Сравнительное изучение профилактического действия различных доз камедь смолы ферулы асафетида и легалона на желчевыделительную функцию печени при остром парацетамоловом гепатите

Актуальность. Нестероидные противовоспалительные средства довольно часто применяются в практической медицине, поскольку им присуще не только противовоспалительное но и жаропонижающее, болеутоляющее действия. Среди них парацетамол применяется довольно широко. Он обладает, как известно гепатотоксическим действием [2,6]. В связи с этим в целях профилактики повреждения печени применяются гепатопротекторы [1,5]. Изложенное обстоятельство побудили проведение экспериментальных исследований по сравнительному изучению профилактического действия камедь смолы ферулы асафетида(КСФА) в сравнительном аспекте с Легалоном при остром парацетамоловом гепатите на желчевыделительную функцию печени.

Цель исследования.

Сравнительное изучение КСФА и Легалона при профилактическом введении на желчевыделительную функцию печени при остром лекарственном гепатите.

Материалы и методы исследования. Все экспериментальные исследования проводилась на половозрелых лабораторных животных с исходной массой 180-210 г. Перед началом эксперимента все лабораторные животные были тщательно осмотрены, взвешены, учтены их возраст, пол, а также двигательная активность. Весь период подготовки к эксперименту, во время его проведения, лабораторные животные находились в виварий при температуре 20-25°С, влажности не менее 50%, в хорошо проветриваемом помещении и световом режиме день/ночь, в стандартных пластмассовых клетках по 6 особей в каждой, при стандартном рационе питания, суточный потребность составлена в соответствии с возрастом животных. Все лабораторные животные участвующие в эксперименте до начало опыта имели, здоровый вид и были активны. После завершения 14дневного карантина, все животные были случайным образом разделены следующие на группы:

1-я группа - контрольная. Крысам до воспроизведения острого лекарственного гепатита (парацетамол per os в дозе 1500 мг/кг 1 раз в день в течение 2 дней) внутрижелудочно вводили дистиллированную воду в течение 2 дней.

2-я и 3-я группы - опытные. Крысам с острым гепатитом внутрижелудочно вводили КСФА в дозах 50-100 мг/кг один раз в день в течение 2 дней до парацетамола.

4-й группы крысам с острым гепатитом внутрижелудочно вводили Легалон (препарат сравнения) один раз в день в течение 2 дней и за 1 час до введения парацетамола в дозе 100 мг/кг.

5-я группа - интактная. У крыс этой группы не проводили никаких манипуляций.

Введение исследуемых веществ животным проводили по схеме "профилактика + парацетамол". На 3-й день исследования животным всех групп (кроме интактных) через один час после введения препаратов индуцировали острый лекарственный гепатит. Для индукции острого лекарственного гепатита(ОЛГ) использовали ацетаминофен (парацетамол) в дозе 1500 мг/кг, однократно в течение 2 дней. Спустя 24 ч после заключительного введения препаратов исследовали желчевыделительную функцию печени путем вставления полиэтиленового катетера в общий желчный проток наркотизированных животных (внутрибрюшинном введением этаминал-натрия в дозе 50 мг/кг).

О холеретической активности препарата судили по общему количеству выделенной желчи за 4 часа опыта, а также по концентрации и количеству её компонентов, то есть билирубина, холестерина и желчных кислот. В часовых порциях определяли концентрацию (мг%) и общее количество (мг на 100 г массы тела) желчных кислот, холестерина и билирубина [4,7,8].

Все эксперименты проводили с соблюдением требований Европейской конвенции «О защите позвоночных животных используемых для экспериментальных или иных научных целей » (Страсбург 1986 г.).

Полученные результаты исследования статистически обрабатывали с помощью пакета программного обеспечения Biostat 2009. Данные представлены в виде среднего значения (М) и стандартной ошибки среднего значения (m). За статически достоверное изменение принимали различие при уровне вероятности 95% и более (р < 0,05).

Результаты исследования. Результаты проведенных экспериментальных исследований показали, что введение парацетамола (два дня по 1500 мл/кг) внутрь приводит к существенному нарушению функционального состоянию печени, которая проявляется в снижении экскреторной функции печени и химического состава желчи. Так, по сравнению со здоровыми животными, у животных получавших парацетамол, в желчи, выделенной за четыре часа эксперимента, в пересчете на 100гр массы животных снижалась более чем в 4,5 раза (на 78,1%), которое сопровождалась уменьшением содержания в желчи желчных кислот на 69,3%, холестерина -64,7% и билирубина -63,2%.

Видно, что парацетамол при энтеральном введении приводит к развитию существенных изменений в гепатоцитах, которые приводят к значительным изменениям функционального состояния печени выражающего в снижении экскреторной функции органа и химического состава желчи.

