Связь экспрессии матриксных металлопротеиназ с морфологической гетерогенностью, дифференцировкой опухоли и лимфогенным метастазированием плоскоклеточной карциномы гортани

Матриксные металлопротеиназы (ММП) представляют собой семейство кальцийзависимых цинксодержащих эндопротеаз. Субстратами для металлопротеиназ являются коллагены разных типов, эластины, желатин, гликопротеины межклеточного матрикса и протеогликаны [1, 11]. Матриксные металлопротеиназы играют ключевую роль в протеолитической деградации внеклеточного матрикса, в межклеточном и клеточно-стромальном взаимодействии. Эти функции определяют значение ММП в инвазивном росте и метастазировании злокачественных опухолей [5].

В соответствии с рекомендациями ВОЗ (2005) плоскоклеточный рак гортани делят на высоко-, умеренно- и низкодифференцированные опухоли. Высокодифференцированный рак цитологически напоминает нормальный эпителий. Опухоли с умеренной дифференцировкой отличаются отчетливым ядерным полиморфизмом и менее выраженной кератинизацией. При низкой степени дифференцировки преобладают незрелые атипичные клетки, много нормальных и атипических митозов. Считается, что степень кератинизации, как и уровень дифференцировки опухоли, не имеет существенного прогностического значения. В противоположность этому полагают, что большее значение для прогноза имеет оценка инвазивного фронта опухоли [3]. Поскольку инвазивность плоскоклеточной карциномы связана с уровнем дифференцировки опухоли, степенью ее гетерогенности и активностью металлопротеиназ, секретируемых опухолевыми элементами, представляет интерес изучение характера взаимосвязи этих параметров и их значения в лимфогенной диссеминации плоскоклеточных карцином.

Материал и методы

В исследование были включены 58 больных (57 мужчин и 1 женщина) с раком гортани стадии Т1–3N0–3M0–1, в возрасте от 31 до 77 лет, которым до операции не проводилась дополнительная противоопухолевая терапия. Во всех случаях осущест- влялась ларингэктомия с фасциально-футлярным иссечением клетчатки шеи. В послеоперационном периоде больным назначалась лучевая терапия на гамма-аппарате «Рокус» в стандартном режиме (5 раз в нед, разовая очаговая доза 2,0 Гр) до СОД 40,0 Гр.

Материалом для морфологического исследования послужили образцы опухолевой ткани. Все опухоли имели гистологическое строение плоскоклеточного рака разной степени дифференцировки. Иммуногистохимическое исследование экспрессии ММП-1, -2, -9, ТИМП-1, -2 и EMMPRIN было проведено с использованием антител фирмы «Но-вокастра» ММП-2 (NCL–MMP2–507, для парафиновых блоков, высокотемпературная демаскировка антигена в 1 мМ ЭДТА рН=8,0, рабочее разведение 1:40 – 1:80); ММП-9 (NCL–ММР9, для парафиновых блоков, рабочее разведение 1:40); ТИМП-1 (NCL–ТIМР1-485, для замороженной ткани и парафиновых блоков, рабочее разведение 1:200); ТИМП-2 (NCL–ТIМР2–487, для парафиновых блоков, высокотемпературная демаскировка антигена в 1 мМ ЭДТА, рН=8,0, рабочее разведение 1:20); EMMPRIN (СD 147) (NCL–СD147, для парафиновых блоков, высокотемпературная демаскировка антигена в 0,01 М цитратном буфере рН=6,0, рабочее разведение 1:20 – 1:40). Инкубацию с первыми антителами проводили 60 мин, при температуре 25 °С. Использовали полимерную систему визуализации фирмы «BioGenex», в качестве хромогена – диаминобензидин, препараты докрашивали гематоксилином. Экспрессия маркеров определялась полуколичественным способом, оценивалась как слабая, средняя (умеренная) и выраженная и представлена в баллах. Статистическая обработка проводилась с помощью пакета программ Statis-tica 6.0. Использовали дисперсионный анализ и критерий χ2.

