Теория вероятностей в оценке активности сукцинатдегидрогеназы лимфатического узла в эксперименте

Вероятность, как известно – это «Возможность осуществления чего-нибудь степень вероятности чего-нибудь»…«Теория вероятностей (раздел математики, изучающий закономерности, основанные на взаимодействие большого числа случайных явлений)» [4, с. 65]. «Мы живем не в идеальном мире, к которому стремились люди в эпоху Просвещения, а … в настоящем океане неопределённости. Чтобы познать мир, мы должны покорить случайность – одно из последних белых пятен на наших математических картах, которое вызывает столько тревог в обществе, жаждущим надежности и уверенности [2, с. 10]. Таким образом, «… теория вероятностей по своей сути есть не более чем здравый смысл, сведенный к исчислению: эта теория позволяет нам оценить то, что точные умы чувствуют своим инстинктом, который часто не осознают» [2, с. 51]. «Вероятность – это число, указывающее, насколько возможным является результат случайного события или эксперимента. Во многих случаях присвоить вероятность событию можно интуитивно …» [2, с. 59]. Помимо обычного подсчёта («на пальцах») предметов, явлений, фактов в математике существует раздел, предусматривающий определение числа предметов или групп, исключая подсчёт их по одному (комбинаторика) [2, с. 11].

«Предполагается поиск для подсчёта наиболее подходящего метода в разных ситуациях» [2, с. 33]. Один из таких методов был предложен выдающимся отечественным морфологом С. Б. Стефановым [6]. В публикации подробно изложен авторский способ визуальной количественной микроскопической характеристики ядер в клеточной культуре, предусматривающий оценивать «… не абсолютное число элементов на квадрате (окулярной сетки – А. К.), то есть при этом «оценивают “на глаз”», не пересчитывая число ядер…» [6, с. 79].

Неизбежный субъективизм при этом преодолевается определённой тренировкой, предусматривающей накопление «морфологического опыта», который в итоге «… позволяет контролировать статистические результаты визуальной классификации множества изображений, … принимать решение о достаточности накопленных данных непосредственно в ходе работы» [6, с. 83]. Подобный способ был применен нами для оценки активности СДГ в ЛУ экспериментальных животных, проиллюстрировав упрощение, удешевление и ускорение метода, например, для «…количественной оценки содержания продуктов гистохимических реакций в тканях с использованием реле времени [1, с. 29]. Особую актуальность приобре- тает исследование степени активности СДГ в органах иммуногенеза, предотвращающих, в частности, иммуносупрессию, масштабы которой эпидемиологически постоянно расширяются [3]. Актуальным представляется также способ оценки активности СДГ, основанный на постулатах теории вероятностей [2, 6].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Дать количественную оценку активности СДГ в ЛУ экспериментальных животных с использованием постулатов теории вероятностей.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

У 160 кроликов-самцов породы шиншилла 4 возрастных групп от периода новорожденно-сти (первые трое суток после рождения), юного возраста (1 месяц, период окончания молочного кормления), пубертатные (3 месяца), зрелые (5 месяцев) в соответствии с правилами биоэтики осуществляли забор центральных брыжеечных и паховых ЛУ. Из свежезамороженной в криостате ткани ЛУ готовили срезы толщиной 10 мкм. СДГ выявляли по методу Нахласа при использовании в качестве акцептора водорода нитросинего тетразолия [7, с. 59] с «оценкой» числа гранул формазана на условную единицу площади (43,56 мкм2) на основе учёта постулируемой теории вероятностей, в работах С. Б. Стефанова [6].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В ЛУ обеих локализаций хромофор не выявляется только в строме и синусах. В других структурных компонентах ЛУ – в мантии и светлых центрах лимфоидных узелков, межузелковой зоне, внутренней части коркового вещества и мозговых тяжах всегда обнаруживаются с различной плотностью на единицу площади (43,56 мм² ) тёмно-синие глыбки формазана, диаметром около 0,6 мкм. В некоторых участках (мантия лимфоидных узелков и мозговые тяжи), преимущественно брыжеечных ЛУ новорожденных и месячных кроликов, глыбки хромофора, локализуясь по периферии клеток, повторяют контуры клеток сплошной цепочкой. На нашем материале, полученном количественным методом, выявлено, что плотность гранул формазана в ЛУ зависит от возраста животного, регионарной принадлежности ЛУ и его структурного компонента.

