содержание TNFa и IL-6 в ткани печени, протоковой желчи и сыворотке крови при механической желтухе доброкачественного генеза

Автор: Гаджиев дЖ.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.дЖ., Гулиев М.Р.

Журнал: Вестник Национального медико-хирургического центра им. Н.И. Пирогова @vestnik-pirogov-center

Статья в выпуске: 2 т.11, 2016 года.

Бесплатный доступ

При хирургическом лечении 67 больных механической желтухой в ткани печени взятой во время операции, в протоковой желчи и в сыворотке крови динамике в сравнительной оценке изучали концентрацию TNFα и IL-6. Все больные в послеоперационном периоде получали общепринятую базисную интенсивную терапию. Степень печеночной дисфункции оценивали с помощью маркеров холестаза (уровень общего билирубина и активность щелочной фосфотазы) и цитолиза гепатоцитов (активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы). Наши исследования показали, что глубина изменений изученных показателей зависит от степени тяжести печеночной дисфункции. Содержание TNFα было более высоким в протоковой желчи, затем в крови и ткани печени. А для IL-6 являлось характерным более высокая концентрация в желчи, затем в ткани печени и крови. Одновременное повышение содержание цитокинов при механической желтухе в ткани печени, желчи и крови указывает развитие цитокинового дисбаланса на локальном и системном уровне. В послеоперационном периоде выявленные однотипные по направленности изменения уровня TNFα и IL-6 в желчи и крови отражает особенности течения патологического процесса.

Еще

Механическая желтуха, гнойный холангит, цитокины

Короткий адрес: https://sciup.org/140188560

IDR: 140188560

Текст научной статьи содержание TNFa и IL-6 в ткани печени, протоковой желчи и сыворотке крови при механической желтухе доброкачественного генеза

Лечение желчнокаменной болезни (ЖКБ), осложненной синдромом механической желтухи (МЖ), остается одним из актуальных вопросов хирургии. ЖКБ в 78,6% случаев осложняется холедохолитиазом [2] и при этом у 60–70% больных холедохолитиаз сопровождается МЖ [4], а у 40,5% – развивается гнойный холангит (ГХ) [1].

Развивающееся нарушение иммунного статуса на фоне МЖ оказывает существенное влияние на течение патологического процесса, развитие гнойно-воспалительных осложнений и исход хирургического лечения [3, 5, 6].

Изучение роли цитокинов в иммунном и воспалительном ответе имеет важное значение не только для современной иммунологии, но и для хирургии. Известно, что цитокины являются важными участниками и связующими звеньями систем иммунитета, гомеостаза и неспецифической резистентности при любой патологии. Поскольку продукция цитокинов в основном индуцируется в патологическом очаге, их уровни целесообразно определить в соответствующих тканях или средах. Однако, до настоящего времени содержание цитокинов в ткани печени (ТП), протоковой желчи и сыворотке крови остается практически не изученным [3].

Целью данного исследования явилось сравнительное изучение содержания провоспалительных цитокинов TNF α и IL-6 в ТП, протоковой желчи и сыворотке крови у больных МЖ доброкачественного генеза.

Материалы и методы

Под наблюдением находились 67 пациентов (мужчин – 38, женщин – 29) в возрасте 16–84 лет с МЖ. У всех больных причиной МЖ был холедохолитиаз. Длительность желтухи составила от 1 до 17 дней. Все пациенты после адекватной предоперационной подготовки были оперированы спустя 1–3 сутки после госпитализации: холецистэктомия, холедохолитотомия и наружное дренирование холедоха по Керу выполнена у 37 больным, холецистэктомия и наложение билиодигестивного анастомоза – у 15 больным, малоинвазивные вмешательства – у 15 больных (одномоментная эндоскопическая папиллосфинктерото-мия – 10 и механическая литоэкстраксия –5 ).

Степень печеночной дисфункции (ПД) оценивали с помощью маркеров холестаза (уровень общего билирубина и активность щелочной фосфотазы) и цитолиза гепатоцитов (активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы): ПД 1 степени (уровень общего билирубина до 50 мкмоль/л) была у 21 больных, ПД 2 степени (уровень общего билирубина от 50 до 100 мкмоль/л) – у 14, ПД 3 степени (уровень общего билирубина от 100 до 200 мкмоль/л) – у 10, ПД 4 степени (уровень общего билирубина свыше 200 мкмоль/л) – у 9 больных. У 13 больных на фоне МЖ был гнойный холангит (ГХ).

