Участие пептидов в регуляции сократительной активности лимфатических сосудов теплокровных



Оптимальные значения коэффициента здоровья (тренированности сердечной системы) в средних классах наблюдаются у 86%, в старших классах преобладает средний уровень коэффициента здоровья у 98,4%. .

Артериальная гипертензия в средних классах обнаружена у 2,8% , в старших классах у 3,2%.

В то же время отягощенная наследственность по сердечно-сосудистым заболеваниям отмечена, по данным анкетирования родителей, от 80 до 77,4%, поэтому профилактика сердечно-сосудистых заболеваний важна и ее необходимо проводить с начальных классов.

Таким образом, в ходе проведенных работ отмечены нарушения функционального состояния основных физиологических параметров школьников разных возрастных групп, что делает необходимым формирование устойчивой мотивации школьников на здоровье, здоровый образ жизни и оздоровление. Знание учителем паспорта здоровья школьника, факторов риска здоровья, дефектов развития помогут ему совместно с родителями, медицинскими работниками, психологами проводить целенаправленные оздоровительные мероприятия.                  , ........     ... .....        .     ,

.                    ■               .'.<;А'.Г' Г^'Т ф ч. -.-:

Л.Ц. Санжиева, Т.В. Лелекова* ■ f 1 ; ч . ? ;. -

‘ в                 Бурятский государственный университет              '         ••?/?.

* ^ ' *-'л Ь№ Московский государственный университет им *М, В. Ломоносова

УЧАСТИЕ ПЕПТИДОВ В РЕГУЛЯЦИИ СОКРАТИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЛИМФАТИЧЕСКИХ СОСУДОВ ТЕПЛОКРОВНЫХ

Регуляторные пептиды принимают участие в регуляции активности лимфатических сосудов, оказывая существенное модулирующее влияние на лимфоток. Они обладают необычайной чувствительностью к вазоактивным и особенно пептидным регуляторам по сравнению с реактивностью кровеносных сосудов, Это позволяет использовать для достижения физиологического ответа лимфососудое значительно меньшие концентрации регуляторных пептидов, не затрагивая другие системы. Бифазность действия многих регуляторных пептидов свидетельствует о том, что в зависимости от конкретных условий функционирования один и тот же пептид может усилить или ослабитьлимфоток.               ..   ......         . .         . .                  , ;.. •

. ? - ■ ••• -г.-               'Ч^1' . .V ---ч Й??'; 1 > ::,,,:;■ ■ . :     Фк,я !' ■ ' . .■ <

. .< ■ - : ■,; • чй> WN^ ^       ^^ Sa/tjieva, Г. И Lelekova                 да/.^ ■ - .. ~

' - PARTICIPATION PEPTIDES IN REGULATION CONTRACTIVE ACTIVITY -

. OF LYMPHATIC VESSELS WARM-BLOODED . . :       .....

■- .••• ■: >'.-v\ Vas’14».№                                                                                                         ■ ' •••'■'•      ¹           '          '

Regulative peptides take part in regulation of activity of lymphatic vessels, making essential modelling impact on lymph flow. They possess extraordinary sensitivity to vasoactive and especially peptide to regulators in comparison with reactance of blood vessels. It allows to use for achievement of the physiological answer lymphovessel considerably smaller concentration regulative peptides, not mentioning other systems. Bi-phase actions of many regulative peptides testifies that depending on concrete conditions of functioning same peptides can strengthen or weaken lymph flow.

Регуляторные пептиды объединяют иммунную, нервную и эндокринную системы в единое гармоничное целое. Открыли их относительно недавно и до настоящего времени активно исследуют. Перестали вызывать удивления факты сосуществования различных РП с классическими нейромедиаторами и друг с другом в одном нервном окончании; стало очевидным наличие в головном мозге мест синтеза большинства (если не всех) РП, представленных в любой сфере организма [3]. Эти небольшие белковые молекулы, состоящие из аминокислотных остатков, вырабатываются практически во всех органах. В одних случаях они выделяются из синаптического окончания и действуют на одну постсинапти ческую клетку, выполняя функцию медиатора; а в других - оказывают влияние на небольшое чило клеток, окружающих родительскую молекулу и служат модуляторами, в третьих - с током крови достигают отдаленных участков организма и работают как гармоны. Интересно, что один и тот же пептид может выступать во всех трех ролях. Область биологической активности пептидов чрезвычайно широка. Нами в течение 15 лет на кафедре физиологии человека и животных МГУ исследовалась пептидная регуляция сократительной активности лимфатических сосудов.

