Сравнительная характеристика соматических мутаций в гене KRAS у больных колоректальным раком юга России

Активирующие мутации в гене KRAS являются одними из важнейших генетических изменений в механизмах патогенеза КРР и частота их проявления составляет от 30 до 50% для разных популяций. Данные исследования необходимы для повышения эффективности применения таргетных препаратов.

Цель данного исследования. Цель данного исследования исследовать закономерности проявления частот активирующих мутаций в гене KRAS в зависимости от возрастных и гендерных особенностей пациентов Юга России.

Материалы и методы. В исследовании принимали участие 660 пациентов Юга России (304 мужчины и 356 женщины) с верифицированным диагнозом аденокарцинома толстой или прямой кишки. Материалом для исследования служили архивные парафиновые блоки, из которых проводили экстракцию ДНК стандартным фенол-хлороформным методом. Исследовали следующие миссенс-мутации в 12 и 13 кодонах 2 экзона гена KRAS: G12C, G12S, G12R, G12V, G12D, G12A и G13D с использованием набора реагентов «Real-Time-PCR-KRAS-7M» (Биолинк, Россия), детекцию сигналов осуществляли на термоциклере Bio-Rad CFX96 (Bio-Rad, США). Статистический анализ выполняли с использованием прикладных пакетов программ Microsoft Excel 2013 и STATISTICA 8.0. Оценку различий проводили с использованием непараметрического χ 2-критерия, для уровня статистической значимости р<0,05.

Результаты. При исследовании статуса гена KRAS в объединенной группе мужчин и женщин с КРР доля транзиций составила 72% (n=192) и достоверно (p=0,00001) в 2,5 раза превысила долю трансверсий (n=75; 28%). При сравнении транзиций/трансверсий у пациентов с мутациями в гене KRAS в возрасте до 60 (n=128) и старше 60 (n=139) лет обнаружено, что доля транзиций в группе до 60 лет составляет 60,2%, в группе после 60 лет – 82,8%; а трансверсий – 39,8% и 17,2% соответственно. У пациентов до 60 лет число транзиций превышает число трансверсий в 1,5 раза; а старше 60 лет этот показатель возрастает до 4,8 раз. Из 145 мужчин в возрасте моложе 60 лет на долю транзиций пришлось 80,5% (37 пациентов), что в 4 раза превысило число трансверсий (19,5%; 9 пациентов). У 159 мужчин старше 60 лет мутантный тип KRAS обнаружен в 40,2% (64 пациента). В данной возрастной группе отношение между транзициями и трансверсиями составило 2,8 раза. У женщин в возрасте до 60 лет (n=200) мутантный тип гена KRAS выявлен у 41% (82 пациента). По сравнению с аналогичной возрастной группой пациентов-мужчин. Так, на транзиции пришлось только 48,7% (40 пациентов), что в 1,7 раз меньше, чем у мужчин, а на трансверсии 51,3% (42 пациента), что в 2,6 раза больше, чем у мужчин. В группе из 156 женщин старше 60 лет мутации в гене KRAS были найдены в 48% (75 человек). Из них на транзиции пришлось 90,6% (68 пациентов) всех мутаций, а на трансверсии практически в 10 раз меньше (достоверно при р=0,00001) – 9,4% (7 пациентов). При сравнении с пациентами-мужчинами из возрастной группы старше 60 лет отмечено, что число транзиций у женщин в 1,2 раза больше, а трансверсий в 2,4 раза меньше. Также, при сравнении спектра мутаций KRAS у женщин в разных возрастных группах показано, что транзиции в возрасте старше 60 лет встречаются достоверно чаще (р=0,00001), чем у женщин младше 60, а трансверсии, в свою очередь, достоверно реже (р=0,0408). Выводы. Полученные данные позволяют утверждать о значительном преобладании транзиций над трансверсиями в гене KRAS в общей популяции пациентов Юга России. Сравнительный анализ частот транзиций/трансверсий у женщин позволяет говорить о статистически достоверных различиях между группами моложе и старше 60 лет. Практически равное соотношение транзиций и трансверсий у женщин до 60 лет значительно сдвигается в пользу транзиций в возрасте после 60 лет (десятикратное преобладание транзиций над трансверсиями). До недавнего времени, высокую частоту проявлений транзи-ций в гене KRAS при КРР связывали с особенностями питания • № 4, Special Edition 1 – 2016 г. (21) • MALIGNANT TUMOURS 159

XX РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС • ТЕЗИСЫ

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ И АСПЕКТЫ ОРГАНИЗАЦИИ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ

пациентов, например, употреблением копченого мяса, при кулинарной обработке которого образуются нитрозосодержащие соединения, индуцирующие образование транзиций. Однако, полученные нами результаты могут свидетельствовать о важной роли изменения гормонального статуса (угнетение биосинтеза эстрогенов в постменопаузальном периоде) в проявлении тех или иных типов мутаций в гене KRAS