Определение концентраций TNF α и IL-6 в ТП, протоковой желчи и сыворотке крови выполнено методом

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.

СОДЕРЖАНИЕ TNF α И IL-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА

ИФА с использованием реактивов Dender Medsistems (USA).

Концентрацию TNF α и IL-6 определяли в супернатантах в ТП, взятых во время операции, в протоковой желчи – в первой порции взятой во время операции, на 3-и, 7-е сутки после наружной билиарной декомпрессии, а в сыворотке крови – до, на 3-и и 7-е сутки после операции. Цитокины в сыворотке крови определяли у 67 больных: у 21 – с ПД 1 степени, у 14 – с ПД 2 степени, у 10 – с ПД 3 степени, у 9 – с ПД 4 степени и у 13 – с МЖ и ГХ. Из них у 42 также исследовали первую порцию протоковую желчь взятой во время операции (ПД 1 степени – 6, ПД 2 степени – 7, ПД 3 степени – 7, ПД 4 степени – 9, МЖ и ГХ – 13) и у 42 в также ТП (ПД 1 степени – 6, ПД 2 степени – 7, ПД 3 степени – 7, ПД 4 степени – 9, МЖ и ГХ – 13). После наружной билиарной декомпрессии концентрация TNF α и IL-6 были исследованы в динамике у 37 больных (с каждой степени ПД- у 6 и с ГХ- у 13).

Всем больным была проведена стандартная общепринятая консервативная терапия. Концентрацию TNF α и IL-6 в сыворотке крови у 15 практически здоровых лиц приняли в качестве контроля. Локальное содержание обеих цитокинов изучали в гепатобиоптатов, взятых у 10 здоровых добровольцев с помощью пункционной биопсии.

Математическая обработка результатов проведена с использованием методов вариацинной статистики и непараметрической критерии Уилкоксона-Манна-Уитни.

Результаты и обсуждения

В целом по группе установлено, что концентрация обоих провоспалительных цитокинов в ТП и протоковой желчи отличалась от таковой в сыворотке крови (табл. 1).

В целом по группе концентрация TNF α в ТП превышал показателя у здоровых лиц в 12,0 раза (p < 0,001), а в крови – в 2,3 раза (p < 0,001). Содержание IL-6 у этих больных в ТП превышал контроля в 12,5 раза (p < 0,001), а в крови в 2,1 раза (p < 0,001).

Как видно из таблицы 1, в целом по группе в желчи концентрация TNF α в значительной степени превышала его содержание в ТП и в сыворотке крови. В то же время концентрация IL-6 в желчи и ТП была больше, чем в крови.

Как видно из таблицы 1, с увеличением степени ПД параллельно повышается содержание обоих цитокинов во всех 3-х биосредах. Однако, при всех степенях тяжести ПД содержание TNF α было больше в желчи, чем в крови и ТП. А у больных МЖ и ГХ концентрация данного цитокина в крови соответствовала её значению в протоковой желчи, но в обеих биосредах была больше, чем в ТП.

У больных с различными степенями ПД отмечалось превышение уровня IL-6 в желчи такового в ТП и крови, а при МЖ с ГХ в ТП- было больше чем желчи и крови.

Таким образом, содержание TNF α было более высоким в протоковой желчи, затем в крови и ТП. А для IL-6 являлось характерным более высокая концентрация в желчи, затем в ТП и крови.

Сравнительная динамика показателей TNF α и IL-6 в послеоперационном периоде представлена в табл. 2. В протоковой желчи на 3-и сутки после операции наблюдалось статистически недостоверное повышение концентрации обеих провоспалительных цитокинов по сравнению с показателями до наружной декомпрессии. На 7-е сутки после операции отмечалось в значительной степени снижение содержания TNF α и IL-6 в желчи по сравнению с предыдущим сроком. После операции в динамике изменений обеих цитокинов в крови тоже

Табл. 1. Содержание цитокинов в ТП, протоковой желчи и в крови больных с МЖ

Цито– кины, пкг/мл

Биосреда

В целом по группе

Больные с МЖ

1 степени

Больные с МЖ 2 степени

Больные с МЖ 3 степени

Больные с МЖ 4 степени

Больные с МЖ и ГХ

Здоровые люди (контроль)

