Содержание васкулоэндотелиального фактора роста в сыворотке крови и желудочном соке у детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки

В детском возрасте ХГ редко бывает изолированным заболеванием. У детей воспалительный процесс затрагивает не только СОЖ, но и СО двенадцатиперстной кишки (ДПК). Чаще всего встречается антральный гастрит в сочетании с дуоденитом [2].

В результате высокой уреазной активнности НР в желудочном соке накапливается аммиак, который приводит к нарушению митохондриального и клеточного дыхания, вызывая местные нарушения микроциркуляции, а при длительном воздействии может вызывать некротическое повреждение СОЖ и ДПК с последующим эрозированием [2, 3].

Наряду с НР существует множество иных факторов, влияющих на развитие, течение и исход воспалительного процесса в СОЖ и ДПК. В настоящее время изучены многие аспекты местных и общих механизмов иммунного ответа при хронической гастродуоденальной патологии, что в сочетании с инфицированием НР играет значительную роль в патогенезе заболевания [3].

Данные изменения происходят с участием большого числа гуморальных факторов, в том числе и противовоспалительных цитокинов: интерлейкина-8 (ИЛ-8), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-1β (ИЛ-1β), γ-интерферона (γИНФ), фактора некроза опухоли-α (ФНОα) [4]. Среди них особое место занимает мультифункциональный цитокин VEGF.

В настоящее время VEGF рассматривают как один из ключевых факторов ангиогенеза, под которым, в свою очередь, понимают процесс образования новых кровеносных сосудов из уже существующей сосудистой системы [5].

VEGF продуцируется различными типами клеток. К их числу относят макрофаги, тромбоциты, лимфоциты, фибробласты, кераноциты, эндотелиальные

клетки (ЭК) и гладкомышечные клетки (ГК). Процесс ангиогенеза включает пролиферацию капиллярных ЭК, их инвазию в сосудистый матрикс с формированием дополнительных капиллярных трубок. Способность ЭК формировать капилляроподобные структуры регулируется внеклеточным матриксом, состоящим из базальных мембран и интерстициальной соединительной ткани [6, 7].

Известно, что микроциркуляторные нарушения лежат в основе патогенетических механизмов при хронических воспалительных заболеваниях ГЗ у детей, результатом чего являются трофические нарушения в СОЖ и СО ДПК и понижение ее резистентности, что также способствует развитию гипоксии в пораженных тканях. Таким образом, хронические воспалительные заболевания ГЗ можно отнести к ангиогенным заболеваниям, при которых выявляется недостаточность микроциркуляторного русла и гипоксия, что приводит к выработке VEGF.

Под действием ангиогенных факторов роста и цитокинов происходит активная пролиферация эндо-телиоцитов, что является патогенезом различных патологических процессов. Результатом пролиферации эндотелиоцитов является ремоделирование сосуда, после чего вновь сформированный сосуд приобретает стабильное состояние. Таким образом, свойства VEGF разнонаправлены. Он принимает участие и в поддержании стабильности эндотелия и физиологическом ангиогенезе, и в процессах неоваскуляризации при различных заболеваниях. Рост новых сосудов детерминирован балансом между его стимуляторами и ингибиторами. VEGF считается одним из основных активаторов ангиогенеза [7].

В доступной нам литературе имеются лишь единичные работы, отражающие изменение содержания VEGF в биологических жидкостях при заболеваниях ЖКТ у детей и связи их с инфицированием НР [8–10]. Следовательно, значительный клинический интерес представляет изучение уровня VEGF в желудочном соке и сыворотке крови при хронических воспалительных заболеваниях ГЗ у детей, возможное выявление связи его концентрации с инфицированием HP.

Цель: определение содержания VEGF в биологических жидкостях (желудочный сок, сыворотка крови) у детей с ХГД, язвенно-эрозивными поражениями ГЗ.

Материал и методы. В исследование были включены 67 пациентов в возрасте от 8 до 16 лет, средний возраст составил 13±0,26, находившихся на стационарном обследовании и лечении в клинике госпитальной педиатрии Клинической больницы им. С. Р. Миро-творцева ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского» Минздрава России в период 2011–2013 гг.

В группе обследованных мальчиков было 47 детей, девочек 20.

Проведение исследования одобрено локальным этическим комитетом. От законных представителей обследованных детей или от пациентов при достижении ими четырнадцатилетнего возраста было получено письменное информированное согласие на обследование.

Алгоритм обследования включал: изучение жалоб, данных анамнеза, методы общеклинического обследования и дополнительное исследование VEGF в сыворотке крови и тощаковой порции желудочного содержимого.

