Влияние болюса на основе прополиса и родиолы розовой на лейкоцитарную формулу крови у коров при адаптации к условиям стрессогенной промышленной технологии

Введение. Практически все живые организмы, подвергаясь воздействию экстремальных условий, способны поддерживать постоянство гомеостаза в определенных пределах. В связи с этим под влиянием факторов, незначительно превышающих допустимые границы изменчивости окружающей среды, значения гематологических и физиолого-биохимических показателей испытывают, как правило, только модификационную изменчивость, характеризующуюся незначительными изменениями гомеостаза. Интенсивное ведение животноводства определило переход на индустриальную технологию содержания крупного рогатого скота. Данная технология сопровождается воздействием ряда негативных факторов чрезвычайной силы, приводящих к развитию стрессовой реакции в организме. По мнению ряда ученых, 70–80% стресс-факторов составляет алиментарный стресс и нарушение зоогигиенических условий содержания, заключающихся в применении автоматизации доения, шумах в процессе работы механизмов и техники, транспортировке и перегруппировках животных, а также лечебнопрофилактических ветеринарных мероприятиях. Все выше перечисленные факторы влияют на гематологические показатели и гомеостаз в целом [1].

Стрессоустойчивость животных, по мнению С.И. Плященко и В.Т. Сидорова можно оценить по гематологическим показателям, в частности по морфологическому составу форменных элементов крови, лейкоцитарной формуле, содержанию общего гемоглобина и количеству эритроцитов. Нарушения в лейкоцитарной формуле при стрессе отмечает в своих работах автор [2].

Воздействие стресс-факторов на организм животного вызывает патологическое отклонение от нормы в показателях крови, при этом снижается естественная резистентность и адаптационные возможности. Известно, что стресс-реакция характеризуется перераспределением лейкоцитов. Основной характеристикой изменений лейкоцитарной формулы при стрессе является возникновение нейтрофилёза и эозинопении [3]. Длительный стресс, которым является промышленный стресс при индустриальной технологии содержания молочного скота, характеризуется динамикой белых клеток крови, направленной на увеличение сегментоядерных нейтрофилов, что проявляется при нарушении функционирования костного мозга и заключается в выбросе слабо дифференцированных нейтрофилов в периферическую кровь, для которых характерна низкая фагоцитарная активность [4].

Избежать воздействия стресс-факторов на животных в условиях промышленных комплексов практически невозможно. В ветеринарной практике используются корректирующие и профилактические средства различных фармакологических групп, в частности действие, которых направлено на уменьшение последствий стресса за счет угнетения нервной системы. Использование таких препаратов впоследствии негативно влияют на нервную деятельность [5]. Стараясь избежать пагубных воздействий на нервную систему и физиолого-биохимический гомеостаз животного, в последнее время ученые и практики предлагают использование препаратов, обладающих антиоксиданто-адоптогенными свойствами. В качестве таковых в нашей работе предлагается использование болюсов на основе прополиса и родиолы розовой. Целью наших исследований являлось изучение влияния болюсов на основе прополиса и родиолы розовой на адаптационные процессы у голштинских коров в условиях технологического стресса, состояние которых определяли по показателям лейкоцитарной формулы крови, нарушение в которой является установленным фактом при развитии стресс-реакции.

Материалы и методы исследований. Адаптогенное действие биологической добавки в форме болюса на основе прополиса и родиолы розовой определяли по влиянию на лейкоцитарную формулу крови коров, включающую количество нейтрофилов, базофилов, эозинофилов, лимфоцитов, моноцитов. Исследование проводили в ООО «АПК Юность», для чего были сформированы три группы из голштинских коров второй лактации месяц после отела (контрольная и опытные – № 1 и № 2) по 10 голов в каждой. Животные были подобранны по принципу пар-аналогов. Коровы контрольной группы получали только основной рацион хозяйства (ОР), животным опытной группы № 1 задавали болюсы на основе прополиса дополнительно к основному рациону (ОР + БП), а в опытной группе № 2 – болюсы на основе прополиса и родиолы розовой (ОР + БП + РР). Курс приема адаптивных болюсов составил 35 дней, по 3 болюса 1 раз в день вместе с кормом.

Малоновый диальдегид (МДА) определяли в сыворотке крови по реакции с тиобарбитуровой кислотой, для чего кровь отбирали в пробирки без антикоагулянта.

В качестве биоматериала для изучения гемограммы использовали кровь из яремной вены, которую получали утром перед кормлением, применяя вакуумные пробирки, содержащие этилендиаминуксусную кислоту (ЭДТА). Лейкоцитарную формулу в процентном соотношении крови изучали с помощью гематологического анализатора «DH36-Vet» до начала эксперимента и на 10-ый, 20-ый, 30-ый день использования болюсов на основе прополиса и родиолы розовой дополнительно к основному рациону, а так же на 40-ой день от начала эксперимента.

Результаты исследований. По мнению ряда ученых, введение в организм животного препаратов растительного происхождения в чистом виде или в сочетании с другими природными адаптогенами сопровождается уменьшением величины и длительности стадии тревоги общего адаптационного процесса у них, подавлением катаболического синдрома и усилением восстановительных процессов на стадии резистентности. Одним из важных фармакологических свойств адаптогенов является их способность препятствовать росту перекисного окисления и наоборот способствовать росту активности антиоксидантных систем организма [6].