TNF α

ТП

63,4 ± 3,4

26,8–120

***

46,4 ± 6,2

26,8–68,1

***

58,8 ± 6,5

36,7–86,3

***

66,7 ± 8,1

40,1–98,6

***

69,5 ± 6,4

41,5–103,1

***

72,2 ± 9,1

51,8–120

***

5,3 ± 0,5

1,6–7,2

Желчь

109,2 ± 3,5 75–148

82,4 ± 3,0 75–94,2

99,2 ± 6,3

76,1–122

115,8 ± 9,3

76,5–142

118,3 ± 9,2

78,1–148

118,5 ± 3,8

98,2–136

–

Сыворотка крови

94,8 ± 3,4

56,2–166

***

78,4 ± 3,2

56,2–96,1

***

87,2 ± 6,5

56,2–121

***

105,6 ± 8,9

59,5–136

***

110,7 ± 9,6

61,5–141

***

109,9 ± 8,7

66,2–166

***

40,5 ± 1,7

28,6–51,2

IL–6

ТП

55,5 ± 5,0

16,3–125

***

30,8 ± 8,5

16,3–71,5

49,6 ± 7,1

18,6–76,4

***

60,3 ± 12,1

21,8–115,8

***

63,8 ± 10,4

23,1–121

***

67,7 ± 13,7

26,1–125

***

4,4 ± 0,6 0,9–6,9

Желчь

57,5 ± 5,1

12,1–133

48,3 ± 7,2

17,7–69,1

57,2 ± 9,4

19,8–89,4

65,1 ± 13,7

23,6–121

67,5 ± 11,9

23,8–123

50,4 ± 11,9

12,1–133

–

Сыворотка крови

38,8 ± 2,5

12,6–101

***

26,8 ± 1,3

19,6–39,7

***

33,4 ± 1,7

21,1–40,3

***

49,4 ± 4,4

21,1–61,5

***

53,1 ± 6,1

25,7–71,6

***

46,0 ± 10,0

12,6–101

18,3 ± 1,2

12,2–26,6

Примечание: достоверность с показателями контрольной группы: * – p < 0,05; ** – p < 0,01; *** – p < 0,001.

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.

Табл. 2. Сравнительная динамика TNF α и IL-6 в разных средах в зависимости от степени ПД

Цито– кины, пкг/ мл

Биосреда

Степень ПД

До операции (интраопер.)

На 3–и сутки по-слеопер.

На 7–е сутки после опер.

Здоровые люди (контроль)

