Тиреотропные свойства Potentilla alba L

Фармакотерапия заболеваний щитовидной железы в настоящее время является актуальной проблемой медицинской науки и практического здравоохранения. В наибольшей степени на частоту тиреоидной патологии влияет потребление йода населением. В России более 2/3 населения проживает на территориях с недостатком йода в почве, воде, воздухе, продуктах питания и др. [3, 4]. Социальный аспект проблемы заключается в том, что наиболее часто болеют люди трудоспособного возраста от 20 до 50 лет, и нередко данное заболевание и его осложнения служат причиной стойкой нетрудоспособности. Среднесу- точное потребление йода по России 40-80 мкг в сутки, тогда как требуется 150-200 мкг в сутки для взрослого. В этой связи остается актуальным поиск новых эффективных лекарственных средств на основе растительного сырья, обладающего тиреотропными свойствами [5].

Средства растительного происхождения являются перспективным источником биологически активных веществ, в том числе тиреотропного действия с широким спектром активности и высокой степенью безопасности. Одним из таких растений является лапчатка белая (Potentilla alba L.) семейства Розоцветных. Лапчатка белая является эффективным регулятором уровня гормонов щитовидной железы [9, 12]. Используется надземная (трава) и подземная (корневища с корнями) части. Подземная часть лапчатки белой содержит углеводы (крахмал), иридоиды, сапонины, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды (кверцетин), дубильные вещества (галлотанин) до 17% максимум в фазу цветения. Надземная часть содержит иридоиды, сапонины, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды (рутин), дубильные вещества до 6%. Растение является концентратом Zn, Mn, Cu, Se, Co, Fe, Si, Al, а также содержит элементарный йод и анион йодистой кислоты [8, 9].

Цель исследования

Целью исследования явилось определение острой токсичности сухого экстракта лапчатки белой, его влияния на состояние гормонального статуса и морфологические характеристики щитовидной железы крыс в эксперименте.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на белых крысах линии Wistar обоего пола массой 200-210 г. Острую токсичность определяли с использованием метода Першина (1978). Наблюдение за общим состоянием подопытных животных и их поведением осуществляли в течение 14 дней. Экспериментальный гипотиреоз воспроизводили путем ежедневного перорального введения мерказоли-ла (Акрихин, Россия) в дозе 10 мг/кг в течение 28 дней [7]. По истечении 28 дней определяли уровень гормонов тироксина (Т4), трийодтиро-нина (Т3), тиреотропного гормона (ТТГ) в крови. По окончании введения мерказолила животным опытной группы внутрижелудочно вводили водный раствор экстракта лапчатки белой сухого в дозе 50 мг/кг 1 раз в день, утром, на протяжении 21 дня. Животные контрольной группы получали дистиллированную воду в аналогичном режиме и эквиобъемном количестве. На 22-й день после введения испытуемого средства крыс забивали под легким эфирным наркозом. В крови животных определяли уровень Т4, Т3, ТТГ, щитовидную железу иссекали, фиксировали в 10%-ном растворе формалина и заливали в парафин. Серийные срезы толщиной 3-4 мкм готовили на микротоме, окрашивали гематокси-лин-эозином. Для патоморфологического исследования щитовидной железы использовали ал- горитмы гистологического описания по О.К. Хмельницкому [10, 11]. Оценивали среднюю высоту фолликулярного эпителия (мкм), средний диаметр фолликула (мкм), фолликулярноколлоидный индекс (ФКИ), митотический индекс, сосудистое русло.

Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью программы SOFA Statistics.

Результаты и их обсуждение

Установлено, что при внутрибрюшинном введении экстракта сухого лапчатки белой DL 50 составила 440 мг/кг. Животные погибали преимущественно на 1-2-е сутки. При этом в первые часы после введения испытуемых средств у животных наблюдали признаки интоксикации в виде снижения двигательной активности, тахикардии, учащения дыхания. Гибель животных наступала от остановки дыхания. При макроскопическом исследовании внутренних органов наблюдались полнокровие сосудов с явлениями стаза, мелкоточечные кровоизлияния под эпикардом, вздутие петель кишечника, полнокровие мезентериальных сосудов и печени. При патоморфологическом исследовании внутренних органов отмечали резкое полнокровие осмотренных органов, более выраженное в легких и печени.

