Сравнительная характеристика микробиоты черноземов в заповедных и антропогенно преобразованных сообществах
Автор: Проценко Е.П., Караулова Л.Н., Проценко А.А., Чаплыгина О.В., Медянцев П.Л., Сошнин П.Г.
Журнал: Известия Самарского научного центра Российской академии наук @izvestiya-ssc
Рубрика: Землепользование
Статья в выпуске: 1-5 т.13, 2011 года.
Бесплатный доступ
Дана сравнительная характеристика состава микробных сообществ верхнего слоя черноземов типичных абсолютно заповедной степи Центрально-Черноземного заповедника им. В.В. Алехина и черноземов, которые находятся в сельскохозяйственном использовании, то есть испытывают антропогенную нагрузку различного уровня. Показано, что суммарное количество бактерий, определенное методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии, было примерно одинаковым в почвах вариантов с сельскохозяйственным использованием и в 2 раза ниже в черноземе заповедной степи.
Микробные сообщества, химические маркеры, почвенные бактерии, ассоциативная азотфиксация, черноземы типичные
Короткий адрес: https://sciup.org/148199833
IDR: 148199833
Текст научной статьи Сравнительная характеристика микробиоты черноземов в заповедных и антропогенно преобразованных сообществах
Исследования проводились на территории Центрально-Черноземного заповедника им. В.В. Алехина на участке абсолютно заповедной степи и прилегающих полях сельскохозяйственного назначения. Режим абсолютного заповедования предполагает отсутствие вмешательства человека в развитие экосистемы степи и поддерживается на протяжении 60 лет. Объектами исследования явились образцы чернозема типичного, отобранные в июле 2010 г. на 3 участках: абсолютного заповедования в Стрелецкой степи; на участке с бессменным возделыванием озимой пше-ницы–N40P40K40 ежегодно; на поле с зернопаропропашным севооборотом, представленным чередованием следующих культур: чёрный пар– P80K80, озимая пшеница–N40, сахарная свекла – N180P160K80, ячмень –N40P40K40. Средняя проба почвы отбиралась на площадках площадью 1 м2 в верхнем слое (0-20 см).
Методика. Состав микробного сообщества определяли молекулярным методом газовой хроматографии–масс-спектрометрии (ГС-МС). Анализ проводили на ГХ-МС системе HP-5973 Agilent Technologies (США). Метод позволяет по химическим компонентам жирно-кислотного состава мембранных структур-маркеров и математическому соотнесению их с имеющимся банком
Чаплыгина Ольга Вячеславовна, аспирантка
Медянцев Павел Львович, кандидат биологических наук, старший преподаватель
Сошнин Павел Геннадьевич, аспирант данных по этому показателю определять состав и структуру сообщества микроорганизмов. Метод позволяет анализировать сообщества микроскопических грибов и бактерий, в том числе акти-номицетов [6].
Результаты и обсуждение. Суммарное количество бактерий было примерно равно в почвах вариантов с сельскохозяйственным использованием и в 2 раза ниже в черноземе заповедной степи (рис.1, табл. 1). Ранее при анализе количества микроорганизмов в почвах природных зон России (средне - и южнотаежной, лесостепной, степной и сухостепной) было показано, что в целинных почвах этот показатель в 4-5 раз выше по сравнению с пашней, за исключением сухостепной зоны (темно-каштановые и каштановые почвы, поливное земледелие). В этих почвах сельскохозяйственного использования численность микроорганизмов была в 2 и более раз выше целинных участков [1]. Это свидетельствует о том, что используемая система земледелия на изучаемом типичном чернозёме не ведет к подавлению развития микробоценоза почвы.
Анализ состава сообщества микроорганизмов типичного чернозема заповедной степи при разных системах выращивания культур показал (табл. 1), что он достаточно разнообразен (43-45 видов, относящихся к 37 родам). Сравнение вариантов опыта по показателю индекса Шеннона не выявил существенных различий между почвами – он равнялся 4,6-4,7. Однако по количеству отдельных видов в сообществе почвы существенно отличались. Так, для почвы заповедной степи характерно более высокое содержание только 4 штаммов – 3 вида бактерий Acetobacter sp., Arthrobacter sp., Mycobacterium sp. и актино-мицета Streptomyces sp. (табл. 1). Суммарное количество данных видов внутри сообщества составляет 10-14%.

