Токсины микромицетов в генеративных органах растений семейства Fabaceae

Автор: Кононенко Г.П., Буркин А.А.

Журнал: Сельскохозяйственная биология @agrobiology

Рубрика: Микотоксины

Статья в выпуске: 5 т.56, 2021 года.

Бесплатный доступ

При изучении роли ассоциированных микроскопических грибов в адаптации растений к внешним воздействиям внимание исследователей сосредоточено на таких ключевых аспектах, как смещение состава внутренней микобиоты в процессе роста, направленность колонизации грибами вегетативных и генеративных органов, а также сопутствующие изменения в метаболическом статусе организма (J.A. Wearn с соавт., 2012; V. Arbona с соавт ., 2013; J. Hong с соавт . , 2016). У луговых трав семейства Fabaceae изучена динамика накопления ДНК грибов Alternaria , Clado-sporium и Fusarium в разные месяцы сбора растений (О.П. Гаврилова с соавт., 2017; А.С. Орина с соавт . , 2018) и выявлены сезонные колебания в содержании токсичных метаболитов, свойственных этим группам микромицетов (А.А. Буркин, Г.П. Кононенко, 2018, 2019). У клевера лугового, клевера ползучего, козлятника восточного, люпина многолистного и донников установлена преимущественная локализация микотоксинов в листовых пластинках (Г.П. Кононенко с соавт., 2019). В настоящем исследовании нами впервые описаны комплексы токсичных метаболитов несовершенных грибов в генеративных органах бобовых растений. Целью работы стало изучение компонентного состава и содержания микотоксинов в цельных растениях, цветках и плодах многолетних бобовых трав из шести родов семейства Fabaceae . Луговые травы родов Trifolium L. - клевер луговой ( T. pratense L.), клевер гибридный ( T. hybridum L.), клевер средний ( T. medium L.), клевер ползучий ( T. repens L.), Lathyrus L. - чина луговая ( L. pratensis L.), чина весенняя ( L. vernus (L.) Bernh.), Vicia L. - горошек заборный ( V. sepium L.), горошек мышиный ( V. cracca L.), Lotus L. - лядвенец рогатый ( L. corniculatus L. s.l.), Lupinus L. - люпин многолистный ( L. polyphyllus Lindl.) и Galega L. - козлятник восточный ( G. orientalis Lam.) отбирали из естественных травостоев Московской области в мае-первой половине августа 2019 года, горошек лесной ( V. sylvatica L.) и чину японскую ( L. japonicus Willd. subsp. pubescens Korobkov) - во второй половине августа того же года на побережье Кандалакшского залива Белого моря (Республика Карелия). Надземные части растений, а также цветки и бобы выдерживали при комнатной температуре до воздушно-сухого состояния и измельчали в лабораторной мельнице. Для экстракции применяли смесь ацетонитрила и воды в объемном соотношении 84:16 при расходе 10 мл на 1 г навески. Экстракты после 10-кратного разбавления буферным раствором использовали для непрямого конкурентного иммуноферментного анализа. Содержание микотоксинов - Т-2 токсина (Т-2), дезоксиниваленола (ДОН), зеараленона (ЗЕН), фумонизинов (ФУМ), эргоалкалоидов (ЭА), альтернариола (АОЛ), роридина А (РОА), афлатоксина В1 (АВ1), стеригматоцистина (СТЕ), циклопиазоновой кислоты (ЦПК), эмодина (ЭМО), охратоксина А (ОА), цитринина (ЦИТ), микофеноловой кислоты (МФК), PR-токсина (PR) определяли с помощью коммерческих и исследовательских аттестованных иммуноферментных тест-систем (ГОСТ 31653-2012). Для генеративных органов большинства обследованных растений были выявлены как общие черты (сохранение профиля микотоксинов, типичного для целого растения, при отсутствии или снижении содержания ряда грибных метаболитов), так и особенности. В частности, в цветках трех видов рода Trifolium L. в целом сохранялся комплекс микотоксинов, свойственный вегетативной части, но при этом встречаемость и накопление фузариотоксинов были выше. Для цветков двух видов - клевера гибридного и клевера среднего была характерна сочетанная контаминация ОА и ЦИТ в сопоставимых количествах, редкая для растений. При общей низкой контаминации у лядвенца рогатого фузариотоксины Т-2, ДОН и ЗЕН присутствовали только в генеративных органах. У всех представителей родов Vicia , Lathyrus , Lupinus и Galega метаболический фон в цветках в целом был оценен как ослабленный, в бобах он оказался сходным с надземной частью без отчетливых признаков смены компонентного состава и резкого варьирования содержания микотоксинов.