Согласно намеченному плану обследования во всех группах больных оценивались жалобы, данные анамнеза, данные объективного осмотра, а также дополнительно изучалось содержание VEGF в сы- воротке крови и желудочном соке. У 100% больных верификация диагноза проводилась по данным фи-брогастродуоденоскопии (ФГДС) с морфологическим исследованием гастробиоптата и суточной внутри-желудочной рН-метрии. Определение наличия HP проводилось при помощи цитологического исследования биоптата СОЖ и уреазного дыхательного теста; антитела к HP в сыворотке крови определялись методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием реактивов ЗАО «Вектор Бест» (Новосибирск). Кровь для получения сыворотки забирали из кубитальной вены обследуемых в утренние часы (8–9 часов) натощак. Концентрацию VEGF в сыворотке крови и желудочном соке определяли твердофазным иммуноферментным методом с использованием реагентов ЗАО «Вектор Бест» (Новосибирск) на иммуноферментном анализаторе «Stat-Fax 2010» (США). Результаты выражали в пг/л. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы Biostatistica 4.03.

Количественные показатели проверены на нормальность с использованием критерия Шапиро — Уилка. Распределение показателей отличается от нормального, поэтому описание количественных признаков представлено в виде медианы, 25 и 75-го процентилей (С 25 и С 75 ).

Для сравнения количественных признаков использовали критерий Манна — Уитни. Достоверным считали различие более 95% (p<0,05). Для оценки взаимосвязи величин определяли коэффициент ранговой корреляции Спирмена (г). Сила взаимосвязи оценивалась при г=0,1–0,29 как слабая; при г=0,3–0,69 умеренная; при г=0,7–1 сильная.

При обследовании пациентов первых двух групп выявлено 100%-ное инфицирование бактериями HP. В третьей группе в зависимости от подтверждения НР пациенты были разделены следующим образом: 22 ребенка с ХГД, ассоциированным с HP, 25 детей с ХГД, не ассоциированным с НР.

В период обострения заболевания наибольший уровень показателей ВЭФР выявлен в крови у детей с ЯБ ДПК (Ме 670 пг/л, С 25 302 пг/л, С 75 1360 пг/л) и эрозивным гастродуоденитом (Ме 218 пг/л, С₂₅101 пг/л, С 75 439 пг/л), что превысило аналогичные показатели группы условно здоровых детей (Ме 132,2 пг/л, С₂₅78,9 пг/л, С₇₅169,7 пг/л) в 5 раз и в 1,6 раза соответственно (p<0,05, p=0,001 и р=0,015). Сравнение показателей в зависимости от этиологии хронического гастродуоденита выявило большую концентрацию

VEGF в сыворотке крови при НР-ассоциированном гастродуодените (Ме 483 пг/л, С₂₅103 пг/л, С 75 1906 пг/л) по сравнению с группой ХГД, где не было установлено связи заболевания с инфицированием НР (Ме 147 пг/л, С 25 82 пг/л, С 75 247 пг/л) (p=0,03). Достоверных различий в группе с НР-отрицательным ХГД по сравнению с нормальными показателями не выявлено (p=0,15). По этическим соображениям мы не подвергали желудочному зондированию здоровых детей, поэтому сравнение концентрации VEGF в тощаковой порции желудочного содержимого проведено между группой ХГД и ЯБ ДПК. Установлено увеличение содержания VEGF в тощаковой порции желудочного содержимого у больных ЯБ ДП (Ме 750 пг/л, С 25 548 пг/л, С 75 900 пг/л) (р=0,001), эрозивным гастродуоденитом (Ме 327 пг/л, С 25 135 пг/л, С 75 597 пг/л), по сравнению с поверхностными формами заболевания ( p <0,05). В группе ХГД, ассоциированного с НР (Ме 237 пг/л, С 25 22 пг/л, С 75 761 пг/л), уровень VEGF в тощаковой порции желудочного содержимого превышал в 2,4 раза ( p <0,05) аналогичные показатели группы гастрита, не ассоциированного с НР (Ме 98 пг/л, С₂₅7 пг/л, С₇₅338 пг/л). Проведенный корреляционный анализ выявил положительную зависимость между содержанием VEGF в желудочном соке и сыворотке крови у пациентов из группы больных ЯБ ДПК ( r =0,65; p <0,05).

Проведенное исследование показало, что обострение ЯБ ДПК, эрозивного гастродуоденита и ХГД, ассоциированного с НР, сопровождается увеличением концентрации VEGF в биологических жидкостях, что подтверждает роль VEGF в патогенезе развития язвенно-эрозивных поражений ГЗ. Исследование уровня VEGF в сыворотке крови и желудочном соке целесообразно использовать при диагностике степени повреждения СО ГЗ и контроле эффективности проводимой терапии. Определение VEGF в сыворотке крови и желудочном соке может считаться одним из показателей успешной эрадикации НР и также достаточно простым инвазивным и легко переносимым методом дополнительной диагностики НР у детей. Повышенный уровень VEGF у пациента с НР-ассоциированным гастритом можно считать допол- нительным показанием к проведению эрадикационной терапии.

Заключение . В представленной работе получено подтверждение существенной роли VEGF в патогенезе хронических воспалительных заболеваний ГЗ. Вместе с тем лишь дальнейшее продолжение данного исследования с включением большего числа детей с хроническими воспалительными заболеваниями ГЗ позволит уточнить полученные результаты.