Состояние эритроидного звена системы крови при экспериментальном гипотиреозе

Актуальность темы обусловлена недостаточной изученностью изменений в эритроидном звене и эритроцитах периферической крови при гипотиреозе. Общеизвестно, что при гипотиреозе снижается энергетический обмен, участником которого является кислород, доставляемый эритроцитами. С этих позиций нарушения в эритроидном звене системы крови могут усугублять клинические проявления гипотиреоза [1]. Вместе с тем на сегодняшний день сведений о состоянии эритроидного звена в литературе крайне мало[4,5]. Становится очевидной необходимость исследований в этой области, которая расширит базу знаний о патогенезе гипотиреоза, что дает возможность совершенствовать способы лечения этой патологии.

Методика. Исследования проводили в условиях вивария Иркутской государственной сельскохозяйственной академии и Центральной научно-исследовательской лаборатории Иркутского государственного медицинского университета на беспородных белых крысах массой 180-200 г в осенне-зимний период. В эксперименте использовано 24 крысы. Шесть из них оставались интактными. Остальным животным моделировали гипотиреоз введением перорально (с кормом) мерказолила в дозе 10 мг/кг ежедневно в течение 8 недель. Выведение жи- вотных из эксперимента проводили методом декапитации. В периферической крови с помощью камеры Горяева подсчитывали число эритроцитов и определяли их осмотическую резистентность (ОРЭ) по методу А.А.Яновского [2]. Мазки крови и красного костного мозга (ККМ) окрашивали по Паппенгейму [2]. В мазках крови дифференцировали и подсчитывали %-ное количество микроцитов (размер <7 мкм), нормоцитов (7-8 мкм) и макроцитов (> 8 мкм), с последующим пересчетом на абсолютное количество в литре крови. В мазках костного мозга подсчитывали миелограмму (на 1000 клеток). Вычисляли индексы пролиферации (ИП) и созревания (ИС) клеток эритропоэза по формулам [3];

ИП=[(ПроЭр*0+БН*+1+ПН*2)/(ПроЭр+БН+ ПН)]*Е

ИС=[(ПН*0+ОН*1+Эр*2)/(ПН+ОН+ЭР)]* I, где

ПроЭр - количество проэритробластов, БН -количество базофильных нормобластов, ПН -количество полихроматофильных нормобластов, ОН - количество оксифильных нормобластов, Эр - количество зрелых эритроцитов в костном мозге, I сумма всех клеток эритроидного ряда.

Материал для исследования брали на 2 сутки, 7 сутки и 28 сутки после отмены мерказолила.

Полученные данные обрабатывали методом вариационной статистики с определением типа распределения вариационных рядов, среднего арифметического, ошибки среднего, среднего квадратического отклонения. Достоверность различий средних величин определяли по t – критерию Стьюдента при р<0,05.

Результаты . При гипотиреозе на 2 сутки после отмены мерказолила осмотическая резистентность (ОРЭ) снижается более чем в 2 раза (р<0,05; рис.1А). Параллельно в красной пульпе (КП) селезенки увеличивается в 3,5 раза (в сравнении с интактными животными р<0,05; рис.1В) количество гемосидерина, что указывает на дестабилизацию мембран эритроцитов, потерю ее пластичности и ускоренную гибель клеток. При этом селезенка не увеличивается, сохраняя исходную массу.

Несмотря на повышенную гибель эритроцитов в селезенке, количество этих клеток в периферической крови при гипотиреозе увеличивалось преимущественно за счет возрастания числа макроцитов (рис.1Б). Эти данные косвенно указывают на стимуляцию эритропоэза, возможно, продуктами распада эритроцитов.

При исследовании мазков красного костного мозга (ККМ) оказалось, что на 2 сутки после отмены мерказолила процентное содержание клеток эритроидного ряда увеличилось в 1,4 раза по сравнению с интактными животными и составило 58,2% общего числа клеток костного мозга (р<0,05; рис.2). При этом существенно увеличилось депо зрелых эритроцитов (у интактных животных – 419,67±41,8 из 1000 клеток гемопоэза, при гипотиреозе – 582,50±21,44), а количество проэритробластов, полихроматофильных и оксифильных нормобластов снизилось в 1,4; 1,9 и 3 раза соответственно (p<0,05) в сравнении с интактными животными. При вычислении индексных показателей выяснилось, что пролиферация бластных форм осталась на уровне нормы, а созревание эритроцитов ускорялось в 1,4 раза (p<0,05; рис.3). В совокупности эти данные – ускорение созревания эритроцитов, уменьшение количества не только оксифильных, но и полихроматофильных нормобластов на фоне увеличения числа зрелых эритроцитов, а также выявленная тенденция развития макроцитоза в периферической крови – дают основание говорить о стимуляции эритропоэза, в том числе за счет гетеробластического пути.