■ Заповедная степь
Зернопаропропашно
С/
□ Бессменная пшеница
Рис. 1. Количество бактерий, определенное методом газовой хроматографии – масс-спектрометрии, в черноземной почве под сельскохозяйственным использованием и в черноземе типичном заповедной степи
Таблица 1. Состав сообщества микроорганизмов чернозема типичного заповедной степи и агро-педоценозов
Микроорганизмы, кл/г х106 |
Заповедная степ ь |
Зерн опа-ро-пропаш-ной с/о |
Бессменная пшеница |
Acetobacter sp. |
0,72 |
1,02 |
0,98 |
Agrobacterium radiobacter |
0,34 |
0,00 |
0,17 |
Methylococcus sp. |
0,19 |
0,22 |
0,21 |
Pseudomonas fluorescens |
0,14 |
1,54 |
0,96 |
P.putida |
0,17 |
0,93 |
0,52 |
P. vesicularis |
0,21 |
0,58 |
0,29 |
Riemirella sp. |
0,08 |
0,25 |
0,16 |
Sphingobacterium spiritovorum |
0,05 |
0,23 |
0,20 |
Sphingomonas adgesiva |
0,12 |
0,27 |
0,26 |
Sphingomonas capsulata |
0,08 |
0,38 |
0,33 |
Xanthomonas sp. |
0,12 |
0,57 |
0,35 |
FeRed |
0,42 |
1,26 |
0,42 |
Aeromonas hydrophila |
0,09 |
2,27 |
1,00 |
Ochrobactrum sp. |
0,06 |
0,13 |
0,18 |
Bacteroides hypermegas |
0,01 |
0,21 |
0,01 |
Bacteroides ruminicola |
0,08 |
0,14 |
0,09 |
WARB* |
0,16 |
0,37 |
0,31 |
Desulfovibrio sp. |
0,06 |
0,00 |
0,20 |
Chlamydia sp. |
0,02 |
0,00 |
0,00 |
Cytophaga sp. |
0,03 |
0,29 |
0,18 |
Arthrobacter sp. |
0,97 |
1,74 |
1,30 |
Caulobacter sp. |
0,22 |
0,00 |
0,20 |
Bacillus subtilis |
0,00 |
0,04 |
0,15 |
Актиномицеты, кл/г х 106 |
|||
Rhodococcus equi |
0,41 |
0,72 |
0,47 |
Rhodococcus terrae |
0,58 |
0,27 |
0,37 |
Pseudonocardia sp. |
0,16 |
0,27 |
0 |
Bacillus sp. |
0,14 |
0,54 |
0,38 |
Clostridium pasteurianum |
0,19 |
0,22 |
0,21 |
C.perfringens |
0,02 |
0,03 |
0,01 |
Acetobacterium sp. |
0,04 |
1,19 |
0,26 |
Butyrivibrio 1-2-13 |
0,05 |
0,21 |
0,00 |
Butyrivibrio 1-4-11 |
0,00 |
0,01 |
0,01 |
Продолжение таблицы 1 |
|||
Butyrivibrio 7S-14-3 |
0,36 |
1,51 |
0,49 |
Bifidobacterium sp |
0,02 |
0,17 |
0,06 |
Corynebacterium sp. |
0,22 |
0,30 |
0,27 |
Eubacterium sp. |
0,00 |
0,00 |
0,01 |
Eubacterium lentum |
0,07 |
0,13 |
0,08 |
P. freudenreichii |
0,13 |
0,00 |
0,26 |
Propionibacterium sp. |
0,65 |
0,53 |
0,57 |
Mycobacterium sp. |
1,15 |
1,19 |
2,31 |
Rhodococcus equi |
0,41 |
0,72 |
0,47 |
Rhodococcus terrae |
0,58 |
0,27 |
0,37 |
Ruminococcus sp. +** |
0,15 |
0,00 |
0,08 |
Pseudonocardia sp. |
0,16 |
0,27 |
0,00 |
Streptomyces sp |
1,06 |
1,03 |
1,36 |
Nocardia carnea |
0,06 |
0,08 |
0,15 |
Nocardiopsis sp. |
0,12 |
0,05 |
0,05 |
Actinomadura roseola |
0,10 |
0,26 |
0,27 |
Сумма |
10 |
21 |
16 |
Представители рода Aсetobacter (7,2% в сообществе) – уксуснокислые бактерии – играют существенную роль в трофических (пищевых) взаимоотношениях в микробном сообществе, способны к азотфиксации и продуцированию фитогормонов, в частности, индолилуксусной кислоты. Arthrobacter sp. (9,7% в сообществе) – автохтонный вид, способный к ассоциативной азотфиксации, а также к использованию собственного органического вещества почв. Кроме того, Arthrobacter globiformis и Mycobacterium sp. (11,5%) обладают антифунгальной активностью [10] Artrobacter globiformis способен стимулировать рост растений, продуцируя ростовых веществ – ауксинов и гиберрелин подобных соединений [9]. Представители рода Streptomyces sp. (10,6% в сообществе) относятся к активным гид-ролитикам сложных полимеров и способны к окислению многих органических веществ до состояния полной минерализации. Кроме того, Streptomyces sp. способен к азотфиксации, а также к продуцированию ряда антибиотиков, в том числе, и инсектицидов. Показано, что все исследованные штаммы Streptomyces sp. способны к выработке железопереносящих соединений – сидерофоров [7]. Благодаря данным веществам стрептомицет выступает как фактор, регулирующий состав ценоза, подавляя развитие одних видов и обеспечивая условия для размножения других.