TNF α

Желчь

ПД 1 ст

82,4 ± 3,0 75–94,2

90,1 ± 3,1 85–105

40,6 ± 9,2

22,6–85,1 ^^

–

ПД 2 ст

99,2 ± 6,3

76,1–122

117,9 ± 5,4 95,1–133 ^

79,8 ± 7,6

58,3–120

ПД 3 ст

115,8 ± 9,3

76,5–142

131,7 ± 10,3

89,3–163

101,3 ± 10,8

65,6–148

ПД 4 ст

118,3 ± 9,2

78,1–148

135,6 ± 9,1

90,5–167

106,1 ± 10,8

68,3–151

МЖ и ГХ

118,5 ± 3,8

98,2–136

138,9 ± 8,9 102–195

111,7 ± 4,1

95,5–144

Кровь

ПД 1 ст

78,4 ± 3,2

56,2–96,1

***

95,1 ± 3,1 74,6–121 *** ^^^

88,0 ± 3,9 66,2–115 ***

40,5 ± 1,7

28,6–51,2

ПД 2 ст

87,2 ± 6,5

56,2–121

***

115,8 ± 6,3 69,4–141

*** ^^

101,3 ± 6,2

56,1–125

***

ПД 3 ст

105,6 ± 8,9

59,5–136

***

130,0 ± 9,7 69,7–161

***

124,1 ± 8,0

58,1–143

***

ПД 4 ст

110,7 ± 9,6

61,5–141

***

138,0 ± 10,5

76,1–171

***

129,9 ± 10,6

58,5–156

***

МЖ и ГХ

109,9 ± 8,7

66,2–166

***

130,5 ± 11,1

74,9–193

***

123,0 ± 10,6 72,6–187 ***

IL–6

Желчь

ПД 1 ст

48,3 ± 7,2

17,7–69,1

60,8 ± 8,7

39,6–95,3

24,4 ± 4,2

14,6–41,3 ^

–

ПД 2 ст

57,2 ± 9,4

19,8–89,4

68,8 ± 9,0

41,7–112

33,6 ± 2,2

28,6–46,7 ^

ПД 3 ст

65,1 ± 13,7

23,6–121

80,5 ± 11,8

40,3–135

60,7 ± 11,7

35,4–116

ПД 4 ст

67,5 ± 11,9

23,8–123

83,3 ± 9,8

40,1–135

62,1 ± 8,8

31,6–115

МЖ и ГХ

50,4 ± 11,9

12,1–133

62,1 ± 11,8

14,6–138

57,1 ± 8,5

28,2–124

Кровь

ПД 1 ст

26,8 ± 1,3

19,6–39,7

***

62,2 ± 3,2

43,4–91,6

*** ^^^

57,5 ± 3,8

34,1–86,3

***^^^

18,3 ± 1,2

12,2–26,6

ПД 2 ст

33,4 ± 1,7

21,1–40,3

***

69,8 ± 6,7 41,7–116 ***^^^

60,5 ± 4,8

39,3–96,1

***^^^

ПД 3 ст

49,4 ± 4,4

21,1–61,5

***

81,6 ± 11,3

39,3–131

*** ^

74,3 ± 10,1

39,3–126

***^

ПД 4 ст

53,1 ± 6,1

25,7–71,6

***

83,5 ± 11,9

38,3–135 *** ^

78,8 ± 10,3 35,6–125 *** ^

МЖ и ГХ

46,0 ± 10,0

12,6–101

64,4 ± 9,8

29,9–136

***

55,5 ± 10,9

16,1–131

Примечание: достоверность относительно к исходной: ^ – p₀< 0,05; ^^ – p₀< 0,01; ^^^ – p₀< 0,001.

наблюдалось аналогичная закономерность. При этом следует отметить, что на 7-е сутки при всех степенях ПД и МЖ с ГХ содержание обеих цитокинов в крови было больше, чем в желчи.

Выводы

1. Одновременное повышение содержание цитокинов при механической желтухе в ткани печени, желчи и крови указывает на развитие цитокинового дисбаланса на локальном и системном уровне.
2. Локальная продукция TNF α и IL-6 при механической желтухе взаимосвязана с тяжестью степени печеночной дисфункции и гнойным воспалением желчевыводящих путей.
3. Концентрация TNF α и IL-6 в желчи превышает такого в ткани печени и крови.
4. В послеоперационном периоде выявленные однотипные по направленности изменения уровня TNF α и IL-6 в желчи и крови отражают особенности течения патологического процесса.

Список литературы содержание TNFa и IL-6 в ткани печени, протоковой желчи и сыворотке крови при механической желтухе доброкачественного генеза

Агаев Б.А. Методика дренирования желчных протоков у больных с билиодигестивными анастомозами при механической желтухе и остром холангите/Б.А. Агаев, Р.М. Агаев, Р.И. Гасымов//Хирургия. -2011. -№ 1. -С. 18-22.
Байрамов Н.Ю. Сравнительная характеристика предоперационной магниторезонансной и интраоперационной холангиографии в диагностике поражения общего желчного протока/Н.Ю. Байрамов, А.С. Гюрарас, В.А. Пашазаде//Клiн. xipypriя. -2013. -№ 4. -С. 20-23.
Гаджиев Дж.Н. Профиль цитокинов у больных при остром калькулезном холецистите и коррекция его нарушений/Дж.Н. Гаджиев, Э.Г. Тагиев, А.Г. Гусейналиев и др.//Клiн. xipyprà. -2013. -№ 4. -С. 17-19.
Ермаков Е.А. Диагностика стеноза большого сосочка двенадцатиперстной кишки у больных с холедохолитиазом/Е.А. Ермаков, А.Н. Лищенко//Вестник хирургии. -2007. -№ 4. -С. 80-83.
Ступин В.А. Показатели иммунной системы при механической желтухе доброкачественного генеза/В.А. Ступин, В.В. Лаптев, А.Ю. Цкаев, Н.Е. Гивировская//Анналы хирургической гепатологии. -2008. -Т. 13, № 2. -С. 69 -75.
Treglia-Dal Lago M. Phagocytosis and production of H202 by human peripheral blood mononuclear cells from patients with obstructive jaundice/M. Treglia Dal Lago, J. Jukemura, M.C. Machado//Pancreatology. -2006. -Vol. 6 (4). -P. 273-278

Еще

Статья научная