Еще

Бобовые травы, цветки, бобы, микотоксины, иммуноферментный анализ

Короткий адрес: https://sciup.org/142231394

IDR: 142231394   |   УДК: 582.736:632.4:636.085.19   |   DOI: 10.15389/agrobiology.2021.5.968rus

Toxins of micromycetes in generative organs of plants of the family Fabaceae

During the study of the role of associated microscopic fungi in the adaptation of plants to external influences, researchers focus mainly on such key aspects as i) the shift in the composition of the internal mycobiota during growth, ii) the direction of fungal colonization of vegetative and generative organs, and iii) concomitant changes in the metabolic status of the plant organism (J.A., Wearn et al., 2012; V. Arbona et al., 2013; J. Hong et al., 2016). The dynamics of DNA accumulation of Alternaria , Cladosporium and Fusarium fungi in different months of plant growth was revealed in meadow grasses of the Fabaceae family (O.P. Gavrilova et al., 2017; A.S. Orina et al., 2018) and seasonal fluctuations in the content of toxic metabolites characteristic of these groups of micromycetes were found (A.A. Burkin, G.P. Kononenko, 2018, 2019). The predominant localization of mycotoxins in leaves was established for meadow clover, white clover, Caucasian goat’s rue, Washington lupine and melilot (G.P. Kononenko et al., 2019). In this study, we describe for the first time the complexes of toxic fungi metabolites in the generative organs of legumes. The aim of the work was to study the component composition and content of mycotoxins in the whole plants, flowers and beans of perennial legumes of 6 genera of the Fabaceae family. Meadow grasses of the genera Trifolium L. - meadow clover ( T. pratense L.), alsike clover ( T. hybridum L.), zigzag clover ( T. medium L.), white clover ( T. repens L.); of Lathyrus L. - meadow peavine ( L. pratensis L.), spring peavine ( L. vernus (L.) Bernh.); of Vicia L. - bush vetch ( V. sepium L.), cow vetch ( V. cracca L.); of Lotus L. - deer vetch ( L. corniculatus L. s.l.); of Lupinus L. -Washington lupine ( L. polyphyllus Lindl.), and of Galega L. - Caucasian goat’s rue ( G. orientalis Lam.) were collected from natural grass stands of the Moscow region in May-the first half of August 2019, wood vetch ( V. sylvatica L.) and Japanese peavine ( L. japonicus Willd. subsp. pubescens Korobkov) - in the second half of August of the same year on of the Kandalaksha Gulf of the White Sea (Republic of Karelia). The aboveground parts of plants, as well as flowers and beans, were kept at room temperature to an air-dry state and crushed in a laboratory mill. For extraction, a mixture of acetonitrile and water was used (84:16 v/v) at the ratio of 10 ml per 1 g of the sample. Extracts after 10-fold dilution with a buffer solution were assessed using indirect competitive enzyme immunoassay. The content of the mycotoxins - T-2 toxin (T-2), deoxynivalenol (DON), zearalenone (ZEN), fumonisins (FUM), ergot alkaloids (EA), alternariol (AOL), roridin A (ROA), aflatoxin B1 (AB1), sterigmatocystin (STE), cyclopiazonic acid (CPC), emodin (EMO), ochratoxin A (OA), citrinin (CIT), mycophenolic acid (IFC), PR-toxin (PR) was determined using commercial and research certified enzyme immunoassay systems (GOST 31653-2012). For the generative organs of most of the examined plants, both common features (preservation of the mycotoxin profile typical of the whole plant, with the absence or decrease in the content of a number of fungal metabolites) and peculiarities were revealed. In particular, in the flowers of three species of the genus Trifolium L., in general, the mycotoxin complex characteristic of the vegetative part was preserved, but the occurrence and accumulation of fusariotoxins were higher. The flowers of two species - alsike clover and zigzag clover were characterized by combined contamination of OA and CIT in comparable quantities, rare for plants. With a general low contamination, fusariotoxins T-2, DON and ZEN were present only in generative organs in the deer vetch. In all representatives of the genera Vicia , Lathyrus , Lupinus , and Galega the metabolic background in flowers as a whole was found weakened, in beans it turned out to be similar to the aboveground part without a sharp variation in the content of mycotoxins.