Полученные результаты прямо указывают о наличии гепатотоксичности парацетамола, которое в основном связано с истощением в организме половозрелых млекопитающих запасов глютатиона и накоплением промежуточных продуктов метаболизма обладающих гепатотоксическим действием, а именно, образовании из парацетамола в системе ферментов монооксигеназ (цитохрома Р450) N-ацетил-р-бензохинонимина) [2,3].

В отличие от этого, в группе животных предварительно получавших камедь смолы ферулы асафетида отмечается отчетливая сохранность внешнесекреторной функции печени и химического состава желчи.

Из данных таблицы 1 видно, что у животных получавших превентивно КСФА в дозе 50 мг/кг желчевыделение увеличивалось на 162,5% по сравнению с контролем, а в дозе 100 мг/кг- на 140,6%. Однако они не достигали уровня здоровых крыс. Аналогичные характерные результаты получены нами в группе животных предварительно получавших Легалон. Следовательно, если под влиянием парацетамола желчевыделительная функция печени существенно угнетается, то под влиянием КСФА и Легалона она отчетливо сохраняется.

Примечательно, что по своей фармакологической эффективности КСФА, особенно в дозе 50 мг/кг, превосходит эффект известного эталонного гепатопротектора Легалона. Превентивное введение КСФА и Легалона у животных с острым парацетамоловым гепатитом оказывает отчетливое положительное влияние и на исследуемые компоненты желчи. Так, суммарное содержание желчных кислот в желчи, в группе животных получавших КСФА в дозе 50 мг/кг, была большей на 123,5% по сравнению с контролем, а в дозе 100 мг/кг – на 117,9%. В данной группе животных содержание холестерина и билирубина также превышает уровень контроля соответственно на 95,7% и 113,9%.

Увеличение дозы препарата в два раза, как видно из данных таблицы 1, не приводило к нарастанию отмеченного эффекта, то есть количество холестерина и билирубина в желчи за четыре часа опыта была большей на 81,0% и 96,2% соответственно.

Следует отметить, что эффективной дозой КСФА в профилактике нарушений желчеобразовательной функции печени при остром парацетамоловом гепатите является 50 мг/кг. Препарат в этой дозе отчетливо превосходит эффект Легалона, под влиянием которого уровень желчных кислот холестерина и билирубина повышалась на 102,2% , 73,3% , 78,7% соответственно по сравнению с контролем.

Таблица 1

Сравнительное изучение профилактического действия различных доз КСФА и Легалона на желчевыделительную функцию печени при остром парацетамоловом гепатите (за 4 часа опыта в пересчете на 100 гр массы тела крыс)

Группы	Желчь, мл	Желчные кислоты, мг	Холестерин, мг	Билирубин, мкг
Интактный	1,46±0,10	7,45±0,49	0,329±0,025	122,52±6,42
H 2 O +ОЛГ (контроль)	0,32±0,05	2,29±0,22	0,116±0,014	45,05±6,45
Р	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001
КСФА 50 мг/кг + ОЛГ	0,84±0,13	5,12±0,59	0,227±0,023	96,35±6,61
Р	<0,02	<0,05	<0,05	<0,05
Р 1	<0,02	<0,01	<0,01	<0,01
КСФА 100 мг/кг +ОЛГ	0,77±0,13	4,99±0,42	0,210±0,022	88,39±5,84
Р	<0,01	<0,02	<0,02	<0,02
Р 1	<0,05	<0,01	<0,02	<0,01
Легалон 100 + ОЛГ	0,76±0,07	4,63±0,33	0,201±0,023	80,49±7,04
Р	<0,01	<0,01	<0,02	<0,01
Р 1	<0,01	<0,002	<0,05	<0,02

Примечание: Р- достоверность данных относительно животным интактных групп, Р 1 -достоверность данных леченных животных по отношению к контрольных групп.

Таким образом, результаты проведенных фармакологических и биохимических исследований позволяют заключить, что КСФА, подобно Легалону, предотвращает повреждения печени при воздействии парацетамола.

Такой положительный эффект исследуемых препаратов вероятно обусловлен тем, что они обладают антиоксидантным действием так как парацетамол инициирует перекисное окисление липидов (ПОЛ) активируя выработку свободных радикалов которые разрушают мембраны клеток печени [3].

Вывод. 1. У крыс с острым лекарственным гепатитом индуцированного парацетамолом отмечается значительные нарушения экскреторной функции печени и химического состава желчи.

• 2.    Гепатопротектор Легалон при профилактическом введении отчетливо предотвращает нарушения функционального состояния печени при

• 3.    КСФА при остром лекарственном гепатите оказывает отчетливое

остром парацетамоловом гепатите, проявляющемся в снижении желчевыделительной функции органа.

гепатопротекторное свойство и по своей фармакологической активности он не уступает Легалону.