Современные методы молекулярно-цитогенетического анализа в диагностике онкологических заболеваний

Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск1

Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, г. Москва2 ГОУ ВПО «Новосибирский государственный университет»3

Ни у кого не вызывает сомнения тот факт, что исследование молекулярно-биологических причин возникновения рака было и остается актуальной проблемой. Целый ряд фундаментальных фактов свидетельствует о ключевой роли повреждений молекул ДНК в развитии опухолевого процесса. Известны многочисленные примеры хромосомных перестроек, которые либо обусловливают предрасположенность к развитию онкологических заболеваний, либо могут являться прямой причиной злокачественной трансформации. При проведении достаточного объема исследований присутствие типичных хромосомных перестроек было показано для большого числа неоплазий человека. Были выявлены новые гены, изменение экспрессии которых в ряде случаев приводит к малигнизации клеток. В это же время стала очевидной клиническая значимость данных хромосомного анализа. Выявление типичных хромосомных перестроек при некоторых заболеваниях оказывается принципиальным при постановке окончательного диагноза, выборе стратегии лечения и контроля эффективности проводимой терапии.

Выявление хромосомной реорганизации в гемопоэтических клетках пациента является серьезным аргументом в пользу постановки диагноза «неоплазия». К сожалению, использование классических методов хромосомного анализа, базирующихся на дифференциальном окрашивании хромосомных районов, оказалось малоэффективно в целом ряде случаев. За пределами их возможностей оказались идентификация материала малых хромосом, DM хромосом, hsr (гомогенноокрашенные районы), небольшие дупликации, делеции, инсерции, несбалансированные транслокации. Сравнение результатов хромосомного анализа, проведенного с помощью стандартного набора методов дифференциальной окраски хромосом, и спектрального кариотипирования (Spectral Karyotyping – SKY) указывает на необходимость широкого внедрения в практику диагностики хромосомных патологий новых методов молекулярно-цитогенетических исследований. При классическом цитологическом анализе было выявлено и правильно идентифицировано лишь около 30 % хромосомных перестроек, выявляемых при использовании SKY. Еще около трети перестроек было идентифицировано неверно, а треть осталась совсем незамеченной. Еще хуже дело обстояло с солидными опухолями. Классические методы анализа позволили выявить не более 15 % хромосомных перестроек, идентифицированных с помощью SKY (Schroeck et al., 2000).

В настоящей работе рассмотрены современные методы молекулярной цитогенетической диагностики хромосомных аномалий, возможности их применения и перспективы дальнейшего развития (Рубцов и др., 2000, 2001).