Способы размножения и биопродуктивность маклеи кьюской (Macleaya x kevensis Turill) в Западном Предкавказье

ВведениеIntroduction

В настоящее время важная медико-социальная проблема современного здравоохранения связана с лечением бактериальных заболеваний. Бактериальные заболевания – это большая группа патологий, возбудите- лями которых являются патогенные и условно-патогенные микроорганизмы. По последним данным ВОЗ три пункта в Списке 10 ведущих причин смертности в мире занимают бактериальные инфекции и болезни ими опосредованные. Основными средствами лечения инфекционных заболеваний на сегодняшний день являются антибиотики. Их широкое применение приводит к усугублению проблемы резистентности бактерий к ним [1]. В связи с этим большое внимание уделяется поиску лекарственных растений, действующие вещества которых обладают антибактериальной активностью. К таким растениям относится маклея кьюская (Macleаya х kevensis Turill), семейство маковых (Papaveraceae). Маклея кьюская представляет собой гибрид между маклеями мелкоплодной и сердцевидной. Впервые она была описана W.B. Turill в 1958 году по культивируемым образцам, происходящими из Китая, и высаженными в Королевском Ботаническом саду города Кью (Великобритания) [2].

Основными действующим веществами растения являются алкалоиды сангвинарин и хелеритрин (бисульфаты), являющиеся основой высокоэффективного препарата «Сангвиритрин». В официальной медицине данный препарат применяется в качестве антимикробного средства в комплексной терапии острых и гнойно-воспалительных заболеваний,вызванных патогенными грибами, кожных заболеваниях, стоматитах, кандидозных кольпитах [3, 4].

В последние годы продолжаются исследования по более широкому использованию сангвиритрина. Разработана технология получения коллагеновой губки с сангвиритрином (Сангвикол) при лечении инфицированных и ожоговых ран [5]. Отсутствие раздражающего эффекта на кожу и слизистые оболочки лекарственной формы сангвиритрина позволяют использовать его в качестве антисептической добавки при производстве косметических кремов, шампуней и зубных паст [6].

Основываясь на антимикробной активности маклеи, в мировой практике в животноводстве с успехом используются кормовые добавки на основе травы растения (Сангровит EXTRA и Сангровит WS), которые являются заменой антибиотических стимуляторов роста [7]. Тем более, что, начиная с 2006 года, в Евросоюзе введен запрет на применение в животноводстве кормовых антибиотиков. В России также разработан антимикробный нанокомплекс алкалоидов маклеи с растительными фосфолипидами, применение которого обеспечивает высокую сохранность поголовья цыплят - бройлеров, увеличение живой массы при снижении затрат корма на единицу ее прироста, положительно влияет на основные зоотехнические и биохимические показатели птицы и не приводит к развитию дисбактериоза [8].

Начались исследования по разработке технологии использования шрота после выделения сангвиритрина для производства модификатора ржавчины, что позволит полностью исключить операции по подготовке поверхностей под лакокрасочные покрытия [9].

Обеспечить получение алкалоидов из сырья маклеи за счет дикорастущих растений не представляется возможным, так как ареал естественного произрастания данной культуры находится далеко за пределами Российской Федерации, в Южном Китае [10]. Это обстоятельство явилось предпосылкой поиска наиболее благоприятных регионов для возделывания маклеи, к которому относится Западное Предкавказье.

Одним из ключевых вопросов при выращивании любой лекарственной культуры является выбор способа ее размножения. При размножении лекарственных растений выделяют два основных способа размножения: семенное и вегетативное (отрезки корневищ, деление куста, рассада). Правильный выбор размножения той или иной культурыдол-жен соответствовать биологическим особенностям самого растения и климатическимусловиями региона ее выращивания, от этого зависит получение высококачественного лекарственного сырья [11].

О способах размножения маклеи кьюской в литературе имеются лишь единичные публикации, в которых указывается, что размножаться этот вид маклеи может изолированными почками, образующимися на боковых корнях, или боковыми вегетативными побегами [12]. Однако эти исследования были проведены в условиях вегетационного опыта, что не дает возможности в полной мере оценить эти способы размножения.