К настоящему времени установлено, что лимфангионы (часть лимфатического сосуда до следующего клапана) имеют высокоорга- низованные слои эндотелиальных и гладкомышечных «легок. Спонтанная сократительная активность лимфангионов инициируется потенциалами действия, возникающими в гладкомышечных клетках. Активно изучаются ионные механизмы возникновения потенциалов действия. Фазы сокращений лимфангиома сходны с таковыми у сердечной мышцы, но имеют целый ряд специфических внутренних механизмов регуляции, в частности. зависящих от степени растяжения мембраны и функций эндотелия. Лимфангиомы имеют сложную систему нейрогуморального контроля фазной сократительной активности и изменения базального тонуса, модулируя насосную функцию [12,13]. Однако многие механизмы, связанные с осуществлением транспортной функции лимфангионов, являются частично или полностью нераскрытыми. К ним относится пептидная регуляция сократимости лимфатических сосудов. В течение последних лет нами осуществляется планомерное изучение влияния пептидов на сократимость лимфатических сосудов брыжейки белой крысы в условиях прижизненного микроскопирования. В настоящей работе мы попытались обобщить накопленные в литературе и собственные данные по этой проблеме.

Энкефалины

Первые исследования на интактных животных в условиях in vivo проведены В.К. Ху-гаевой при исследовании влияния лей-энкефалина па лимфатические сосуды брыжейки кишечника крысы [20]. Аппликация лей-энкефалина (1.8 -10"-1,8*10'4 М) вызывала учащение спонтанных сокращений лимфатических микрососудов. Это послужило толчком для дальнейших исследований автора по изучению действия опиоидных пептидов -лей-энкефалина, его тирозинсодержащего аналога и даларгина, а также р-казеина и некоторых аминокислот на сократительную активность лимфатических сосудов брыжейки крыс [17,21,22]. Кроме того, проведены исследования по изучению роли концевых аминокислот в физиологической активности опиоидных пептидов. В результате этих исследований авторами предполагается наличие опиоидной регуляции и опиоидных рецепторов в мезентериальных лимфатических сосудах [18,19]. Р.Т. Панченков и соавторы в 1986 г. также обнаружили лимфостимулирующий эффект синтетического пептида опиоидной природы в дозе 0,1-0,7 ш/кг [14]. М.Д.Звсрев на изолированных лимфангиомах брыжейки быка изучал электрическую и сократительную активность лимфатических сосудов при действии энкефалинов [6]. Было показано, что лей- и мет-энкефалины могут модулировать сократительную деятельность миоцитов лимфатических сосудов брыжейки быка. Лей-энкефалин в концентрации L84 О7- 1,8*10^ М и метэнкефалин в концентрации 1,7- КУ6 -1,7*10‘5 М стимулировали сократительную активность миоцитов лимфатических сосудов, а более высокая концентрация лей-энкефалина 1,8*1 О ' М вызывала прекращение спонтанной активности лимфатических сосудов. При этом механизм действия энкефалинов на лимфатические сосуды не изучался. но сделано предположение, что он осуществляется при участии циклических нуклеотидов, а также ионов Са2'.

