Терапевтическая эффективность протоколов синхронизации полового цикла у коров при кисте яичников

Введение. Фармакологические способы регулирования полового цикла необходимо рассматривать как полезный инструмент, основной целью которого является устранение организационных ошибок для улучшения процесса осеменения и повышения стельности в стаде. Системы регулирования эструса в некоторых случаях могут использоваться для лечения нарушений деятельности половой системы, таких как «скрытая (тихая) охота», киста яичников (фолликулярная) [1]. Фолликулярная киста яичников – это часто диагностируемое заболевание половой системы коров молочного направления, встречается примерно у 6–19 % животных этого класса [2]. Согласно данным J.D. Ambrose с соавторами (2004), количество случаев диагностирования фолликулярной кисты в период после отела непосредственно выше, так как около 60 % животных, у которых присутствует киста до первой овуляции, восстанавливают цикл яичников спонтанно [3].

Система терапии на основе гонадотропин-рилизинг гормона простагландина, направлен- ная на сокращение сервис-периода и уменьшение числа случаев возникновения кист, была предложена и протестирована при их лечении в 1996 г. Разработанную систему можно использовать при обнаружении кисты между 30-м и 90-м днем после отела, так как она включает введение гонадотропин-рилизинг гормона (ГнРГ) (Receptal®, Fertagyl®), а затем, спустя 9 дней, введение PGF2α (Estrumate®) [4].

Применение ГнРГ (Fertagyl®, Receptal®) является наилучшим способом лечения кисты. Известно, что ГнРГ стимулирует гипофиз на высвобождение лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ). Такой индуцированный подъем ЛГ приводит кистозный фолликул к лютеинизации. В зависимости от типа кисты и, возможно, дозы ГнРГ можно заставить некоторые кистозные фолликулы овулировать. Более того, индуцированное ГнРГ, увеличение ФСГ возобновляет фолликулярную волну, что обычно позволяет восстановить цикл. После инъекции 60–80 % коров через 18–23 дня приходят в состояние эструса [5].

Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) является гонадотропином, который активизирует выработку ЛГ. Так, внутривенное применение ХГЧ (Chorulon®; 3000 ед.) представляет собой еще одно эффективное средство для терапии кисты. У крупного рогатого скота период полураспада данного гормона составляет около 48 ч, данное явление позволяет гормону оказывать продолжительное лютеотрофное воздействие прямо на кисту, что и обосновывает применение ХГЧ для повторных случаев [6].

Исследования показали, что предварительное воздействие на клетки нервных окончаний фолликула достаточного уровня прогестерона необходимо для их подготовки к последующей стимуляции ГнРГ. Поэтому применение прогестерона или прогестагена является местным лечением фолликулярной кисты и дает хорошие результаты – как в комбинации с ГнРГ, так и отдельно°[7].

Для лечения кисты яичника у молочных коров в период лактации в качестве альтернативы может использоваться классическая программа «Овсинх». Способ описан в 2000 г. J.A. Bartolome и другими авторами [8], которые доказали, что синхронизация овуляции и запланированное осеменение дают те же показатели стельности, что и полученные при синхронизации эструса и осеменении во время индуцированного эструса в течение 7 дней. Дальнейшие исследования J.A. Bartolome (2005) [9] и de F. Rensis (2008) [10] подтвердили возможность использования программы «Овсинх» для лечения молочных коров с кистой яичников.

Таким образом, исходя из вышеизложенного, учитывая вновь открываемые механизмы регуляции функции яичников и характер ответных реакций на действие гонадотропных гормонов в зависимости от количества присутствующих антральных фолликулов, возникает необходимость дальнейших исследований по совершенствованию протоколов применения гормональных препаратов [11].

Цель исследования – изучить эффективность терапевтического и синхронизирующего эффектов применения протоколов синхронизации полового цикла у высокопродуктивных коров с кистой яичников.

Задачи: исследовать изменения ультрасонографической картины яичников у коров с кистой яичников в динамике проведения протоколов синхронизации и схемы терапии; изучить уровень прогестерона в динамике проведения протоколов синхронизации и схемы терапии у коров с дисфункцией яичников; определить эффективность использования при кисте яичников протоколов синхронизации и схемы лечения.