Результаты

Для оценки гетерогенности в плоскоклеточных карциномах гортани в зависимости от морфоло-

Таблица 1

Степень дифференцировки опухолевых структур в зависимости от локализации опухоли у больных с плоскоклеточным раком гортани

Локализация опухоли Степень дифференцировки опухолевых структур Высокая Низкая Высокая и низкая Надскладочное пространство 1 5/32 (15 %) 10/32 (32 %) р2=0,068 17/32 (53 %) р2=0,14 Голосовые складки 2 4/22 (18 %) 3/22 (14 %) 15/22 (68 %) гического строения учитывалось наличие разных структур: структуры с ороговением (1-й тип); с клетками базалоидного и шиповатого типа без ороговения (2-й тип); с клетками базалоидного типа (3-й тип); структуры с выраженным клеточным полиморфизмом (4-й тип) и одиночные опухолевые клетки (5-й тип). Структуры 1-го и 2-го типа являлись высокодифференцированными, в то время как структуры 3, 4 и 5-го типов рассматривались как низкодифференцированные. Причем уменьшение степени дифференцировки нарастало от 3-й к 5-й структуре. В каждой опухоли возможно сочетание структур разной степени дифференцировки. В зависимости от сочетающихся структур плоскоклеточные карциномы гортани разделены нами на три типа. Опухоли со структурами 1-го и/или 2-го типов являлись высокодифференцированными, с сочетанием структур 3-го и/или 4-го, и/или 5-го типов – низкодифференцированными, с 1, и/или 2, и 3 и/или, 4 и/или 5-м – высоко- и низкодифференцированными смешанного типа дифференцировки. Изучаемые параметры оценивались отдельно в опухолях, локализовавшихся в надскладочной области и на голосовых складках. Независимо от локализации опухоли чаще встречались случаи с сочетанием структур низкой и высокой дифференцировки. На уровне тенденций в надскладочном пространстве чаще, чем в области голосовых связок, обнаруживались опухоли с низкой степенью дифференцировки и несколько реже – случаи с наличием высоко- и низкодифференцированных структур (табл. 1).

Таблица 2

Особенности экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов в разных структурах опухоли при раке гортани

Тип структуры		MMП-1	ТИMП-1	MMП-2	ТИMП-2	MMП-9	CD 147
Поверхностный эпителий	1	1,6 ± 0,5 (n=10)	2,4 ± 1,1 (n=11)	1,0 ± 0,0 (n=9)	1,1 ± 0,3 (n=11)	1,3 ± 0,4 (n=11)	1,7 ± 0,7 (n=9)
1-й тип	2	1,4 ± 0,5 (n=42)	2,5 ± 0,9 (n=41)	1,2 ± 0,3 (n=42)	1,0 ± 0,1 (n=42)	1,3 ± 0,6 (n=42)	1,9 ± 0,8 (n=42)
2-й тип	3	1,4 ± 0,5 (n=43)	2,3 ± 0,8 (n=43)	1,1 ± 0,2 (n=45)	1,0 ± 0,1 (n=44)	1,2 ± 0,5 (n=44)	1,7 ± 0,8 (n=43)
3-й тип	4	1,5 ± 0,6 (n=37)	1,6 ± 0,7 (n=37)	1,4 ± 0,7 (n=38)	1,0 ± 0,2 (n=37)	1,3 ± 0,6 (n=38)	1,9 ± 0,8 (n=38)
4-й тип	5	1,6 ± 0,9 (n=17)	2,5 ± 1,1 (n=17)	1,3 ± 0,5 (n=17)	1,1 ± 0,3 (n=17)	1,6 ± 1,0 (n=17) p5-3=0,02	2,0 ± 0,9 (n=14)
5-й тип	6	2,2 ± 0,9 (n=9) p6-1=0,04 р6-2=0,0003 р6-3=0,0002 р6-4=0,003 р6-5=0,05	1,9 ± 1,1 (n=8) p6-2=0,05	2,1 ± 1,3 (n=8) p6-1=0,03 р6-2=0,0001 р6-3=0,0000 р6-4=0,017 р6-5=0,017	1,4 ± 0,7 (n=8) p6-2=0,0003 p6-3=0,0002 p6-4=0,002	1,9 ± 0,9 (n=9) p6-1=0,03 p6-2=0,008 p6-3=0,0009 p6-4=0,009	1,7 ± 0,7 (n=8)

Примечание: p – показатель значимости различий между группами.