Брадикинин

Также в условиях in vitro изучено влияние брадикинина на миоциты лимфатических сосудов |27]. Характерным действием брадикинина при увеличении концентрации в диапазоне 10‘И1 - 106 М было возрастание тонических сокращений лимфатических сосудов. При удалении из среды кальция или добавлении в среду блокатора кальциевых каналов Д600 (10"4 М) сокращений лимфатических сосудов в присутствии брадикинина (4*10"9 И) не наблюдалось, тогда как при действии брадикинина в концентрации 10 ° М в обоих случаях активность лимфатических сосудов сохранялась более чем на 50%. В среде без Са" добавление активаторов Р-рецепторов повышало частоту сокращений лимфатического сосуда, индуцируемую брадикинином (I О"6 М), в то время как в среде с 1 мМ ЭГТА та же концентрация брадикинина индуцировала только слабое сокращение лимфатического сосуда. Сделан вывод, что индуцируемое брадикинином сокращение лимфатических сосудов связано с увеличением входа Са через плазматическую мембрану и высвобождения Са2" из внутриклеточных пулов. Такая низкая концентрация, как КУ11 М, вызывала ритмические сокращения в спонтанно неактивных препаратах или увеличивала частоту сокращений в активных препаратах. Подобное влияние брадикинина на тонические сокращения наблюдал M.GJohnston [36]. Кроме того, брадикинин увеличивал перфузионное сопротивление в изолированных сегментах [471. Тем не менее на грудном протоке собаки методом двойной канюли эффект брадикини- на на лимфоток не был обнаружен [44]. С другой стороны, убедительно показано, что локальная внутриартериальная инфузия брадикинина сильно стимулирует лимфоток в лапе собаки с последующим возрастанием проницаемости капилляров и возникновением отека [24]. Подобные данные содержит работа И.С. Коулбаева, Б.И. Ткаченко и Н.В. Костюшиной [37]. В экспериментах на тонкой кишке кошки с сохраненной иннервацией брадикинин, введенный внутриартериально, приводил к увеличению транскапиллярного кровообращения и лимфотока за счет увеличения гидростатического давления в капиллярах и возрастания коэффициента фильтрации. Данные о влиянии брадикинина на проницаемость не только кровеносных капилляров, но и лимфатических содержатся в работах Игнатьевой и соавторов [7] и G.P. Pessina и со-авт. [41]. Следует обратить особое внимание на величину минимальной эффективной концентрации брадикинина, использованной в первой работе - 10"16 М. Локально апплициро-ванный на инициальные сосуды крыла летучей мыши брадикинин вызывал увеличение частоты и длительности сокращений, в то время как катехоламины, гистамин и серотонин не оказывали эффекта [48]. S. Yokoyama и J.N. Benoit [50] исследовали действие брадикинина на кишечный проток наркотизированной крысы с помощью техники прижизненого биомикроскопирования. Регистрировался диаметр лимфатического протока (конечный систолический и диастолический), частота сокращений и др. показатели. Брадикинин в концентрации 0.1 - 10 нМ увеличивал частоту' сокращений и индекс скорости насосной функции в дозозависимой манере. Антагонист Bi- рецепторов Оез-Аг§9-[Теи8]-брадикинин (0.1 микроМ) не оказывал эффекта на насосную функцию, но полностью подавлял эффект брадикинина на сократительную активность лимфатического сосуда. Антагонист В2-рецепторов N-acetil-D-Arg-[Hyp3,Thi5,8 D-Phe7] (ОЛмикроМ) значительно угнетал исходную сократительную активность лимфатического сосуда, но не оказывал влияния на эффект брадикинина. Из этих экспериментов следует, что брадикинин оказывает положительный хронотропный, но не инотропный эффект на сократительную активность кишечного лимфопротока, стимулируя В(-рецепторы. В наших экспериментах брадикинин и его аналог (P-P-G-F-S-R) в концентрациях 1O'18-1O'20 М вызывал эффекты дилата ции до 50%, а также увеличение частоты сокращений и амплитуды до 55% от исходного. Таким образом, были зарегистрированы положительные как инотропные, так и хронотропные реакции [2].

Вазоактивный кишечный пептид (ВИП).

Лимфатические сосуды брыжейки быка расслабляются при приложении ВИП (610’9М - порог, максимальный эффект - 3-10 7 М) [39]. Релаксирующий эффект ВИП не модифицировался атропином, пропранололом, бретили-ем и тетродотоксином. Авторы высказали предположение, что ВИП является ингибирующим медиатором по отношению к гладкомышечным клеткам лимфатических сосудов.