Одним из важных факторов адаптивного земледелия является сбалансированное применение минеральных удобрений. В практике лекарственного растениеводства внесение минеральных удобрений (NPK) проводится ранней весной под предпосевную культивацию, в течение вегетации – в качестве некорневых подкормок. Это способствует усилению роста и развития растений, увеличению урожайности и повышению устойчивости к нестабильным погодным условиям [13, 14].

Цель наших исследований заключалась в решении проблемы размножения маклеи кьюскойдля создания промышленных плантаций культуры в условиях Западного Предкавказья и разработки сбалансированного применения минеральных удобрений.

МетодыMethods

Исследования по изучению способов размножения мак-леи кьюской и применения минеральных удобрений проводились в Северо-Кавказском филиале ВИЛАР в 2019-2021 годах.

Почва филиала – чернозем, выщелоченный малогумусный сверхмощный, отличается большой мощностью гумусового горизонта (А + В до 160 см) и сравнительно низким (3,7 %) содержанием гумуса в верхнем горизонте почвы. По результатам агрохимического обследования установлено, что содержание подвижного фосфора составляет 27 мг/кг, обменного калия – 243 мг/кг, подвижной серы – 6,2 мг/кг, присутствует незначительное количество подвижных форм марганца, цинка, меди и кобальта. Верхний слой почвы имеет близкую к нейтральной реакцию почвенной среды, рН KC l=5,9.

Полевые опыты закладывали путем постановки мелкоде-ляночных опытов, которые проводились по методикам: «Проведение полевых опытов с лекарственными культурами», «Требования к оформлению полевых опытов во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР)».

Расположении делянок рендомизированное, повторность опытов 4-х кратная, площадь опытных делянок: в опытах по разработке способов размножения 12 м2, при изучении удобрений – 60 м2, ширина междурядий – 60 см.

Размножение маклеи проводили отрезками корневищ. Посадку осуществляли: весенняя – в конце третьей декады марта – первой декаде апреля, осенняя – первая – вторая декады ноября. Посадка корневых отпрысков (побеги из почек возобновления) – третья декада апреля - первая декада мая.

Некорневые подкормки минеральными удобрениями (N 45 , NP 45 , NPK 45 ) проводили в фазу активного роста растений: на первом году вегетации – вторая декада июня, на втором и последующих годах вегетации – двукратно: в первую декаду мая, а повторная - на этапе второго укоса, после отрастания растений. Контрольные растения обрабатывали водой.

Уборку урожая сырья (травы) осуществляли в фазу бутонизации – начала цветения: на I-м г. в. - в третьей декаде августа, на II – м г. в. и последующих годах – первая уборка во второй декаде июня, вторая – в третьей декаде сентября.

Высоту растений измеряли на 20 растениях с каждой делянки.

Содержание действующих веществ (сумма бисульфатов сангвинарина и хелеритрина) определяли по методу ФС 422666-89 в пересчете на абсолютно сухое сырье и должно быть не менее 0,6 %.

Под культивацию перед посадкой вносили удобрение NPK 45 .

Статистическая обработка экспериментальных данных выполнена методом дисперсионного анализа по Б.А. Доспехову (1985) с использованием программного обеспечения Word Excell [16].

Результаты и обсужденияResults and discussions

Маклея кьюская – многолетнее травянистое растений с мощным прямостоячим стеблем, крупными черешковыми листьями сердцевидной формы. Верхняя сторона листовой пластинки голая, нижняя опушенная. Растение может достигать высоты до 2-х и более метров. Корневая система маклеи представлена разветвленными боковыми корнями, растущими горизонтально, распространяясь в пахотном горизонте на 50-60 см (рис. 1).

Начиная со второго года вегетации, на боковых корнях образуются придаточные почки, из которых развиваются корневые отпрыски.

Основываясь на особенностях корневой системы мак-леи, ее размножение проводились двумя способами: отрезками корневищ длиной 10-15 см с тремя и более почками и корневыми отпрысками (рис. 2).

Проведенные исследования показали, что более перспективным является способ размножения отрезками корневищ. Из данных таблицы 1 видно, что при размножении отрезками корневищ высота растений превышала посадку корневыми отпрысками на 8 %, урожайность травы – на 23 %. В содержании алкалоидов различий не установлено.

Рис.1. Маклея кьюская (Macleаya х kevensis Turill). Слева – корневая система, справа – общий вид растения

Рис.2.Посадочный материал маклеи кьюской (Macleаya х kevensis Turill).