Таблица 3

Выраженность экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов в разных структурах новообразования с учетом сочетания структур степени дифференцировки опухоли при раке гортани

Дифференцировка опухоли	Тип структуры	MMП-1	ТИМП-1	MMП-2	ТИМП-2	MMП-9	CD 147 в цитоплазме
Высокая	1-й тип (n=8)	1,6 ± 0,5	3,3 ± 0,8	1,1 ± 0,3	1,0 ± 0,0	1,3 ± 0,4	2,1 ± 0,9
	2-й тип (n=8)	1,4 ± 0,5	3,0 ± 0,7	1,1 ± 0,3	1,0 ± 0,0	1,2 ± 0,4	2,1 ± 1,1
Низкая	3-й тип (n=3)	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,0	1,7 ± 0,5	1,0 ± 0,0	1,7 ± 0,5	2,3 ± 1,1
	4-й тип (n=12)	1,6 ± 0,9	2,6 ± 1,2	1,2 ± 0,6	1,1 ± 0,2	1,7 ± 1,1	2,0 ± 1,0
	5-й тип (n=2)	1,5 ± 0,7	3,0 ± 0,0	2,0 ± 0,0	2,0 ± 0,0	2,5 ± 0,7	2,0 ± 1,4
Высокая и низкая	1-й тип (n=31)	1,4 ± 0,6	2,3 ± 0,8	1,2 ± 0,4	1,0 ± 0,1	1,3 ± 0,7	1,8 ± 0,8
	2-й тип (n=33)	1,4 ± 0,6	2,1 ± 0,7	1,1 ± 0,2	1,0 ± 0,2	1,2 ± 0,5	1,6 ± 0,7
	3-й тип (n=33)	1,6 ± 0,7	1,6 ± 0,7	1,4 ± 0,7	1,1 ± 0,2	1,2 ± 0,6	1,8 ± 0,8
	4-й тип (n=2)	2,0 ± 1,4	1,5 ± 0,7	2,0 ± 0,0	1,5 ± 0,7	1,5 ± 0,7	2,0 ± 1,4
	5-й тип (n=6)	2,5 ± 1,0	1,7 ± 1,2	1,8 ± 1,3	1,0 ± 0,0	1,5 ± 0,8	1,6 ± 0,5

Нами обнаружено, что выраженность экспрессии ММП и их ингибиторов зависит от степени дифференцировки структур. Она минимальна и неотличима существенно от нормального эпителия в структурах 1–4-го типов. Максимальная экспрессия металлопротеиназ ММП-1, ММП-2, ММП-9 и ТИМП-2 выявлена в наименее дифференцированных структурах 5-го типа (табл. 2).

Представляло интерес выяснить, зависит ли экспрессия металлопротеиназ и их ингибиторов от варианта сочетания в опухоли структур разной степени дифференцировки. Анализ результатов показал, что уровень экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов в большей степени зависит от того, какие гистологические структуры образуют клетки плоскоклеточной карциномы, и практически не зависит от того, в каком варианте опухоли по сочетанию высоко- и низкодифференцированных структур они находятся (табл. 3).

Частота развития лимфогенных метастазов почти в 5 раз выше в опухолях надскладочного пространства по сравнению с раком гортани в области голосовых складок (табл. 4).

В первичных опухолях с регионарными лимфогенными метастазами обнаружена более выраженная экспрессия ММП9 в опухолевых структурах с ороговением (1-го типа), построенных клетками типа шиповатых (2-го типа) и образованных базалоидными клетками (3-го типа). Индуктор синтеза металлопротеиназ CD147 экспрессировался более интенсивно только в опухолевых структурах 1-го типа. В структурах менее дифференцированных (4-го и 5-го типов) подобных различий не обнаружено. Более того, экспрессия ММП1 в них была даже ниже, чем в группе без лимфогенных метастазов. Не обнаружено различий экспрессии ММП-2, ТИМП-1 и ТИМП-2 в опухолях с наличием и отсутствием лимфогенных метастазов (табл. 5).