Окситоцин, пролактин, вазопрессин

Исследование действия окситоцина и пролактина на лимфатические сосуды молочной железы козы проведено Т.А. Лобачевой [11]. Окситоцин (5-10"6- 5-1 О’4 Ед/мл) урежал частоту сокращений, увеличивал амплитуду и вызывал значительное увеличение тонуса. По мере возрастания концентрации окситоцина усиливались и тонические сокращения. Пролактин в концентрации 5-Ю"6- 510"4 Ед/мл учащал ритм и уменьшал величину фазных сокращений. Мы также исследовали влияние группы нанопептидов: окситоцина и четырех фрагментов вазопрессина - аргинил-вазопрессина, лизил-вазопрессина, дезамино-D-аргинил-вазопрессина и дезглициламид-аргинил-вазопрессина - на сократительную активность лимфатических сосудов брыжейки в прижизненных условиях [1].

Окситоцин оказывал умеренное стимулирующее действие в диапазоне концентраций от МО"9 до МО"7 М при поверхностной аппликации на сосуды брыжейки белой крысы и после внутривенного введения в дозах от Ы0" 10 до МО"4 г/кг. Окситоцин в концентрации выше 10"7 М при аппликации на сосуды брыжейки вызывал изменение проницаемости кровеносных сосудов и замедление скорости кровотока. Спонтанная активность лимфатических сосудов также угнеталась при этих концентрациях. Таким образом, окситоцин в испытанных концентрациях вызывал сокращения спонтанно неактивных лимфатических сосудов и увеличивал частоту и амплитуду сокращений. После внутривенного введения увеличивалась длительность эффекта, наблюдался прирост амплитуды и частоты колебательных движений стенки сосуда. .-..., .

Аргинил-вазопрессин оказывал кратковременное действие, стимулируя сократимость сосудов в диапазоне концентраций от 1-10'9 до 1-10'7 М, а после внутривенного введения - в дозах от МО"9 до МО"5 г/кг. Частота и амплитуда возрастали при аппликации на 20±5 и 25±6% соответственно. Длительность эффекта составила в среднем 16,7±7,0 мин. Аргинил-вазопрессин в концентрации 10"6 М - 10"4 М угнетал спонтанную активность. После внутривенного введения возрастала длительность эффекта (до 40±12 мин) и частота сокращений сосуда (на 24±6% в мин), вместе с тем возрастал и латентный период - 7 минут. Аналогичным действием обладали и аналоги вазопрессина. Для лизил-вазопрессина диапазон действующих концентраций составил от 10"’° до 10' М - при аппликации и от 10*9 до 10*5 г/кг после внутривенного введения, для дезглици-ламид-аргинил-вазопрессина - от 10"10 до 10"5 М и от 10"10 до 10"5 г/кг, соответственно и, наконец, для дезамино-О-аргинил-вазопрессина - I0*13 до 10"^ М и 10"1! до 10"6 г/кг. Как видно, наиболее эффективным из пептидов этой группы (по минимальной действующей концентрации) был дезамино-О-аргинил-вазопрессин. Более выражены эффекты этих пептидов при внутривенном введении.

Вещество Р, бомбезин, CGRP

N.L.Foy и соавт, [32] удалось обнаружить в спиртовом экстракте из брыжеечных лимфатических сосудов радиоиммунным методом вещество Р и гастриносвобождающий пептид. Синтетическое вещество Р (10’’- 10"7 М) и натуральный аналог гастриносвобождающего пептида бомбезин (10’9- 10"7 М) повышали частоту спонтанных сокращений изолированных сегментов брыжеечных сосудов. Этот возбуждающий эффект вещества Р и бомбе-зина не блокировался сс-адреноблокатором фентоламином (3-10’4 М). В более поздней работе G. Sacchi и соавт. [45] гистохимически обнаружили в эндотелии лимфатических сосудов брыжейки быка нервные волокна, содержащие вещество Р (субстанция Р) и ССКР(пептид, связанный с геном кальцитонина). Авторы предположили, что эти нервные окончания выполняют роль неких механорецепторов, определяющих величину интрамурального давления и изменение напряжения стенки сосуда, локально высвобождая вещество Р и CGRP. Используя иммуногистохимический метод, S. Ichikawa и соавт. [1] изучали распределение пептидергических нервных волокон в пейеровых бляшках кишки кошки и также обнаружили в этой лимфоидной ткани вещество Р, CGRP и ВИП. D.C.Zawieja [51 ] полагал, что вещество Р, являясь медиатором воспаления, вызывает образование вазоактивных метаболитов, приводящих к возникновению отека. S.E.Rayner и D.F.Van Heiden [42], изучая действие вещества Р на лимфатические сосуды брыжейки морской свинки, показали, что вещество Р в концентрации i нМ значительно увеличивает частоту сокращений сосудов, а наибольшая из исследованных концентраций (1 микроМ) приводит к угнетению активности. Подобные результаты на сосудах брыжейки белых крыс получены в наших исследованиях при действии вещества Р. Многие из исследованных нами пептидов обнаруживают также эффекты противоположной направленности в зависимости от диапазона действующей концентрации [2,8]. Исследуя механизмы действия вещества Р, авторы пришли к заключению, что вещество Р влияет на метаболизм арахидоновой кислоты, высвобождая из эндотелиальных клеток тромбоксан А2[42]. ,