В результате ежедневного введения мерка-золила в дозе 10 мг/кг перорально в течение 28 дней наблюдалась симптоматика, соответствующая клинической картине гипотиреоза. Методом ИФА в сыворотке крови крыс контрольной группы выявлено снижение уровня тиреоидных гормонов по сравнению с данными интактной группы животных: Т 4 снизился на 43%, Т 3 – на 15%, уровень ТТГ увеличился в 6,0 раз. При этом за нормальный уровень тиреоидных гормонов принимался таковой у интактной группы животных (табл.1). Снижение индекса дейодирования у животных контрольной группы, свидетельствующее об усилении периферического дейодирования на фоне увеличения уровня ТТГ в сыворотке крови свидетельствует о приспособительно-компенсаторной реакции организма животных в условиях йодного дефицита, направленной на образование более активного гормона щитовидной железы.

Таблица 1

Влияние экстракта лапчатки белой на уровни тиреоидных гормонов при экспериментальном гипотиреозе у крыс

Группы животных	Показатели
	Масса тела, г	ТТГ, мЕд/л	Т3, пмоль/л	Т4, пмоль/л	Т4/Т3 индекс дейодирования
Интактная (Н2О), (n=10)	180±12	0,03±0,004	1,94±0,15	13,83±1,25	7,12
Контрольная (ги-потиреоз+ Н 2 О), (n=10)	261±11	0,20±0,020	1,65±0,10	7,75±0,68	4,69
Опытная (гипотиреоз + ЭЛБС, 50 мг/кг), n=10	246±09	0,1±0,01*	2,3±0,17*	22,7±1,84*	9,86

* – здесь и далее означает, что различия значимы Р≤0,05; ЭЛБС – экстракт лапчатки белой сухой по сравнению с данными в контрольной группе при

Курсовое введение исследуемого экстракта в дозе 50 мг/кг приводит к повышению Т 4 в 2,9 раза, Т 3 – на 40% и к уменьшению уровня ТТГ на 50% по сравнению с аналогичными показателями в контрольной группе животных. Увеличение же индекса дейодирования у животных второй опытной группы свидетельствует о подавлении периферической конверсии Т₄ в Т_3.

При микроскопическом исследовании гистологических срезов щитовидной железы интактной группы крыс (рис.1) при окраске гематокси-лин-эозином отмечалось типичное фолликулярное строение, видны соединительнотканные перегородки, отделяющие дольки друг от друга. Фолликулы представлены округлой или слегка овальной формы с четкими контурами. Коллоид окрашен в бледно-розовый цвет. Клетки фолликулярного эпителия в основном кубической формы, ядра преимущественно расположены у базальной мембраны тироцитов.

На гистологических срезах щитовидной железы контрольной группы (рис. 2), получавшей мерказолил в течение 28 дней, отмечается морфологическая картина, присущая йодной недостаточности. Вследствие развития гипофункции щитовидной железы усиливается тиреотропная функция гипофиза, под влиянием избытка ТТГ тироциты приходят в состояние функциональной активности. Клетки фолликулярного эпителия набухают, приобретают призматическую или цилиндрическую форму. Тироциты местами в области апикальной мембраны выпячиваются в просвет фолликулов, местами претерпевают митоз, вступают в дифференцировку, и 5-6 клеток, образованные новой базальной мембраной, начинают синтезировать и выделять в межклеточное пространство тиреоглобулин, который в виде коллоида заполняет его, превращая в полость фолликула [2, 13, 14].