По сравнению с почвами, находящимися под сельскохозяйственным использованием, черноземы заповедной степи отличаются повышенным содержание бактерии Agrobacterium radiobacter и актинобактерий Rhodococcus terrae и Nocardiopsis sp. (рис. 2). Все остальные отмеченные виды представлены в меньшем количестве, что не обеспечивает повышения общей численности бактерий в черноземе заповедной степи.
Агробактерии составляют в сообществе 3,4% от общего числа видов. В качестве источника углерода эти бактерии используют различные углеводы, соли органических кислот и аминокислот. Актинобактерия Rhodococcus terrae
(содержание в сообществе 5,8%) и актиномицет Nocardiopsis sp. (1,2%), напротив, обладают обширным комплексом гидролитических ферментов, который позволяет им использовать полимерные углеводы, поставляя исходные органические субстраты для метаболизма агробактерий. К положительным свойствам агробактерий относится их способность к мобилизации фосфора [7]. По-видимому, именно этот консорциум микроорганизмов составляет основное трофическое ядро в черноземе типичном заповедной степи. В сравнении с составом микробного сообщества чернозема, находящегося в сельскохозяйственном использовании, почва заповедной степи содержит в 2 раза больше (в сравнении с вариантом бессменной пшеницы) олиготрофной бактерии Caulobacter sp. (2,2% в сообществе). В почве варианта с зернопаропропашным севооборотом этот вид не выявлен в концентрации выше 104 (чувствительность метода). Этот вид бактерий играет в почве агрегатообразующую роль, а в трофическом отношении входит в микробном сообществе в структурную группу олиготрофов [4, 7].

Рис. 2. Сравнение количества микроорганизмов в типичном черноземе заповедной степи и такой же почвы, находящейся в длительном сельскохозяйственном использовании
Сравнение микробного сообщества почв на вариантах с разной системой сельскохозяйственного использования показало (табл. 1, рис. 1), что эти почвы мало отличаются между собой по общей численности микроорганизмов, однако, в составе микробоценоза есть отличия. Так, по содержанию факультативных и облигатных анаэробов почвы зернопаропропашного севооборота наиболее богаты, в сравнении с почвами под бессменной пшеницей и заповедной степью (табл. 2). Из «полезных» анаэробных видов можно отметить Clostridium pasteurianum. Его содержание в почве зернопаропропашного севооборота в два раза выше, чем в почве под бессменной пшеницей и в 4 раза выше, чем в черноземе заповедной степи.
К «полезным» видам для почвенного плодородия можно отнести Bifidobacterium sp благодаря его способности к выделению ряда ферментов, аминокислот и регуляторов роста растений. Его количество также выше в черноземе, используемом в зернопаропропашном севообороте в два раза. По количеству актиномицетов исследуемые черноземы не отличались (табл. 2). Повышенным содержанием Nocardiopsis отличались только черноземы заповедной степи, что было обсуждено выше (рис. 2).