Еще

Список литературы Токсины микромицетов в генеративных органах растений семейства Fabaceae

  • Saikkonen K., Faeth S.H., Helander M., Sullivan T.J. Fungal endophytes: a continuum of interactions with host plants. Annual Review of Ecology and Systematics, 2003, 29(1): 319-343 (doi: 10.1146/annurev.ecolsys.29.1.319).
  • Rodriguez R.J., White J.F.Jr., Arnold A.E., Redman R.S. Fungal endophytes: diversity and functional roles. New Phytologist, 2009, 182(2): 314-330 (doi: 10.1111/j.1469-8137.2009.02773.x).
  • Card S.D., Faville M.J., Simpson W.R., Johnson R.D., Voisey C.R., de Bonth A.C.M., Hume D.E. Mutualistic fungal endophytes in the Triticeae — survey and description. FEMS Microbiology Ecology, 2014, 88(1): 94-106 (doi: 10.1111/1574-6941.12273).
  • Potshangbam M., Devi S.I., Sahoo D., Strobel G.A. Functional characterization of endophytic fungal community associated with Oryza sativa L. and Zea mays L. Frontiers in Microbiology, 2017, 8: 325 (doi: 10.3389/fmicb.2017.00325).
  • Sánchez Márquez S., Bills G.F., Zabalgogeazcoa I. The endophytic mycobiota of the grass Dactylis glomerata. Fungal Diversity, 2007, 27: 171-195.
  • Wearn J.A., Sutton B.C., Morley N.J., Gange A.C. Species and organ specificity of fungal endophytes in herbaceous grassland plants. Journal of Ecology, 2012, 100(5): 1085-1092 (doi: 10.1111/j.1365-2745.2012.01997.x).
  • Hodgson S., Cates C., Hodgson J., Morley N.J., Sutton B.C., Gange A.C. Vertical transmission of fungal endophytes is widespread in forbs. Ecology and Evolution, 2014, 4(8): 1199-1208 (doi: 10.1002/ece3.953).
  • Kusari S., Spiteller M. Metabolomics of endophytic fungi producing associated plant secondary metabolites: progress, challenges and opportunities. In: Metabolomics /U. Roessner (ed.). In Tech, London, 2012 (doi: 10.5772/31596).
  • Arbona V., Manzi M., de Ollas C., Gómez-Cadenas A. Metabolomics as a tool to investigate abiotic stress tolerance in plants. International Journal of Molecular Sciences, 2013, 14(3): 4885-4911 (doi: 10.3390/ijms14034885).
  • Hong J., Yang L., Zhang D., Shi J. Plant metabolomics: an indispensable system biology tool for plant science. International Journal of Molecular Sciences, 2016, 17(6): 767 (doi: 10.3390/ijms17060767).
  • Гаврилова О.П., Орина А.С., Гагкаева Т.Ю. Количественная оценка зараженности видов рода Trifolium грибами и контаминации микотоксинами. Агрохимия, 2017, 11: 58-66 (doi: 10.7868/S0002188117110072).
  • Орина А.С., Гаврилова О.П., Гагкаева Т.Ю. Выявление зараженности грибами однолетних и многолетних трав семейства Leguminosae методом количественной ПЦР. Вестник защиты растений, 2018, 2(96): 35-41.
  • Кононенко Г.П., Буркин А.А.Вторичные метаболиты микромицетов в растениях семейства Fabaceae рода Trifolium. Известия Российской академии наук. Серия биологическая, 2018, 2: 150-157 (doi: 10.7868/S0002332918020030).