Слева – отрезки корневищ с почками, справа – корневые отпрыски

Таблица 1. Влияние способов размножения Macleаya х kevensis Turill на урожайность и содержание действующих веществ на I году вегетации

Table 1. Effect of propagation methods of Macleaya x kevensis Turill on yield and content of active substances in the I year of vegetation

Способы размножения	Высота растений, см	Урожайность, т/га	Содержание алкалоидов (лист), %	Содержание алкалоидов (трава), %
Отрезки корневищ	128,2±6,23	1,12	4,12±0,198	1,06±0,056
Корневые отпрыски	119,5±6,01	0,91	4,09±0,208	1,04±0,049
НСР 05		0,103

Таблица 2. Фенологический спектр Macleаya х kevensis Turill первого – второго годов вегетации при размножении отрезками корневищ

Table 2. Phenological spectrum of Macleau x kevensis Turill plants of the first and second year of vegetation when propagated by rhizome segments

Сроки посадки	Фазы развития маклеи
	Отрастание	Стеблевание	Бутонизация	Цветение
I год вегетации
Весенняя	III декада апреля	III декада мая	II декада июня	I декада июля
Осенняя	I декада апреля	I декада мая	I-декада июня	III декада июня
II год вегетации
Весенняя	I декада апреля	III декада апреля	II-III декады мая	I декада июля
Осенняя	I декада апреля	III декада апреля	II-III декады мая	I декада июля

Из литературных данных известно, что ряд лекарственных культур, в частности диоскорея ниппонская ( Dioscorea nipponica ) и кавказская ( Dioscorea caucasica ), размножаются корневищами и их посадка может осуществляться в весенний и осенний периоды [15].

Основываясь на этих положениях, были заложены опыты по разным срокам посадок маклеи. Наблюдениями за фенологическим спектром растений было установлено, что при осеннем сроке посадки на первом году вегетации маклеи наблюдалось более раннее прохождением фенологических фаз, чем при весеннем. На втором году вегетации сроки прохождения фенофаз при обоих сроках посадки идентичны (табл. 2).

Дальнейшие наблюдения за ростом растений показали, что при осеннем сроке посадки, за счет более раннего нача- ла вегетации растений, их высота на момент уборки урожая сырья на I году вегетации превышала весенний на 11%, урожайность – на 18%, сбор алкалоидов с га на 21% (табл.3).

Из приведенных данных видно, что наиболее рациональным сроком посадки маклеи кьюской является осенняя посадка.

Для повышения урожайности маклеи, увеличения действующих веществ и их сбор с гектара изучались некорневые подкормки минеральными удобрениями разного состава – N 45 , NP 45 и NPK 45 . Обработки проводились, начиная с первого года вегетации культуры.

Проведенные учеты высоты растений показали, что наибольшее усиление роста растений наблюдалось на варианте NPK45, где высота растений превышала контроль на 10 % (табл.4).

Таблица 3. Влияние сроков посадки отрезков корневищ на урожайность и содержание действующих веществ в сырье Macleaya x kevensis Turill на I году вегетации

Table 3. Effect of planting dates of rhizome segments on yield and content of active substances in the raw material Macleaya x kevensis Turill in the first year of vegetation

Сроки посадки корневищ	Высота растений на момент уборки урожая, см	Урожайность, т/га	Содержание алкалоидов (трава), %	Сбор алкалоидов, кг/га
Осенняя посадка	129,3±6,46	1,86	1,02±0,053	18,92
Весенняя посадка	115,4± 5,66	1,57	1,00±0,048	15,7
НСР 05		0,097

Таблица 4. Влияние некорневых подкормок минеральными удобрениями на рост Macleaya x kevensis Turill I-III годов вегетации (осенняя посадка) Table 4. Effect of foliar fertilizing with mineral fertilizers on growth of Macleaya x kevensis Turill I-III years of vegetation (autumn planting)

Вариант опыта	Высота растений на момент уборки
	I год вегетации (на момент уборки урожая)		II год вегетации (на момент первой уборки урожая)		III год вегетации (на момент первой уборки урожая)
	см	% к контролю	см	% к контролю	см	% к контролю
Контроль	127,3±6,12	100	271,3±12,98	100	275,3±13,68	100
N 45	136,7±6,57	107	287,6±14,41	106	294,3±14,88	107
NP 45	137,6±6,68	108	289,4±14,52	107	297,1±14,92	108
NPK 45	140,4±6,89	110	295,7±14,71	109	302,8±15,01	110