В случаях локализации плоскоклеточных карцином в надскладочной области гортани лимфогенное метастазирование возникало при любой степени дифференцировки опухоли, однако чаще

Таблица 4

Локализация опухоли	Лимфогенные метастазы
	Нет (N-)	Есть (N+)
Надскладочное пространство	9/36 (25 %)	27/36 (75 %) р2=0,0000
Голосовые складки	19/22 (86 %)	3/22 (14 %)
χ2 =20,3; р=0,00003

Таблица 5

Выраженность экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов в разных структурах новообразования при раке гортани в зависимости от наличия регионарных метастазов

Тип структуры	Наличие регионарных метастазов	MMП-1	ТИМП-1	MMП-2	ТИМП-2	MMП-9	CD 147
1-й тип	N0(n=25)	1,4 ± 0,6	2,6 ± 0,8	1,2 ± 0,4	1,0 ± 0,0	1,1 ± 0,3	1,6 ± 0,8
	N+(n=17)	1,5 ± 0,5	2,5 ± 1,2	1,1 ± 0,3	1,1 ± 0,2	1,6 ± 0,9	2,2 ± 0,8
		F=0,8; р=0,37	F=0,03; р=0,85	F=0,5; р=0,49	F=1,5; р=0,23	F=5,3; р=0,02	F=3,5; р=0,06
2-й тип	N0(n=26)	1,4 ± 0,6	2,3 ± 0,7	1,1 ± 0,3	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,1	1,6 ± 0,8
	N+(n=19)	1,5 ± 0,5	2,4 ± 0,9	1,0 ± 0,2	1,0 ± 0,2	1,5 ± 0,7	1,9 ± 0,9
		F=0,6; р=0,45	F=0,3; р=0,58	F=0,5; р=0,48	F=1,5; р=0,23	F=8,3; р=0,006	F=1,3; р=0,26
3-й тип	N0(n=21)	1,6 ± 0,8	1,6 ± 0,5	1,5 ± 0,8	1,1 ± 0,2	1,0 ± 0,0	1,8 ± 0,8
	N+(n=16)	1,4 ± 0,5	1,6 ± 0,9	1,3 ± 0,4	1,1 ± 0,2	1,6 ± 0,8	2,0 ± 0,9
		F=0,3; р=0,57	F=0,04; р=0,83	F=0,6; р=0,44	F=0,01; р=0,91	F=9,7; р=0,003	F=0,4; р=0,51
4-й тип	N0(n = 2)	2,5 ± 0,7	1,5 ± 0,7	1,5 ± 0,7	1,5 ± 0,7	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,0
	N+(n = 15)	1,5 ± 0,9	2,6 ± 1,1	1,3 ± 0,5	1,1 ± 0,2	1,7 ± 1,0	2,2 ± 0,9
		F=2,3; р=0,15	F=1,8; р=0,20	F=0,3; р=0,61	F=3,5; р=0,08	F=0,8; р=0,39	F=2,8; р=0,11
Комплексы опухолевых клеток	N0(n=5)	2,8 ± 0,8	2,0 ± 1,2	2,6 ± 1,5	1,4 ± 0,8	1,6 ± 0,8	1,6 ± 0,5
	N+(n=4)	1,5 ± 0,5	1,7 ± 1,1	1,3 ± 0,5	1,3 ± 0,5	2,2 ± 0,9	2,0 ± 1,0
		F=6,9; р=0,03	F=0,1; р=0,72	F=1,8; р=0,22	F=0,01; р=0,91	F=1,1; р=0,33	F=0,5; р=0,48

Примечание: F – значения критерия Фишера; p – показатель значимости различий между группами с N0 и N+.

Лимфогенное метастазирование в зависимости от локализации опухоли у больных раком гортани

оно регистрировалось, когда опухоль образована исключительно структурами низкой степени дифференцировки (90 %). Частота лимфогенного метастазирования опухолей, представленных сочетанием высоко- и низкодифференцированных структур, достаточно высока (70,5 %), однако значимо не отличается от частоты метастазирования высокодифференцированных опухолей (40 %).

Иная картина наблюдалась при локализации опухолей в области голосовых связок. Несмотря на то, что общая частота лимфогенного метастазирования при этой локализации ниже, чем при плоскоклеточных карциномах надскладочной области, не обнаружено каких-либо различий в случаях, когда опухоли построены высокодифференцированными или низкодифференцированными структурами. Различия в частоте развития лимфогенных метастазов опухолей с разной локализацией связаны исключительно с плоскоклеточными карциномами голосовых связок, в которых есть высоко- и низкодифференцированные структуры.