Таблица 2. Численность анаэробных и факультативно-анаэробных видов в почве чернозема типичного заповедной степи и агропедоценозов,%
Микроорганизмы |
Заповедная степь |
Зерно-паропр опаш-ной с/о |
Бессме нная пшеница |
FeRed |
0,9 |
10,8 |
6,3 |
Aeromonas hydrophila |
4,2 |
6,0 |
2,6 |
Bacteroides hypermegas |
0,1 |
1,0 |
0,1 |
Bacteroides ruminicola |
0,8 |
0,7 |
0,6 |
WARB* |
1,6 |
1,8 |
1,9 |
Desulfovibrio sp. |
0,6 |
0,0 |
1,3 |
Bacillus subtilis |
0,0 |
0,0 |
0,1 |
Bacillus sp. |
3,6 |
7,2 |
3,1 |
Clostridium pasteurianum |
0,2 |
0,8 |
0,4 |
C.perfringens |
0,0 |
0,0 |
0,1 |
Acetobacterium sp. |
0,7 |
0,6 |
0,5 |
Butyrivibrio 1-2-13 |
1,3 |
0,0 |
1,6 |
Butyrivibrio 1-4-11 |
6,5 |
2,5 |
3,6 |
Butyrivibrio 7S-14-3 |
0,0 |
0,0 |
0,1 |
Bifidobacterium sp. |
3,6 |
7,2 |
3,1 |
Eubacterium sp. |
0,0 |
0,0 |
0,1 |
Eubacterium lentum |
0,7 |
0,6 |
0,5 |
P. freudenreichii |
1,3 |
0,0 |
1,6 |
Propionibacterium sp. |
6,5 |
2,5 |
3,6 |
Сумма |
33 |
44 |
31 |
Выводы:
-
1. Суммарное количество бактерий было примерно равно в почвах вариантов с сельскохозяйственным использованием и в 2 раза ниже в черноземе заповедной степи.
-
2. По сравнению с почвами, находящимися под сельскохозяйственным использованием, черноземы заповедной степи отличаются повышенным содержание бактерии Agrobacterium radio-bacter и актинобактерий Rhodococcus terrae и Nocardiopsis sp.
-
3. По индексу биоразнообразия существенных различий между почвами заповедной степи и находящимися под сельскохозяйственным использованием не выявлено – он равнялся 4,6-4,7.
-
4. По содержанию факультативных и облигатных анаэробов почвы зернопаропропашного севооборота наиболее богаты, в сравнении с почвами под бессменной пшеницей и заповедной степью.
Список литературы Сравнительная характеристика микробиоты черноземов в заповедных и антропогенно преобразованных сообществах
- Верховцева, Н.В. Микробные консорциумы почв агроценозов разных природных зон России с учетом их сельскохозяйственного использования/Н.В. Верховцева, Г.Е. Ларина, Ю.Я. Спиридонов и др.//Проблемы агрохимии и экологии. 2008. № 2. C. 37-43.
- Верховцева, Н.В. Метод газовой хроматографии-масс-спектрометрии в изучении микробных сообществ почв агроценоза/Н.В. Верховцева, Г.А. Осипов//Проблемы агрохимии и экологии. 2008. №2. С. 51-54.
- Вильдфлуш, И.Р. Ресурсосберегающие приемы повышения эффективности удобрений при возделывании сельскохозяйственных культур/И.Р. Вильдфлуш, Т.Ф. Персикова, А.Р. Цыганов//Проблемы агрохимии и экологии. 2008. №2. С. 7-12.
- Микробные сообщества и их функционирование в почве/Сб. науч. тр. Киев: Наук. думка, 1981. 280 с.
- Определитель бактерий Берджи. Т.1. 1997. 430 с.
- Осипов, Г.А. Способ определения родового (видового) состава ассоциации микроорганизмов//Патент РФ № 2086642.С12 N 1/00, 1/20, C12Q 1/4. Приоритет от 24 дек.1993.
- Современная микробиология. Прокариоты. Т. 1, 2 [под ред. Й. Ленгелера, Г. Древса, Г. Шлегеля].-М.: Мир. 2005. 654 с., 493 с.
- Katsnelson, H. Auxin Production by Species of Arthrobacter/H. Katsnelson, J.C. Sirois//Nature. 1965. Vol. 191. P. 1323-1324.
- Katsnelson, H. Production of a gibberellin-like substance by Arthrobacter globiformis/H. Katsnelson, J.C. Sirois, E.C. Shirley//Nature. 1962. Vol. 196. P. 1012-1013.
- Kerr, J.R. Bacterial inhibition of fungal growth and patogenicity//Microbial Ecology in Health and Disease. 1999. Vol. 11. P. 129-142.