Таблица 5. Влияние некорневых подкормок минеральными удобрениями на урожайность и содержание действующих веществ в сырье Macleaya x kevensis Turill I-III годов вегетации (осенняя посадка)

Table 5. Effect of foliar fertilizing with mineral fertilizers on yield and content of active substances in raw material of Macleaya x kevensis Turill I-III years of vegetation (autumn planting)

Вариант опыта	Урожайность						Содержан алкалоидов (трава), %
	I укос		II укос		Сумма двух укосов
	т/га	% к контролю	т/га	% к контролю	т/га	% к контролю
I год вегетации (один укос в августе)
Контроль	1,04	100			1,04	100	1,08
N 45	1,22	117			1,22	117	1,12
NP 45	1,25	120			1,25	120	1,12
NPK 45	1,30	125			1,30	125	1,14
НСР 05	0,102				0,102
II год вегетации
Контроль	6,94	100	1,68	100	8,62	100	1,02
N 45	8,23	119	1,95	116	10,18	118	1,07
NP 45	8,40	121	2,00	119	10,40	121	1,07
NPK 45	8, 88	128	2,10	125	10,98	127	1,08
НСР 05	0,929		0,205
III год вегетации
Контроль	6,16	100	1,54	100	7,70	100	0,98
N 45	7,17	116	1,76	114	8,93	116	1,06
NP 45	7,33	119	1,82	118	9,15	119	1,05
NPK 45	7,82	127	1,94	126	9,76	127	1,07
НСР 05	0,978		0,195

Рис.3. Особенности влияния некорневых подкормок удобрениями на сбор алкалоидов с гектара

Fig.3.Peculiarities oftheinfluence offoliarfertilizers on the collection ofalkaloids perhectare

Необходимо отметить, что в варианте NPK 45 наблюдалась и наибольшая облиственность растений, что сказалось на урожайности культуры.

Проведенные учеты урожая травы маклеи на I-III годах вегетации показали,что повышение урожайности по сравнению с контролем на варианте NPK 45 составило 25-27%, увеличение содержания алкалоидов 6-9% , в то время как на вариантах с N 45 и NP 45 данные показатели не превышали 16-21% и 4-7% , соответственно (табл.5).

Повышение урожайности сырья и содержания действующих веществ на вариантах с применением NPK 45 способствовали и наибольшему сбору бисульфатов с гектара, как по сравнению с контролем (2538%), так и другими опытными вариантами (8-13 %) (рис. 3).

ЗаключениеConclusion

Изучение особенностей строения корневой системы маклеи кьюской дали возможность проводить ее размножение двумя способами: корневыми отпрысками и отрезками корневищ.

Наиболее перспективный способ размножения культуры – посадка отрезками корневищ длиной 10-15 см, как минимум с тремя почками. Установлено, что при осеннем сроке посадки отрезками корневищ наблюдается более раннее, чем при весеннем, прохождение фенологических фаз, высота растений превышала весенний на 11%, урожайность – на 18%, сбор алкалоидов с га на 21%.

Повышение урожайности сырья маклеи I-III годов вегетации (25-27%) и увеличение сбора алкалоидов с гектара (30-38%) обеспечивает проведение внекорневой подкормки NPK 45 .

Об авторах:

Николай Иванович Сидельников – академик

Российской академии наук, доктор сельскохозяйственных наук

About theauthors:

Olga A. Bykova – Cand. Sci. (Agriculture), Researcher, Correspondence Author, , Nikolay I. Sidelnikov – Full Member of the Russian Academy of Sciences, Dr. Sci. (Agriculture)

Ramazan N. Thaganov – Senior Researcher,

Vitaly R. Thaganov – Senior Researcher,

• • Литература

  • 1.    Якимова Ю.Н. Клинико-фармакологический анализ рынка антибиотиков для системного применения и перспективы его развития. Волгоград, 2016. 23 с.

  • 2.    Абизов Е.А. Ботанико-фармакогностическое изучение представителей рода маклея ( Macleaya R. Br). Москва, 2004. 24 с.