В нашем эксперименте у коров голштинской породы, находящихся в условиях промышленного комплекса, было установлено стрессовое состояние, характеризующееся высоким уровнем МДА. Снижение свободно-радикального окисления по уровню малонового диальдегида установлено при использовании наших средств, что подтверждает антиоксидантно-адаптогенное действие болюсов на основе прополиса и родиолы розовой (рис. 1).

Рисунок 1 - График изменения уровня малонового диальдегида в крови у голштинских коров, находящихся в индустриальной технологии содержания, при применении дополнительно к основному рациону болюсов

Под воздействием стресса происходит ярко выраженное негативное действие на иммуннокомпетентные органы. Гранулоцитарный росток кроветворения дает начало образованию эозинофилов, нейтрофилов и базофилов, которые представляют собой лейкоцитарные клетки крови, имеющие важное значение в структурах иммунитета. Клетки гранулоцитарного ряда способны уничтожать микроорганизмы, разрушать и переваривать поврежденные ткани, тем самым способствовать регуляции гомеостаза и иммунитета. Лейкоцитоз крови наблюдается как при различных патологиях, так и при стрессе, а также возможен при приеме корма. Гранулоцитарный росток красного костного мозга резко реагирует на действие негативных факторов и образующиеся из него клетки можно рассматривать в качестве маркера стресса, что нужно учитывать при диагностике и эффективности коррекционных мероприятий при развитии стресс-синдрома [7].

На первом этапе изучали лейкоцитарную формулу у голштинских коров в процессе адаптации к технологическому стрессу при их кормлении по основному рациону, что показало наличие отклонений в соотношении лейкоцитарных клеток крови от нормы (рис. 2).

Лейкоцитарная формула, %

Моноциты ейтрофилы

Лимфоциты

Базофилы

Эозинофилы

• ■    Нейтрофилы ■ Базофилы ■ Эозинофилы ■ Лимфоциты Моноциты

Рисунок 2 – Соотношение лейкоцитарных клеток крови в процентном отношении у голштинских коров, содержащихся в стрессогенных условиях промышленного комплекса до применения болюсов

* по данным собственных исследований.

Анализируя диаграмму можно было выявить нарушения в лейкоцитарной формуле, что проявилось в снижении эозинофилов на 33,3% и увеличении нейтрофилов на 7,5% относительно нижних границ референтных значений. Таким образом, установлены традиционные характеристики стресса: нейтрофилез и эозинопения (рис. 2).

При хроническом стрессе наблюдается гипоплазия иммунных органов, которая вызывается активацией апоптоза на фоне ингибирования пролиферации и перемещения лейкоцитарных клеток в кровяное русло. Ганс Селье установил и исследования других ученых подтвердили, что для развития антистрессорной адаптационной реакции характерны изменения, особенно в соотношении гранулоцитов в лейкоцитарной формуле крови.

Для подтверждения антиоксидантно-адаптивного действия болюса на основе прополиса и родиолы розовой была изучена способность коррекции лейкоцитарной формулы крови у голштинских коров в стрессогенных условиях. Результаты влияния болюсов на лейкоцитарную формулу коров представлены на рисунках 3 и 4.

После применения болюсов на основе прополиса и родиолы розовой голштинским коровам замечены положительные изменения в лейкоцитарной формуле. Количество нейтрофильных лейкоцитов в крови у голштинских коров, содержащихся в условиях промышленного стресса, до применения добавки было на 7,5% выше верхней границы нормы, а после применения отмечалась положительная динамика в их снижении, так в первой опытной группе уровень нейтрофилов снизился на 7,5%, а во второй – на 8%, по сравнению с контрольной группой (рис. 3).

Так же отмечена стабилизация эозинофилов относительно начала опыта, что проявилось в увеличении их у коров в опытной группе № 1 – 33,3%, в опытной группе № 2 – в 2 раза (рис. 4).

Нейтрофилы, % mkk до опыта 10-ый день 20-ый день 30-ый день 40-ой день

• ■    Контрольная группа ■ Опытная группа 1  ■ Опытная группа 2

Рисунок 3 – Динамика нейтрофилов в крови у голштинских коров, содержащихся в стрессогенных условиях промышленного комплекса при применении дополнительно к основному рациону болюсов

Эозинофилы, %

до опыта      10-ый день     20-ый день     30-ый день     40-ой день

■ Контрольная группа ■ Опытная группа 1   ■ Опытная группа 2

Рисунок 4 – Динамика изменения количества эозинофилов в крови у голштинских коров, содержащихся в стрессогенных условиях промышленного комплекса при применении дополнительно к основному рациону болюсов.

Выводы. У коров, содержащихся в условиях промышленного комплекса, установлено наличие стресс-реакции, проявляющейся в увеличении уровня малонового диальдегида и нарушении в лейкоцитарной формуле крови. На основании проведенных исследований предлагаем производству для коррекции оксидативных реакций и показателей лейкоцитарной формулы у высокопродуктивных голштинских коров в процессе адаптации, содержащихся в стрессогенных условиях промышленного комплекса, использовать болюсы на основе прополиса в сочетании с родиолой розовой в течение 35 дней в количестве 3-ех болюсов на голову.

патологическом течении послеродового периода и бесплодии// Сб. науч. тр. ведущ. ученых России, СНГ и др.: Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики инфекционных болезней животных и птиц. – Екатеринбург, 2008. Вып. 2. С. 38-48.