Объект и методы. Исследование проводилось в период 2020 г. в лаборатории ветеринарии и отделе ПЗ «Комсомольское» Павловского района Алтайского края ФГБНУ ФАНЦА. Объектом исследования служили коровы чернопестрой породы с удоем за 305 дней лактации 7 600 кг молока в количестве 42 гол. в лактационный период с кистами яичников. После 50– 60-го дня после отела, т. е. после периода добровольного ожидания, коровы были исследованы при помощи портативного сканера iScan со встроенным электронным линейным ректальным датчиком 7,5 МНz с целью диагностики кисты яичников. Кисты определяли как неовулирующую фолликулярную структуру (диаметр > 17 мм), существующую более 10 дней и более при отсутствии функционирующего желтого тела, сопровождаемую аномальным проявлением признаков половой охоты (нерегулярные промежутки между эструсом, нимфомания или анэструс). В эксперименте были сформированы две опытные и одна контрольная группы коров. Животные контрольной группы получали терапию по стандартному протоколу для данного типа дисфункции яичников и искусственно осеменялись по естественной охоте. В 1-й опытной группе дополнительно к протоколу синхронизации «Овсинх» применяли препарат СИДР, а во 2-й опытной группе – препарат «Прогестамаг» (рис. 1).

Диагностику стельности у коров экспериментальных групп проводили на 35-й день после искусственного осеменения методом ультразвуковой сонографии при помощи портативного сканера iScan со встроенным электронным линейным ректальным датчиком 7,5 МНz. Ультрасонографические исследования репродуктивной системы в опытных и контрольной группах проводили: перед началом протокола синхронизации или схемы терапии, на 3-й, 7-й и 9-й день проведения протокола синхронизации или схемы терапии.

Сурфагон		Схема проведения исследования						Эстрофан
Сурфагон	Сурфагон  4		5	6      7	8	9	10
Сурфагон
Прогестамаг Седимин				Эстрофан Элеовит		Сурфагон Катозал
■ --- ■ 2	— ■ 3	— ■ — 4	■ 5	— ■ - ■ — 6	- ■ — 8	— ■ —	- ■ — 10	— ■ 11

Сурфагон

--* контрольная

Эстрофан, удаление СИДРА          ИО-------— ■ —2 опытная

♦ ♦♦♦♦♦ —»

5     6            8 Сурфагон       11  —•—1 опытная

СИДР

♦     ♦     ♦     ♦

2       3      4

1       2       3      4      5       6      7      8      9      10     11

Номер дня протокола синхронизации

Рис. 1. Схема исследования

Изучение гормонального статуса животных осуществляли путем определения в сыворотке крови прогестерона с использованием набора реагентов для иммуноферментного определения фирмы ООО «Компания АлкорБио» методом твердофазного иммуноферментного анализа на фотометрическом автоматическом анализаторе Chem Well Combi 2910 (ChemWell 2910 – Awareness Tehnology, США). Для измерения в крови уровня прогестерона были взяты пробы крови: перед началом протокола синхронизации или схемы терапии, на 3-й, 7-й и 9-й день проведения протокола синхронизации или схемы терапии. Терапевтический эффект определяли по количеству плодотворных осеменений в группах животных.

Статистическая обработка результатов выполнена с помощью программы MS Excel и оценки критериев достоверности по Стьюденту.

Результаты и их обсуждение. В результате применения схем синхронизации и схемы терапии при кистозной патологии было получено несколько разных результатов после применения протоколов синхронизации.

Так, в 20,0 % случаев на фоне применения протоколов синхронизации в опытных группах произошло рассасывание кисты. При последующем ультразвуковом исследовании на 32-й день после искусственного осеменения вновь проис- ходило образование кисты, и в дальнейшем часть животных были выбракованы (рис. 2).

В 30,0 % случаев у животных экспериментальных групп с фолликулярными кистами происходила их овуляция, образование желтого тела. Процесс овуляции кисты яичника подтверждается другими экспериментальными исследованиями, авторы которых указывают на то, что активные фолликулярные кисты сохраняют способность к овуляции в период раннего формирования [12]. В большинстве случаев это были животные, у которых послеродовой период был в пределах 45–50 дней (рис.°3).

В 30,0 % случаев на фоне применения протоколов синхронизации произошло только лишь уменьшение кисты в размере, что указывает на отрицательный овариальный ответ со стороны яичников и формирование в последующем кисты вновь (рис. 4).

В 20,0 % случаев киста уменьшилась в размере и произошло образование в этом же яичнике желтого тела, вероятнее всего, вследствие неактивности кисты и отсутствия отрицательного ее влияния на функциональную активность яичника. Образование желтого тела происходило вследствие овуляции вновь образующегося фолликула на фоне применения гормональных препаратов (рис. 5). Динамика уровня прогестерона при кисте яичника у изучаемых животных представлена на рисунке 6.