  • 3.    Вичканова С.А., Колхир В.К., Сокольская Т.А., Воскобойникова И.В., Быков В.А. Лекарственные средства их растений. М.: АДРИС, 2009. 432 с.

  • 4.    Абизов Е.А., Толкачёв О.Н. Сангвиритрин. Обзорная информация. Медицинская помощь. М.: Медицина. 2003;(4):41-46.

  • 5.    Барсуков А.А., Абоянц Р.К., Истранов Л.П., Истранова Е.В., Чернова С.В. Сангвикол – новая лекарственная форма сангвиритрина. Фармация. 2002;51(4):27-29.

  • 6.    Кожевникова О.В. Комплексная разработка маклеи с целью получения продуктов, рекомендуемых к применению в косметических средствах. Краснодар, 2006. 25 с.

  • 7.    САНГРОВИТ: Растительная кормовая добавка. М. Фитобиотикс, 2021 [ http://sangrovit.ru/pdf/Sangrovit%20WS_Poultry_RULY22.pdf , http://san-grovit.ru/pdf/Sangrovit_Extra_Folder_RUS_LY13.pdf ]; процитировано 21 февраля 2022. Доступно: http://sangrovit.ru/

  • 8.    Фисинин В.И., Егоров И.А., Андрианова Е.Н., Друзь Е.А., Фельдман Н.Б., Луценко С.В., Луценко Е.В. Эффективность антимикробного нанокомплекса на основе алкалоидов из маклейи сердцевидной при выращивании цыплят-бройлеров. Сельскохозяйственная биология. 2009;44(4):26-30.

  • 9.    Кожевникова О.В., Тарасов В.Е. Комплексное использование маклейи мелкоплодной – перспективного растительного сырья. Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. Краснодар. 2006;1(290):11-13.

  • 10.    Вичканова С.А., Фатеева Т.В., Крутикова Н.М., Крепкова Л.В., Бортникова В.В., Толкачев О.Н., Климахин Г.И., Сокольская Т.А. Сангвиритрин. Москва: Onebook. 2015;(162):11.

  • 11.    Аникина А.Ю., Басалаева И.В., Бушковская Л.М., Быкова О.А., Грязнов М.Ю, Загуменников В.Б., Климахин Г.И., Ковалев Н.И., Конон Н.Т., Коротких И.Н., Морозов А.Н., Никифорова О.И., Пушкина Г.П., Ромашкина С.И., Савченко О.М., Семенихин И.Д., Тоцкая С.А., Тропина Н.С., Тхаганов Р.Р., Хазиева Ф.М., Цицилин А.Н. Лекарственные и эфиромасличные культуры: особенности возделывания на территории Российской Федерации. М.: ВИЛАР. 2021. 256 с.

  • 12.    Абизов Е.А., Толкачев О.Н., Климахин Г.И., Копылова И.Е., Луферов А.Н., Барабанов Е.И., Цицилин А.Н. Культивирование маклеи кьюской ( Macleаya х kevensis Turill) в условиях Московской области. Сборник научных трудов Международной конференции «Генетические ресурсы лекарственных и ароматических растений» М.: ВИЛАР. 2004. С.184-188. 13. Кшникаткина А.Н., Гущина В.А., Кшникаткин С.А. Семенная продуктивность расторопши пятнистой в зависимости от сроков, способов посева и удобрений. Тезисы докладов VI Международного симпозиума «Новые нетрадиционные растений и перспективы их использования». М.: 2005;(3):144-145.

• 14.    Загуменников В.Б. Оптимизация культивирования лекарственных растений в Нечерноземной зоне РФ. М.: ВИЛАР. 2006. 76 с.

• 15.    Полуденный Л.В., Сотник В.Ф., Хлапцев Е.Е. Эфиромасличные и лекарственные растения. М.: Колос. 1979. 282 с.

• 16.    Доспехов В.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). М.: Агропромиздат. 1985. 351 с.

• • References

  • 1.    Yakimova Yu.N. Clinical and pharmacological analysis of the market for antibiotics for systemic use and prospects for its development. Volgograd, 2016. 23 p. (In Russ.)

  • 2.    Abizov E.A. Botanical and pharmacognostic study of representatives of the genus Macleaya R. Br]. Moscow, 2004. 24 p. (In Russ.)

