови указывает на развитие цитокинового дисбаланса на локальном и системном уровне.
-
2. Локальная продукция TNF α и IL-6 при механической желтухе взаимосвязана с тяжестью степени печеночной дисфункции и гнойным воспалением желчевыводящих путей.
-
3. Концентрация TNF α и IL-6 в желчи превышает такого в ткани печени и крови.
-
4. В послеоперационном периоде выявленные однотипные по направленности изменения уровня TNF α и IL-6 в желчи и крови отражают особенности течения патологического процесса.
