Условия и сроки хранения лиофилизированных поли- и моноклональных антитоксических пероксидазных конъюгатов
Автор: Якушева О.А., Алексеева Л.П., Евдокимова В.В., Зюзина В.П., Яговкин М.Э.
Журнал: Вестник Пермского университета. Серия: Биология @vestnik-psu-bio
Рубрика: Микробиология
Статья в выпуске: 4, 2022 года.
Бесплатный доступ
Подобраны оптимальные условия лиофилизации поли- и моноклональных пероксидазных конъюгатов, используемых в прямом варианте иммуноферментного анализа (ИФА), предназначенном для детекции холерного токсина у штаммов Vibrio cholerae O1, O139. К числу эффективных стабилизаторов, включенных в состав защитных сред, относятся 1%-ная сахароза, 1%-ный тиосульфат натрия, 0.5%-ный яичный альбумин или 0.5%-ный бычий сывороточный альбумин. Их использование увеличивает сроки хранения, повышает стабильность, способствует сохранению высокой чувствительности и специфичности поли- и моноклональных пероксидазных конъюгатов. Оценка серологической активности антитоксических конъюгатов в ИФА после лиофилизации в защитной среде со стабилизаторами показала, что она остается на исходном уровне. Результаты проверки лиофилизированных конъюгатов в процессе хранения позволяют говорить о возможности их применения в течение двух лет без изменения основных показателей.
Холерный токсин, поликлональный и моноклональный пероксидазный конъюгат, иммуноферментный анализ, дот-ифа, лиофилизация, защитная среда высушивания
Короткий адрес: https://sciup.org/147239680
IDR: 147239680 | DOI: 10.17072/1994-9952-2022-4-300-308
Список литературы Условия и сроки хранения лиофилизированных поли- и моноклональных антитоксических пероксидазных конъюгатов
- Алексеева Л.П. и др. Современные методические приемы очистки холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2019. Т. 15, № 1. С. 5-9.
- Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 180 с.
- Загоскина Т.Ю. и др. Совершенствование тест-системы для скрининга материала на ботулотоксин в дот-иммуноанализе // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН. 2015. Т. 101, № 1. С. 60-62.
- Куклина Г.В. и др. Разработка иммуноферментной тест-системы для обнаружения Legionella pneumophila серогруппы 1 // Проблемы особо опасных инфекций. 2011. Вып. 110. С. 61-64.
- Кытманов А.А. и др. Разработка иммуноферментных моноклональных тест-систем для выявления возбудителей сапа и мелиоидоза // Проблемы особо опасных инфекций. 2018. Вып. 3. С. 60-65. doi: 10.21055/0370-1069-2018-3-60-65.
- Пат. RU2232190C2 Российская Федерация, МПК C12N9/08 C12N9/96 A61K39/00. Композиция для хранения водных растворов конъюгатов или антител с пероксидазой хрена / Н.А. Игнатова, А.П. Осипов; патентообладатель ЗАО Иммунотех. - заявл. 22.06.2001; опубл. 10.07.2004.
- Пат. RU216.013.4820 Российская Федерация. Способ консервации иммунопероксидазного конъ-югата / А.А. Зайцев, О.А. Гнусарева, С.А. Курчева и др.; патентообладатель Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт. - № 0002549971; опубл. 10.05.2015.
- Пирожков А.П. и др. Стабилизация пероксидазных конъюгатов, используемых в иммуноферментных тест-системах для выявления антигенов вирусов Эбола и Марбург // Вопросы вирусологии. 2010. № 1. С. 45-48.
- Шаморова Н.А. Стабилизация конъюгата тироксин-пероксидаза аммониевой солью 8-анил-инонафтил-1-сульфокислоты // Биотехнология. 2009. № 5. С. 90-93.
- Якушева О.А. и др. Характеристика и оценка диагностической значимости поли- и моноклональ-ных пероксидазных конъюгатов к холерному токсину // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2020а. Т. 16, № 2. С. 37-43.
- Якушева О.А. и др. Оптимизация условий постановки прямого варианта дот-иммуноанализа для детекции холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2020б. Т. 16, № 3. С. 25-31.
- Bayat M., Khabiri A., Hemati B. Development of IgY-Based Sandwich ELISA as a Robust Tool for Rapid Detection and Discrimination of Toxigenic Vibrio cholerae // Can. J. Infect. Dis. Med. Microbiol. 2018. doi: 10.1155/2018/4032531.
- Gubala A.J., Proll D.F. Molecular-beacon multiplex real-time PCR assay for detection of Vibrio cholerae // Appl. Environ. Microbiol. 2006. Vol. 72, №. 9. P. 6424-6428. doi: 10.1128/AEM.02597-05.
- Iwanaga M., Kuyyakanond T. Large production of cholera toxin by Vibrio cholerae O1 in yeast extract peptone water // Journal of Clinical Microbiology. 1987. Vol. 25, № 1. P. 2314-2316.
- Izumiya H. et al. Development of a loop mediated isothermal amplification assay for Vibrio cholerae O1 and O139 // Molecular and Cellular Probes. 2019. Vol. 45. P. 65-67. doi: 10.1016/j.mcp.2019.05.001.
- Kerketta A.S., Kar S.K., Khuntia H.K. Detection of Haitian ctxB7 & tcpA alleles in Vibrio cholerae O1 El Tor biotype in Puri, Odisha, India // Indian J. Med. Res. 2019. Vol. 149, №. 4. P. 558-560. doi: 10.4103/ijmr.IJMR_1130_17.
- Kim E.J. et al. Molecular Insights Into the Evolutionary Pathway of Vibrio cholerae O1 Atypical El Tor Variants // PLoS Pathog. 2014. Vol. 10, № 9. doi: 10.1371/journal.ppat.1004384.
- Kim E.J. et al. Whole-genome sequence comparisons reveal the evolution of Vibrio cholerae O1 // Trends in Microbiology. 2015. Vol. 23, № 8. P. 479-489. doi: 10.1016 / j.tim.2015.03.010.
- Koskela K.A. et al. A multiplatform real-time polymerase chain reaction detection assay for Vibrio cholerae // Diagnostic microbiology and infectious disease. 2009. Vol. 65, № 3. P. 339-344.
- Lyon W.J. TaqMan PCR for detection of Vibrio cholerae O1, O139, non-O1, and non-O139 in pure cultures, raw oysters, and synthetic seawater // Appl. Environ. Microbiol. 2001. Vol. 67, № 10. P. 4685-4693. doi: 10.1016/j.diagmicrobio.2009.07.009.
- Meza-Lucas A. et al. Comparison of DOT-ELISA and Standard-ELISA for Detection of the Vibrio cholerae Toxin in Culture Supernatants of Bacteria Isolated from Human and Environmental Samples // Indian J. Microbiol. 2016. Vol. 56, № 3. P. 379-382. doi: 10.1007/s12088-016-0596-2 .
- Safa A., Nair G.B., Kong R.Y.C. Evolution of new variants of Vibrio cholerae O1 // Trends Microbiol. 2010. Vol. 18, № 1. P. 46-54. doi: 10.1016/j.tim.2009.10.003.
- Tuteja U. et al. Simultaneous direct detection of toxi-genic and non-toxigenic Vibrio cholerae from rectal swabs and environmental samples by sandwich ELISA // J. Med. Microbiol. 2007. Vol. 56, № 10. P. 13401345. doi: 10.1099/jmm.0.47166-0.