ANP (Атрпо-яатрийуретнческий пептид)

Т. Ohhashi и соавт. [40] изучали действие ANP на изолированные сегменты лимфатического сосуда брыжейки быка в изометрических условиях. ANP в концентрациях 530 нг/мл вызывал дозозависимое уменьшение частоты и амплитуды спонтанных сокращений. Учащение сокращений не наблюдалось. АМР в концентрациях 3-100 нг/мл приводил к дозозависимому расслаблению в препаратах, предварительно обработанных брадикинином (10‘7 М). ANP-вызванное расслабление не изменялось после предварительной инкубации с пропранололом, атропином, циметидином, аспирином и оуабаином. Деэндотелизация также не влияла на расслабление, однако метиленовый синий значительно его ингибировал. Таким образом, ANP угнетает сократительную функцию и транспорт лимфы, вызывая мышечную релаксацию, активируя синтез цГМФ по механизму, не связанному с эндотелием. Эффект снижения насосной функции изолированного лимфатического сосуда быка, канюлированного с обеих сторон при перфузии его раствором ANP (атриального натрийуретического пептида) при постоянном давлении, получен Atchison D.J. и Jhonston M.G. [25]. Использовались 0.1 , 1.0, 10 и 100 нМ пептида. Скорость лимфотока измеряли каждые 10 минут в течение часа. Авторы полага- ют, что наблюдаемый эффект является частью гемодинамического действия ANP.

Интерлейкин

Не обойден вниманием лимфологов интерлейкин, известный воздействием на иммунитет. Как оказалось, рекомбинантные человеческие интерлейкины-1 - (IO*7- 10"9 М) и интерлейкин-2 (10"8 М) обладали мощным ингибирующим эффектом насосной функции сегмента бычьего лимфатического сосуда [34]. Известно, что один из биологических эффектов интерлейкина-1 - индукция синтеза простагландинов. Исходя из этого, авторы считают, что возможно аддитивное действие интерлейкина -1 и простагландина Е2 в области воспаления. Работа выполнена на брыжеечных сосудах быка. Действие простагландина Е2 и интерлейкина-1 изучали методом перфузии с использованием двойной канюли. Оба вещества, каждое в отдельности или в комбинации, угнетали насосную функцию сосуда в концентрациях 10‘9-10"8 М, что, по мнению авторов должно быть важным при воспалении и угрозе возникновения отека.

Нами был исследован более широкий диапазон концентраций интерлейкина-1 и выявлен его модулирующий эффект. Так, при концентрациях 10 - 10"9 М он оказывал угнетающее действие на сократительную активность лимфатических сосудов брыжейки белой крысы, а при концентрациях 10'10-10"12 М - стимулирующее [9].