  • 3.    Vichkanova S.A., Kolkhir V.K., Sokolskaya T.A., Voskoboynikova I.V., Bykov V.A. Medicines of Their Plants. Moscow: ADRIS, 2009. 432 p. (In Russ.)

  • 4.    Abizov E.A., Tolkachev O.N. Sanguirythrin. Overview information. Medicinskaya pomoshh`. Moscow: Medicine. 2003;(4):41-46. (In Russ.)

  • 5.    Barsukov A.A., Aboyants R.K., Istranov L.P., Istranova E.V., Chernova S.V. Sangvikol is a new dosage form of sangviritrin. Farmaciya. 2002;51(4):27-29. (In Russ.)

  • 6.    Kozhevnikova O.V. Integrated development of Maclea in order to obtain products recommended for use in cosmetics. Krasnodar, 2006. 25 p. (In Russ.)

  • 7.    SANGROVIT: Natural feed additive. М. Рhytobiotics,2021, [ http://san-grovit.ru/pdf/Sangrovit%20WS_Poultry_RULY22.pdf , http://sangrovit.ru/pdf/Sangrovit_Extra_Folder_RUS_LY13.pdf ]; quoted on February 21, 2022. Available: http://sangrovit.ru/ .

  • 8.    Fisinin V.I., Egorov I.A., Andrianova E.N., Druz` E.A., Fel`dman N.B., Lucenko S.V., Lucenko E.V. Efficiency of an antimicrobial nanocomplex based on alkaloids from Macleia cordate in growing broiler chickens. Sel`skoxozyajstvennaya biologiya. 2009;44(4):26-30. (In Russ.)

  • 9.    Kozhevnikova O.V., Tarasov V.E. Integrated use of small-fruited Macleia – a promising plant material]. Izvestiya vy`sshix uchebny`x zavedenij. Pishhevaya texnologiya. Krasnodar: 2006;1(290):11-13. (In Russ.)

  • 10.    Vichkanova S.A., Fateeva T.V., Krutikova N.M., Krepkova L.V., Bortnikova V.V., Tolkachev O.N., Klimaxin G.I., Sokol`skaya T.A. Sanguiritrin. Moscow: Onebook, 2015(162):11. (In Russ.)

  • 11.    Anikina A.Yu., Basalaeva I.V., Bushkovskaya L.M., By`kova O.A., Gryaznov M.Yu, Zagumennikov V.B., Klimaxin G.I., Kovalev N.I., Konon N.T., Korotkix I.N., Morozov A.N., Nikiforova O.I., Pushkina G.P., Romashkina S.I., Savchenko O.M., Semenixin I.D., Toczkaya S.A., Tropina N.S., Txaganov R.R., Xazieva F.M.,Cicilin A.N. Medicinal and essential oil crops: features of cultivation on the territory of the Russian Federation. Moscow: VILAR, 2021. 256 p. (In Russ.)

  • 12.    Abizov E.A., Tolkachev O.N., Klimaxin G.I., Kopy`lova I.E., Luferov A.N., Barabanov E.I., Cicilin A.N. Cultivation of Macleaya x kevensis Turill in the conditions of the Moscow region. Sbornik nauchny`x trudov Mezhdunarodnoj konferencii «Geneticheskie resursy` lekarstvenny`x i aromaticheskix rastenij» Moscow: VILAR, 2004. P.184-188. (In Russ.)

  • 13.    Kshnikatkina A.N., Gushchina V.A., Kshnikatkin S.A. Seed productivity of milk thistle depending on the timing, sowing methods and fertilizers. Tezisy` dokladov VI Mezhdunarodnogo simpoziuma «Novy`e netradicionny`e rastenij i perspektivy` ix ispol`zovaniya». Moscow: 2005;(3):144-145. (In Russ.)

  • 14.    Zagumennikov V.B. Optimization of the cultivation of medicinal plants in the Nonchernozem zone of the Russian Federation. Moscow: VILAR, 2006. 76 p. (In Russ.)

  • 15.    Poludenny`j L.V., Sotnik V.F., Xlapcev E.E. Essential oil and medicinal plants. Moscow: Kolos. 1979. 282 p. (In Russ.)

  • 16.    Dospexov V.A. Field experience methodology (with the basics of statistical processing of research results). Moscow: Agropromizdat, 1985. 351 p. (In Russ.)