Рис. 1. Щитовидная железа интактной крысы. Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение об.10×ок.40 (400)

Рис. 2. Щитовидная железа крысы контрольной группы. Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение об.10×ок.40 (400)

Установлено увеличение числа митозов в ядрах тироцитов. Митозы в основном происхо- дят в клетках экстрафолликулярных островков, которые, как известно, служат резервом для рос- та тиреоидной ткани. Митотический индекс уве-   группой.

личился в 4,8 раза по сравнению с интактной

Влияние экстракта лапчатки белой сухого на морфометрические показатели щитовидной железы при экспериментальном гипотиреозе

Таблица 2

Показатели	Группы животных
	Интактная (Н2О), n=10	Контрольная (гипотиреоз+ Н 2 О), n=10	Опытная (гипотиреоз + ЭЛБС), n=10
Высота тироцита, мкм	21,32 ± 1,050	31,50 ± 12,31	16,65 ± 1,120*
Диаметр фолликула, мкм	157,32 ± 21,430	116,04 ± 9,87	164,69 ± 12,360*
Площадь тироцита, мкм2	20,73 ± 12,320	95,36 ± 13,21	33,51 ± 14,350*
Площадь коллои-да,%V	49,20 ± 3,110	35,40 ± 2,53	42,61 ± 3,140*
Фолликулярноколлоидный индекс (ФКИ), у.е.	0,05 ± 0,002	0,12 ± 0,01	0,04 ± 0,001*
Митотический индекс	0,33 ± 0,020	1,6 ± 0,13	0,89 ± 0,040*

На гистологических срезах щитовидной железы опытной группы крыс, получавших экстракт лапчатки белой в дозе 50 мг/кг (рис. 3), отмечается уменьшение гиперпластических процессов в строме органа, коллоид приобретает более светлую окраску, однородную консистенцию. Средний диаметр фолликулов увеличивается на 42%, высота тироцитов при этом уменьшается на 47% по сравнению с данными показателями в контрольной группе. При этом значительно уменьшается объем тироцита на 65%, отмечается уменьшение пролиферирующих ти-роцитов в строме органа, фолликулы приобретают округлую правильную или овальную форму (табл.2). Эпителий фолликулов приближается к кубическому, средняя высота тироцита уменьшаетася на 47% по сравнению с контролем. Уменьшение митотического индекса в 1,8 раза по сравнению с контролем указывает на уменьшение экстрафолликулярной пролиферации тироцитов.

Рис. 3. Щитовидная железа крысы опытной группы.

Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение об.10×ок.40 (400)

Заключение

Полученные данные позволяют отнести сухой экстракт лапчатки белой к группе малотоксичных веществ по действующей классификации Сидорова. Экспериментально установлено, что экстракт лапчатки белой сухой повышает функциональную активность щитовидной железы крыс в эксперименте. На фоне введения экстракта лапчатки белой в дозе 50 мг/кг уровень ТТГ достигает оптимальных значений, уменьшаясь в два раза. Полученные данные позволяют заключить, что экстракт лапчатки белой оказывает действие преимущественно на уровне щитовидной железы, стимулируя выработку тироксина, при этом практически не влияет на периферическое дейодирование тиреоидных гормонов. Наряду с этим происходит восстановление морфологической структуры щитовидной железы, уменьшаются пролиферативные процессы, высота и площадь тироцита, коллоид приобретает равномерную окраску, фолликулы приобретают правильную округлую форму. Данный эффект проявляется благодаря наличию в составе производных кофейной кислоты, в частности эллаговой, способных связываться с ТТГ [1, 6]. Данный эффект обусловлен также содержанием фенольных соединений, йода и аниона йодистой кислоты [8], микроэлементов (цинк и селен), присутствие которых необходимо для физиологического функционирования тиреоидных гормонов в организме. Таким образом, экстракт лапчатки белой сухой можно от- нести к регуляторам функции щитовидной железы. Это подтверждает, что лапчатка белая является перспективным источником для коррекции дисфункции щитовидной железы.