Таким образом, через 2 суток после отмены мерказолила экспериментальный гипотиреоз приводит к дестабилизации и потере пластичности мембран эритроцитов, ускоряет разрушение этих клеток, но стимулирует процесс созревания эритроцитов в ККМ (в том числе по гетеробластическому пути), полностью восполняя их количество в периферической крови.

Через 7 суток после отмены мерказолила в периферической крови регистрируется эритроцитоз (p<0,05), который характеризуется увеличением количества нормоцитов (рис.1Б), хотя ОРЭ остается на прежнем низком уровне (рис.1А). При этом масса красной пульпы селезенки увеличилась в 1,24 раза, а масса гемосидерина, наоборот, уменьшилась в 1,6 раза (в сравнении с предыдущим сроком p<0,05; рис.1В). В красном костном мозге доля клеток эритроидного ряда уменьшилась в 1,7 раза (до 34,6% от общего числа клеток, рис. 2) в основном за счет существенного уменьшения депо зрелых эритроцитов (на 34%), что сопровождалось снижением в 1,6 раза (до нормального значения) скорости их созревания при сохранении в диапазоне нормы скорости пролиферации (рис. 3). Это сопровождалось нормализацией количества всех форм нормобластов. Сопоставление этих данных дает основание считать, что к 7 суткам после отмены мерказолила разрушение эритроцитов в селезенке уменьшается, эритропоэз в костном мозге нормализуется, а освобождение зрелых эритроцитов из костномозгового депо обусловливает эритроцитоз в периферической крови.

К 28 суткам после отмены мерказолила ОРЭ остается низкой (рис.1А), в крови сохраняется эритроцитоз, но при этом количество нормоцитов существенно уменьшается, количество макроцитов нормализуется, а количество микроцитов нарастает (рис.1Б). В селезенке масса красной пульпы оставалась увеличенной, а масса гемосидерина вновь возрастала и превышала уровень у интактных животных в 3,9 раза (р<0,05; рис.1В). Эти данные свидетельствуют о возобновлении усиленного разрушения эритроцитов. В составе ККМ численность клеток эритроидного ряда снижалась еще больше (до 18,2% от общего числа клеток костного мозга, рис. 2) за счет торможения пролиферации и дифференцировки бластных форм (ИП и ИС снижались в 1,8 раза, рис. 3). Результатом этого является опустошение депо зрелых эритроцитов, которое уменьшилось в 1,9 раза по сравнению с интактными животными (р<0,05; рис. 2).

Учитывая эти данные, нельзя расценивать как относительную нормализацию состояние эритроидного звена через 7 суток наблюдения. Вероятно, зарегистрированная относительная нормализация изучаемых показателей в данном

Л.Н. Карелина, Б.Я. Власов, О.П. Ильина. Влияние малоновой кислоты на качество мяса и активность сукцинатдегидрогеназы у цыплят-бройлеров при темновом стрессе случае отражает постепенное уменьшение компенсаторных и резервных возможностей красного костного мозга под влиянием гипотиреоза.

Вывод : Суммируя представленные данные, можно сделать заключение о существенном нарушении состояния эритроидного звена под влиянием экспериментального гипотиреоза, вызванного мерказолилом. Эти нарушения выражаются в долговременном снижении ОРЭ, дестабилизации мембран эритроцитов и ускорении их гибели, что вызывает компенсаторную активацию эритропоэза с подключением гетеробластического пути. Эта реакция проявляется мак-роцитозом в периферической крови и способна обеспечить восполнение числа эритроцитов и даже эритроцитоз, но вскоре (через 7 суток) компенсаторные резервы костного мозга снижаются, а затем (к 28 суткам) истощаются, что отражается в нарастании микроэритроцитоза в периферической крови.

А

Рис.2. Количественное соотношение клеток эритроидного ряда в красном костном мозге у животных с экспериментальным гипотиреозом.

Рис.3. Индексы пролиферации (ИП) и созревания (ИС) клеток эритроидного звена у животных с экспериментальным гипотиреозом (усл.ед).

—-—

Б

инт    Г-2с   Г-7с. Г-28с.

£@ -""»^ ГП ил^к^ 1

Рис. 1. Изменение осмотической резистентности

(А), количества микро-, нормо- и макроэритроцитов

(Б) в периферической крови (*1012/л) и красной пульпы селезенки (в граммах (В) у животных с экспериментальным гипотиреозом).