Если сравнить частоту лимфогенных метастазов, развивающихся при плоскоклеточном раке голосовых связок в зависимости от строения опухолей, то, в отличие от рака надскладочной области гортани, нет различий между опухолями, построенными только высокодифференцированными или только низкодифференцированными структурами. В то же время частота метастазирования этих опухолей значимо выше, чем при карциномах, построенных высоко- и низкодифференцированными структурами (табл. 6).

В связи с существенными различиями в частоте лимфогенного метастазирования плоскоклеточного рака смешанного строения при локализации в надскладочной области и в области голосовых связок представляло интерес выяснить, обусловлено ли это особенностями экспрессии металлопротоиназ, их индуктора и ингибиторов. Исследуемые параметры сравнивались в подгруппах опухолей с локализацией в надскладочной области и в области голосовых связок в группах без лимфогенных ме-

Таблица 6

Лимфогенное метастазирование в зависимости от локализации опухоли и степени дифференцировки опухолевых структур

Локализация опухоли		Надскладочная область гортани		Область голосовых связок
Метастазы в лимфоузлы		N-	N+	N-	N+
1		2	3	4	5
Высокая степень дифференцировки	а	3/5	2/5	3/4	1/4 р3=0,63 χ2=0,22
Низкая степень дифференцировки	в	1/10	9/10 р в-а =0,04 χ2=4,26	1/3	2/3 р3=0,33 χ2=0,97 р в =0,27 χ2=1,97
Высокая и низкая степень дифференцировки	с	5/17	12/17 p =0,21 с-а χ2=1,26 рc-в =0,24 χ2=1,37	15/15	0/15 р3=0,0000 χ2=16,94 рс-а=0,046 χ2=3,96 рс-в=0,0008 χ2=11,25

Примечание: p – показатель значимости различий между группами.

тастазов. Экспрессия ММП, CD147 и ингибиторов металлопротеиназ в разных структурах плоскоклеточной карциномы значимо не отличалась от соответствующих параметров в карциномах надскладочной области без лимфогенных метастазов. Однако в опухолях голосовых связок отмечена тенденция к более выраженной экспрессии

ТИМП1 – ингибитора металлопротеиназ 1 и 9. Не исключено, что ингибиция активности ММП9, которая в наших исследованиях сопряжена с лимфогенным метастазированием, является одним из существенных факторов, уменьшающих частоту лимфогенного метастазирования плоскоклеточных карцином голосовых связок (табл. 7).

Таблица 7

Выраженность экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов в разных структурах новообразования с сочетанием структур высокой и низкой степени дифференцировки в опухолях разной локализации

Локализация	Тип структур	MMП-1	ТИМП-1	MMП-2	ТИМП-2	MMП-9	CD 147
Надскладочная область	1-й тип	1,5 ± 1,0	2,0 ± 1,1	1,2 ± 0,5	1,0 ± 0,0	1,2 ± 0,5	2,0 ± 0,8
	2-й тип	1,6 ± 0,8	2,2 ± 0,4	1,2 ± 0,4	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,0	1,2 ± 0,4
	3-й тип	1,8 ± 0,8	1,6 ± 0,5	1,8 ± 1,3	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,0	1,6 ± 0,5
	4-й тип	–	–	–	–	–	–
	5-й тип	–	–	–	–	–	–
Голосовые складки	1-й тип	1,3 ± 0,6	2,6 ± 0,6 рн=0,08	1,2 ± 0,4	1,0 ± 0,0	1,1 ± 0,2	1,5 ± 0,6 рн=0,09
	2-й тип	1,3 ± 0,6	2,1 ± 0,7	1,1 ± 0,3	1,0 ± 0,0	1,0 ± 0,0	1,5 ± 0,6
	3-й тип	1,6 ± 0,8	1,6 ± 0,6	1,4 ± 0,7	1,1 ± 0,2	1,0 ± 0,0	2,0 ± 0,8
	4-й тип	3,0	2,0	2,0	2,0	1,0	1,0
	5-й тип	3,0 ± 0,8	2,0 ± 1,4	2,2 ± 1,5	1,0 ± 0,0	1,2 ± 0,5	1,5 ± 0,5

Примечание: рн – показатель значимости различий в сравнении со значениями параметров 1-го типа структур в опухолях надскладочной области.