А

Б

А

Рис. 3. Ультрасонограммы правого яичника при кисте в динамике протокола синхронизации: А - перед началом протокола «Овсинх» с препаратом СИДР, фолликулярная киста с перегородкой, размером 33 мм; Б - на 9-й день ведения протокола, яичник имеет фолликул размером 8 мм и желтое тело 29 мм (зонд 7,5 МГц, глубина 8 см)

Рис. 2. Ультрасонограммы правого яичника при кисте в динамике протокола синхронизации: А - перед началом протокола «Овсинх» с препаратом СИДР, фолликулярная киста, размером 30 мм; Б - на 9-й день ведения протокола, яичник имеет размер 22 мм, киста отсутствует (зонд 7,5 МГц, глубина 8 см)

Б

А

Б

Рис. 4. Ультрасонограммы правого яичника при кисте в динамике протокола синхронизации: А - перед началом протокола «Овсинх» с препаратом «Прогестамаг», фолликулярная киста, размером 34 мм; Б - на 9-й день ведения протокола, киста уменьшилась в размере на 12 мм и стала 22 мм (зонд 7,5 МГц, глубина 8 см)

А

Б

Рис. 5. Ультрасонограммы левого яичника при кисте в динамике протокола синхронизации: А - перед началом протокола «Овсинх» с препаратом СИДР, фолликулярная киста с перегородкой, размером 40 мм; Б - на 9-й день ведения протокола, киста уменьшилась в размере на 17 мм и стала 23 мм, образовалось желтое тело 18 мм (зонд 7,5 МГц, глубина 8 см)

Рис. 6. Динамика уровня прогестерона в крови коров при кисте яичников на фоне применения протоколов синхронизации и схемы терапии

В 1-й опытной группе коров, где на фоне применения протокола синхронизации «Овсинх» использовали препарат СИДР, концентрация в крови прогестерона увеличилась в 2 раза на 4-й день наблюдения, оставаясь на таком уровне до 7-го дня протокола (8,37 и 8,48 нмоль/л соответственно), и снизилась к первоначальному уровню к 9-му дню наблюдений (5,43 нмоль/л) вследствие удаления препарата СИДР на 7-й день ведения протокола. Динамика уровня прогестерона в крови у коров 2-й опытной группы, где на фоне протокола «Овсинх» применяли препарат «Прогестамаг», значительно отличалась от такового показателя в контрольной группе животных и в 1-й опытной группе коров и характеризовалась резким увеличением (в 2,9 раза) концентрации прогестерона до 4-го дня наблюдения (47,85 нмоль/л), а затем происходило постепенное снижение его уровня в крови к 9-му дню исследования до 15,88 нмоль/л. В этот период концентрация прогестерона в крови коров 2-й опытной группы оставалась на достаточно высоком уровне, что можно отчасти объяснить превалированием в данной группе животных с лютеиновыми кистами, а с другой стороны – неравномерным и высоким поступлением в кровь прогестерона после введения препарата «Прогестамаг». В контрольной группе животных, где применяли схему лечения кисты, происходило постепенное снижение прогестерона от первоначального уровня к 9-му дню исследования.

При изучении терапевтической эффективности протокола синхронизации «Овсинх» при кистах яичников установлено, что наибольшей терапевтической эффективностью обладает протокол синхронизации «Овсинх» в сочетании с препаратом СИДР (табл.).

Сравнительная эффективность протоколов синхронизации и схемах терапии

Показатель	Группа
	1-я опытная (СИДР)	2-я опытная (Прогестамаг)	Контрольная
Индекс-осеменения	4,3±1,76*	4,6±1,86*	5,6±0,75
Сервис-период, дней	173±17,23*	184±15,73*	193±13,53
Всего стельных коров, %	57,1	50,6	43,8

* Р < 0,05.

Из таблицы видно, что после осеменения в один или несколько половых циклов в 1-й опытной группе оплодотворилось на 13,3 и 6,8 % больше коров, чем в контрольной и группе коров, где применяли препарат «Прогестамаг». Сервис-период также был самый низкий в 1-й группе животных и составил 173±17,23 дня, что на 20 и 11 дней короче, чем в контрольной и 2-й опытной группах животных соответственно. Изменения достоверны только в сравнении с контрольной группой животных. Самый низкий индекс осеменения также отмечали в первой опытной группе – 4,3±1,76, что на 1,3 и 0,3 меньше, чем в контрольной и во 2-й опытной группах коров соответственно. Изменения в опытных группах достоверны в сравнении с животными в контроле.

Заключение. При исследовании ультразвуковой картины яичников при кистозной патологии, независимо от применяемых протоколов синхронизации полового цикла и схемы терапии, в среднем у 20,0 % коров произошло рассасывании кисты; у 30,0 % животных на месте ранее выявленной кисты зафиксировали образование желтого тела; у 30,0 % животных произошло уменьшение кисты в размерах и в 20,0 % случаев – уменьшение кисты в размерах и образование желтого тела. При изучении эффективности протоколов синхронизации у животных с кистами яичников установлено, что применение при данной патологии в схеме синхронизации препарата СИДР позволило повысить общую оплодотворяемость на 13,3 %, индекс осеменения снизить на 1,3 и длительность сервис-периода на 20 дней в сравнении с животными контрольной группы.