Эндотелии ■

Среди огромного множества работ, посвященных физиологическим эффектам эндоте-лина (ЕТ) на кровеносные сосуды, известны единичные работы на лимфатических сосудах. Например, работа, в которой изучалось констрикторное действие эндотелина на лимфатические сосуды брыжейки крыс [31]. Следует отметить, что минимальные эффективные концентрации эндотелина были очень низкими (10"13- 10"15 М) даже для такого рода биорегуляторов, как пептиды. Те же эффекты, не зависящие от фентоламина, сопровождающиеся дозозависимым увеличением перфузионного давления получили D.E. Dobbins и J.M. Dabney [28]. Они использовали более высокие действующие концентрации: КГ7- 10"8-10 е М. Reeder и Ferguson [43] в обширной работе, посвященной роли эндотелина в функционировании лимфатических сосудов, выполнена на колечке трахеобронхиального сосуда свиньи. Эндотелии в концентрациях КУ11 - КГ6 М вызывал тоническое сокращение с максимумом при КГ7 М. Селективные антагонисты ЕТ(а) BQ-610 ЕТ(В) BQ-788 блокировали сократительный ответ на эндотелин-1 (ЕТ-I). Удаление эндотелия приводило к его возрастанию, а ингибирование синтеза NO при этом было неэффективно, что подразумевает участие других эндотелий - зависимых агентов. Авторы считают возможным участие эндотелина в регуляции тонуса лимфатических сосудов. Н. Sakai и соавт. [46] исследовали действие эвдотелина-1 на сокращение препаратов колечка, выделенных из изолированных бычьих брыжеечных лимфатических сосудов. Эндотелии в концентрациях 10'19 и 10"9 М увеличивал частоту сокращений. Антагонист эндотелин-1-рецептора BQ-123 (5-10"7 М) значительно ингибировал ЕТ-1 -вызванный положительный хронотропный эффект в препаратах с и без эндотелия. Механическое удаление эндотелия привело к значительному потенцированию ЕТ-вызванного положительного хронотропного эффекта. BQ-3020 (10'8-КГ7 М), селективный агонист ЕТ<В)-рецептора, вызывал дозозависимое ингибирование хронотропного и инотропного эффектов на сокращении кольцевых препаратов с неповрежденным эндотелием. Механическое удаление эндотелия вызывало значительное ингибирование вызванных BQ-3020 эффектов. ЕТ-1-вызванный положительный хронотропный эффект усиливался после предварительной инкубации с L-NAME (105 М), но не снимался аспирином (10*5 М). Дополнительная обработка L-аргинином (10"4 М) полностью реверсировала L-NAME-вызванное изменение частоты сокращений при действии эндотелина. Эти результаты свидетельствуют, что стимуляция ЕТ(А)-рецепторов на гладких мышцах лимфатических сосудов обусловливают положительный хронотропный эффект на сокращения, а стимуляция ЕТ(в)-рецепторов на эндотелии лимфатических сосудов приводит к выбросу окиси азота, которая вызывает хронотропные и инотропные эффекты сокращений кольцевых препаратов изолированных лимфатических сосудов брыжейки быка. По нашим данным, эндотелин-1 вызывал в минимальной действующей концентрации (10 м М) сильный констрикторный эффект — 75 % от исходного тонуса, увеличение частоты сокращений и изменение диаметра систолического и диастолического сокращения до 25% [2].

Тнмалнн                    .

СТ.Топоровой [16] получены разнонаправленные эффекты тималина на сократи- тельную активность лимфатических сосудов брыжейки белой крысы в условиях прижиз-неного биомикроскопирования при его локальной аппликации в концентрации 10 мкг/мл. Вероятно, эта концентрация оказалась пограничной между концентрациями, способными вызвать эффект определенной направленности. Основанием для подобного предположения являются наши собственные данные по действию тимоптина, являющегося также препаратом, полученным из тимуса. При тех же условиях эксперимента, что и у С.Г. Топоровой, высокие концентрации (10'5 - 10‘9) приводили к торможению спонтанной активности лимфатических сосудов, а низкие (10"10 - 10'12) - к стимуляции спонтанных сокращений и к возникновению сокращений у спонтанно неактивных сосудов.

Ангиотензин

' Впервые стимулирующие эффекты ангиотензина на лимфоток изучали В. М. Foldi и O.T.Zoltan ([30], цит. по: [26]). По нашим данным, ангиотензин I в минимальной концентрации (10‘2° М) вызывал констрикцию до 50%, увеличение частоты сокращений лимфатических сосудов, изменение систолического и диастолического диаметров на 40%. Ангиотензин II в этих же условиях вызывает сходные, но более умеренные эффекты как по частоте сокращений, так и по другим параметрам реакции: констрикцию лишь на 30%, изменение амплитуды сокращений на 35%.

Тяфцни Т4ч;.<"

Тафцин в широком диапазоне концентраций (10‘12—10'5 М) оказывал, по нашим данным, исключительно ингибирующие эффекты — вазодилатацию (до 30 % от просвета сосуда в норме) и резкое прекращение сокращений лимфатических сосудов брыжейки белой крысы [8].