Данные о количестве гранул формазана в структурных компонентах брыжеечных и паховых ЛУ кролика в возрастном аспекте приведены в следующей таблице.

Количество гранул формазана в структурных компонентах брыжеечных и паховых ЛУ кроликов (на 43,56 мкм2). Среднегодовые данные (М + m) по возрастам

Анализ среднегодовых данных плотности гранул хромофора на единицу площади показал следующее. Наибольшее число гранул форма-зана на единицу площади встречается в структурах ЛУ обеих локализаций у животных младших возрастных групп (новорожденные, месячные). Количество гранул формазана как в брыжеечных, так и в паховых ЛУ во всех структурных компонентах уменьшается от группы новорожденных кроликов к группе половозрелых (5 мес.). Сравнение ЛУ по локализации показывает, что плотность гранул формазана на единицу площади преобладает в тканях брыжеечных ЛУ, по сравнению с паховыми, во всех рассматриваемых возрастных группах кроликов.

Анализ по структурным компонентам показывает большую плотность гранул хромофора на единицу площади в мантии лимфоидных узелков. Так, у кроликов в 1 мес. в брыжеечных ЛУ мантия лимфоидных узелков содержит (18,4 ± 0,39) гранул хромофора на единицу площади, в светлом центре они не обнаружены. В мантии лимфоидных узелков паховых ЛУ месячных животных находится (10,99 ± 0,27) гранул формазана, в светлых центрах они также отсутствуют. Различия между другими табличными данными находятся за пределами уровня достоверности различий, однако, в совокупности они свидетельствуют о закономерности в виде тенденции различий.

Таким образом, при помощи теста на СДГ нами выявлено возрастное уменьшение интенсивности обменных процессов в тканях ЛУ кроликов в интервале «новорожденность – 5 мес.» и преобладание энергетического обеспечения в тканях брыжеечных ЛУ по сравнению с паховыми.

Можно предположить, что повышенная активность СДГ в ЛУ новорожденных кроликов имеет отношение к формированию иммунного гомеостаза при первом контакте организма животного с факторами внешней среды, стимулирующими те стороны деятельности ЛУ, которые для своего обеспечения требуют напряженности энергетических процессов. Указанное предположение сложно исключить, так как период новорожденности ответственен для формирования иммунорезистентности организма.

Вместе с тем некоторые литературные морфологические факты [5] недостаточно согласуются со сказанным.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наиболее вероятна, на наш взгляд, связь возрастных изменений активности СДГ с изменениями метаболических реакций ЛУ и, прежде всего, с утилизацией липидов. В этом случае брыжеечные ЛУ действительно, особенно в период «новорожденность – 1 мес.», оказываются в своеобразных условиях. До месячного возраста, когда кролики находятся на молочном кормлении, через брыжеечные ЛУ проходит лимфа с богатым содержанием липидов материнского молока и это может быть сопряжено с высоким уровнем энергетических процессов в ЛУ. В. Б. Слуцкий [5] возрастные изменения активности СДГ в лимфоцитах крови человека объяснял следующим образом. У тренированных лиц снижение активности СДГ с возрастом возможно «… с усилением энергетической регуляции и более полным состоянием отдыха, что характерно для спортсменов при полном восстановлении сил после нагрузки» [5, с. 169]. Повышение активности СДГ в лимфоцитах кро- ви, отмеченных у нетренированных лиц, автор объясняет снижением «… полноты энергетического контроля, которая “по-существу” аналогична более высокому уровню основного обмена у нетренированных людей по сравнению с тренированными» [5, с. 170]. В лимфоцитах брыжеечных и паховых ЛУ кроликов возрастное снижение активности СДГ, наряду с изменением характера питания в рассматриваемом возрастном интервале, вероятно в качестве основания нельзя исключить также, механизм, указанный В. Б. Слуцким [5] при интерпретации активности СДГ лимфоцитов крови человека, связанной с особенностями физического тренировочного процесса.