  • Буркин А.А., Кононенко Г.П. Вторичные метаболиты микромицетов в растениях семейства Fabaceae родов Galega, Glycyrrhiza, Lupinus, Medicago, Melilotus. Известия Российской академии наук. Серия биологическая, 2018, 3: 267-274 (doi: 10.7868/S0002332918030037).
  • Кононенко Г.П., Буркин А.А. Вторичные метаболиты микромицетов в растениях семейства Fabaceae родов Lathyrus, Vicia. Известия Российской академии наук. Серия биологическая, 2019, 3: 229-235 (doi: 10.1134/S0002332919030044).
  • Бобушева С.Т., Доолоткельдиева Т.Д. Эндофитные грибы-симбионты высших растений различных экосистем Кыргызстана. FenBilimleriDergisi (JournalofNaturalScience), 2008, 9: 1-8.
  • Кононенко Г.П., Зотова Е.В., Устюжанина М.И.Распределение микотоксинов по органам у бобовых и крестоцветных растений. В сб.: Успехи медицинской микологии. М., 2019, 20: 649-653.
  • Губанов И.А., Киселева К.В., Новиков В.С., Тихомиров В.Н. Иллюстрированный определитель растений Средней России. Том 2. М., 2003.
  • Скворцов В.Э. Иллюстрированное руководство для ботанических практик и экскурсий в Средней России. М., 2004.
  • Inch S., Gilbert J. The incidence of Fusarium species recovered from inflorescences of wild grasses in southern Mannitoba. Canadian Journal of Plant Pathology,2003, 25(4): 379-383 doi: 10.1080/07060660309507093).
  • Harrow S.A., Farrokhi-Nejad R., Pitman A.R., Scott I.A.W., Bentley A., Hide C., Cromey M.G. Characterization of New Zealand Fusarium populations using a polyphasic approach differentiates the F. avenaceum/F. acuminatum/F. tricinctum species complex in cereal and grassland systems. Fungal Biology, 2010, 114(4): 293-311 (doi: 10.1016/j.funbio.2010.01.005).
  • Postic J., Cosic J., Vrandecic K., Jurkovic D., Salch A.A., Leslie J.F. Diversity of Fusarium species isolated from weeds and plant debris in Croatia. Journal of Phytopathology, 2012, 160(2): 76-81 (doi: 10.1111/j.1439-0434.2011.01863.x).
  • Lofgren L.A., LeBlanc N.R., Certano A.K., Nachtigall J., LaBine K.M., Riddle J., Broz K., Dong Y., Bethan B., Kafer C.W., Kistler H.C. Fusarium graminearum: pathogen or endophyte of North American grasses? New Phytologist, 2017, 217(3): 1203-1212 (doi: 10.1111/nph.14894).
  • Буркин А.А., Кононенко Г.П. Вторичные метаболиты грибов (микотоксины) в лишайниках разной таксономической принадлежности. Известия Российской академии наук. Серия биологическая, 2014, 3: 228-235.
  • Kononenko G.P., Burkin A.A. Peculiarities of feed contamination with citrinin and ochratoxin A. Agricultural Sciences, 2013, 4(1): 34-38 (doi: 10.4236/as.2013.41006).
  • Wawrzyniak J., Waskiewicz A. Ochratoxin A and citrinin production by Penicillium verrucosum on cereal solid substrates. Food Additives and Contaminants, Part A,2014, 31(1): 139-148 (doi: 10.1080/19440049.2013.861933).
