Влияние динитрозильных комплексов железа на механические свойства эритроцитов

Тюменский ГНГУ, г. Тюмень, Россия

Стабильность и деформируемость эритроцитов во многом зависит от жесткости белкового цитоскелета их мембран. Цитоскелет мембраны эритроцита представляет собой прочную, эластичную белковую сеть, локализованную на внутренней поверхности липидно- го бислоя цитоплазматической мембраны эритроцита. Жесткость этой сети в свою очереди определяется межмолекулярными взаимодействиями между отдельными компонентами [1]. В ряде экспериментальных исследований было показано, что оксид азота способен положительно влиять на способность эритроцитов к деформации. Известно, что в условиях гипоксии стимулируется активность NO-синтетазы в клетках эндотелия кровеносных сосудов, в результате уменьшается тонус гладких мышечных волокон сосудистой стенки. Одновременно увеличение концентрации NO в плазме крови способствует его диффузии в цитозоль эритроцитов и оказывает положительный эффект на их реологические свойства. Соответственно, можно предполагать, что возможно изменение чувствительности механизмов определяющих способность эритроцитов к деформации и регуляторному воздействию NO [2, 3, 4].

Цель работы: изучение изменение механических свойств мембран эритроцитов при действии доноров оксида азота различной природы.

Объектом исследования служат эритроциты здоровых лиц мужского пола, взятые путем венепункции локтевой вены в эвакутейнеры содержащие гепарин. Исследуемые образцы крови инкубировали с донорами оксида азота различной природы, затем проводили измерение индекса деформируемости, выявляя зависимость от времени инкубации и усилия сдвига. Исследования деформируемости эритроцитов проводили при помощи метода эктацитометрии.

В качестве доноров оксида азота использовались: нитропруссид натрия, динитрозильные комплексы железа с глутатионом (ДНКЖ).

Полученные результаты свидетельствуют о том, что у эритроцитов инкубированных с ДНКЖ более выраженно меняется индекс деформируемости по сравнению с контролем, в отличии от эритроцитов инкубированных с нитропруссидом натрия.

Согласно полученным результатам индекс деформируемости у эритроцитов инкубированных с нитропруссидом натрия увеличивается при более длительной инкубации и в последующем уже не возрастает, а у эритроцитов инкубированных с ДНКЖ максимальное значение индекса деформируемости достигается за более короткий срок инкубации. Сравнение полученных результатов указывает на различную скорость достижения положительного эффекта на механические свойства эритроцитов доноров оксида азота различной химической природы. Оксид азота, проникая в эритроцит, вызывает нитрозилирование различных белков при этом модификация белков цитоскелета возможна как непосредственно оксидом азота (нитрозилирование белков), так и вследствие взаимодействия с нитрози-лированными белками не входящими в структуру цитоскелета мембраны. Предположительно эффективность ДНКЖ связана с тем, что в исходном состоянии нитрозильные группы образуют комплекс с глутатионом. Эти комплексы могут проникать в эритроцит и взаимодействовать с белками цитоскелета напрямую минуя этап нитрозилирования других белков. Изменение индекса деформируемости мембран эритроцитов носило дозозависимый характер, а также зависело от времени инкубации с ДНКЖ