Обсуждение

Плоскоклеточная карцинома гортани гетероген-на по морфологическому строению. Целесообразно отдельно оценивать наличие в опухоли пяти типов структур, различающихся по степени дифференцировки клеток: структуры с ороговением (1-й тип); с клетками базалоидного и шиповатого типа без ороговения (2-й тип); с клетками базалоидного типа (3-й тип); структуры с выраженным клеточным полиморфизмом (4-й тип) и одиночные опухолевые клетки (5-й тип). Потенциальная способность опухолевых клеток к инвазивному росту, оцениваемая по экспрессии металлопротеиназ и их ингибиторов, оказалась, в соответствии с ожиданием, минимальной в дифференцированных структурах и максимально выраженной по экспрессии ММП-1, ММП-2 и ММП-9 в наименее дифференцированных – дискретных опухолевых клетках.

Однако такая закономерность распределения активности металлопротеиназ в структурах плоскоклеточного рака разной степени дифференцировки была характерна в большей степени для случаев без лимфогенных метастазов, но не для группы с лимфогенной диссеминацией карциномы. С лимфогенным метастазированием оказалась связанной только более выраженная в опухолевых клетках экспрессия ММП-9. Имеющиеся наблюдения о роли металлопротеиназ и их ингибиторов в лимфогенном метастазировании противоречивы. Многие авторы отмечают, что при наличии регионарных лимфогенных метастазов выявляется снижение уровня экспрессии ТИМП-2 в опухолевых клетках и ТИМП-1 в строме [2]. Существуют данные о связи экспрессии MMP-9 и MMP-2 с инвазией и лимфогенным метастазиованием плоскоклеточного рака [6]. MMP-9 даже предлагают в качестве прогностического фактора лимфогенного метастазирования при плоскоклеточной карциноме головы и шеи [4, 10]. С другой стороны, существуют данные о том, что экспрессия ММП-9 не связана ни с размером опухоли, ни с клинической стадией, ни со степенью дифференцировки, ни с состоянием лимфатических узлов [7].

Особенностью наших наблюдений было усиление экспрессии ММП-9 у больных с лимфогенными метастазами только в более дифференцированных структурах плоскоклеточной карциномы (1, 2 и 3-го типа). Кроме этого, в наиболее дифференцированных структурах 1-го типа наблюдалось и усиление экспрессии CD147 – индуктора синтеза металлопротеиназ. Повышение синтеза ММП в высокодифференцированных опухолевых структурах может свидетельствовать о том, что их способность к коллективному инвазивному росту усилена в опухолях, метастазирующих в лимфатические узлы. Это соответствует представлениям о том, что лимфогенное метастазирование может осуществляться кластерами опухолевых клеток. В основе способности кластера опухолевых клеток к инвазивному росту лежит эпителиально-мезенхимальный переход. Именно металлопротеиназы, увеличивая экспрессию фактора транскрипции Snail, индуцируют эпительно-мезенхимальный переход, в результате которого трансформированные клетки не только теряют адгезивные молекулы, но и приобретают способность быть подвижными [8, 9].

Заключение

Предложенное нами разделение плоскоклеточных карцином на три типа в зависимости от сочетающихся структур показало, что опухоли смешанного строения (со структурами 1, и/или 2, и 3 и/или 4, и/или 5-го типов) не идентичны ни высокодифференцированным (со структурами 1 и/или 2 типов), ни низкодифференцированным (с сочетанием структур 3, и/или 4, и/или 5-го типов) карциномам. Лимфогенное метастазирование сопряжено с усилением экспрессии ММП-9 в структурах опухоли высокой степени дифференцировки. Меньшая частота метастазирования плоскоклеточных карцином голосовых связок, в сравнении с опухолями надскладочной области, наблюдается только в группах с сочетанием высоко- и низкодифференцированных структур опухоли. По-видимому, это в определенной степени связано с несколько более высокой экспрессией в опухолях голосовых связок ТИМП-1 – ингибитора ММП-1 и ММП-9. Представляет интерес изучить вклад в инвазивный рост и лимфогенное метастазирование синтеза металлопротеиназ клетками воспалительного инфильтрата стромы плоскоклеточного рака гортани.