  • Schmidt-Heydt M., Stoll D., Schütz P., Geisen R. Oxidative stress induces the biosynthesis of citrinin by Penicillium verrucosum at the expanse of ochratoxin. International Journal of Food Microbiology, 2015, 192: 1-6 (doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2014.09.008).
  • Geisen R., Schmidt-Heydt M., Touhami N., Himmelsbach A. New aspects of ochratoxin A and citrinin biosynthesis in Penicillium. Current Opinion in Food Science, 2018, 23: 23-31 (doi: 10.1016/j.cofs.2018.04.001).
  • Larsen T.O., Svendsen A., Smedsgaard J. Biochemical characterization of ochratoxin A-producing strains of the genus Penicillium. Applied and Environmental Microbiology, 2001, 67(8): 3630-3635 (doi: 10.1128/AEM.67.8.3630-3635.2001).
  • Буркин А.А., Кононенко Г.П., Мосина Л.В. Первое микотоксикологическое исследование горчицы белой (SinapisalbaL.). Сельскохозяйственная биология, 2019, 54(1): 186-194 (doi: 10.15389/agrobiology.2019.1.186rus).
  • Moretti A., Logrieco A.F., Susca A. Mycotoxins: an underhand food problem. In: Mycotoxigenic Fungi. Methods and Protocols /A. Moretti, A. Susca (eds.). Humana Press, New York, NY, 2017: 3-12 (doi: 10.1007/978-1-4939-6707-0).
  • Ali H., Ries M.I., Nijland J.G., Lankhorst P.P., Hankemeier T., Bovenberg R.A.L., Vreeken R.J., Driessen A.J.M. A branched biosynthetic pathway is involved in production of roquefortine and related compounds in Penicillium chrysogenum. PLoS One, 2013, 8(6): e65328 (doi: 10.1371/journal.pone.0065328).
  • Santana M.F., Queiroz M.V.Transposable elements in fingi: A genomic approach. Scientific Journal of Genetics and Gene Therapy, 2015, 1(1): 012-016.
  • Благовещенская Е.Ю. Эндофит-растение как сложная динамическая система. В сб.: Микология сегодня /Под ред. Ю.Т. Дьякова, А.Ю. Сергеева. М., 2011, 2: 126-134.
  • van Kan J.A.L., Shaw M.W., Grant-Downton R.T. Botrytis species: relentless necrotropic thugs or endophytes gone roque? Molecular Plant Pathology, 2014, 15(9): 957-961 (doi: 10.1111/mpp.12148).
  • Busby P.E., Ridout M., Newcombe G.Fungal endophytes: modifiers of plant disease. Plant Molecular Biology, 2016, 90(6): 645-655 (doi: 10.1007/s11103-015-0412-0).
  • Harrison J.G., Griffin E.A. The diversity and distribution of endophytes across biomes, plant phylogeny and host tissues: how far have we come and where do we go from here? Environmental Microbiology, 2020, 22(6): 2107-2123 (doi: 10.1111/1462-2920.14968).
  • Vorob’eva I., Toropova E. Fungi ecological niches of the genus Fusarium Link. Bio Web of Conferences, 2020, 24: 00095 (doi: 10.1051/bioconf/20202400095).
  • Орина А.С., Гаврилова О.П., Гагкаева Т.Ю. Колонизация культурных и дикорастущих злаковых растений грибами родов Alternaria, Cladosporium и Fusarium. Защита и карантин растений, 2017, 3: 25-27.
  • Чуб В.В. Физиология растений. Глава 7. Рост и развитие растений. 2003. Режим доступа: https://web.archive.org/web/20070120092003/http://herba.msu.ru/russian/departments/physiology/spezkursi/chub/index_7.html. Без даты.
Еще