Тиролиберин

Наиболее эффективным регуляторным пептидом из числа изученных нам представляется тиролиберин. В широком диапазоне концентраций (от !0"!$ до 10"4 М) он способен стимулировать сократительную активность лимфатических сосудов крысы в условиях прижизненной регистрации и изолированных сосудов быка [8,10,38]. Наши данные нашли подтверждение в клинических работах И.И. Шиманко и соавт. [23], С.В. Петрова и соавт. [5] при использовании тиролиберина при терапии заболеваний, связанных с нарушением лимфотока. Механизм действия тиролиберина, являющегося мощным модулятором мно- гих физиологических функций, остается неизвестным. Можно предположить возникновение «каскадного» эффекта пептидов, вызываемого действием тиролиберина, столь характерного для многих регуляторных пептидов [3,4]. J.Hasegava и соавт. [35], изучая стимулирующий эффект тиролиберина (10"12— 1 О' 13 М) на сократимость изолированной папиллярной мышцы, полагают, что на мембране миоцита существуют рецепторы к тиролибе-рину. При изучении изменения вязкостных свойств мембраны эритроцитов крысы ЭПР-спектры спиновых зондов, введенных в субмембранное пространство, показали, что тиролиберин (10—10'3 М) вызывает структурные изменения в мембране эритроцитов. Данные сканирующей электронной микроскопии подтвердили, что при действии тиролиберина происходит увеличение эритроцитов «правильной» дисковидной формы. При этом улучшаются гемодинамические свойства эритроцитов [29]. Н. Г. Богданова и, соавт. [5] в липидном бислое мембран эндоплазматического ретикулума клеток печени мышей C57BI исследовали изменения при действии тиролиберина в широком диапазоне концентраций (Ю^-Ю'18 М) in vitro. В данной работе были изучены термоиндуцированные структурные переходы и изменение микровязкости. В качестве параметра, характеризующего микровязкость, было выбрано время вращательной корреляции (tc) спинового зонда (2,2,6,6-тетраметил-4-карпилоилоксипиперидин-1 -оксил), локализующегося в приповерхностных областях мембранных липидов. Было установлено, что тиролиберин вызывает статистически достоверные изменения микровязкости во всем исследованном диапазоне доз, причем максимальный эффект (до 30 %) достигается при использовании концентраций тиролиберина 10"0 и 10'6 М. Оказалось, что введение тиролиберина в концентрациях 10"4, 10'0 и 10'6 М приводит также к изменениям температуры структурных переходов: в присутствии сверхмалых доз тиролиберина отмечено появление нового структурного перехода в области 28—-ЗО^С. Тиролиберин в сверхмалых концентрациях снижает в несколько раз (по сравнению с контролем) энергию активации структурного перехода в области 24— 26°С. Показано, что физиологическое действие тиролиберина качественно коррелирует с его действием на структуру мембраны. Полученные результаты позволяют предположить, что изменение структурных особенностей биомембран, возможно, является одним из механизмов действия (в том числе в сверхмалых дозах).

Представленные выше исследования свидетельствуют о том, что регуляторные пептиды принимают участие в регуляции активности лимфатических сосудов, оказывая существенное модулирующее влияние на лимфо-ток. В заключение необходимо отметить особенности лимфатических сосудов как объекта действия регуляторов: ■ " '■ ■!< ;. .?. < : '

I) необычайную чувствительность к вазоактивным и особенно пептидным регуляторам по сравнению с реактивностью кровеносных сосудов. Это позволяет использовать для достижения физиологического ответа лимфосо-судов значительно меньшие концентрации регуляторных пептидов, не затрагивая другие системы. Можно предположить, что в условиях целостного организма именно весьма малые концентрации регуляторных пептидов способны модулировать функции лимфососу-дов; 2) бифазность действия многих регуляторных пептидов свидетельствует о том, что в зависимости от конкретных условий функционирования один и тот же пептид может усилить или ослабить лимфоток. Бифазные реакции в широком диапазоне концентраций описаны и для других систем, однако именно в данном случае они проявляются, как правило, в зоне, не выходящей за пределы физиологических концентраций регуляторных пептидов в жидких средах организма.