Влияние фирутаса на содержание холестерина и триглициридов в органах кроликов при экспериментальном атеросклерозе

В настоящее время для лечения атеросклероза и нарушений липидного обмена применяются различные по структуре и механизму действия препараты. Но большинство из этих гиполипидемических средств не всегда дают желаемый терапевтический эффект, а длительное применение их часто приводит к развитию побочных эффектов и серьезных осложнений [1,4,9].

В связи с этим, поиск, фармакологическое изучение и внедрение новых гиполипидемических средств, обладающих малой токсичностью и высокой активностью, представляет большой интерес и является важной актуальной проблемой современной кардиологии. [7, 8, 9].

Большой интерес в этом направлении представляет изучение комплексных    препаратов,    обладающих    антиоксидантным    и гиполипидемическим действием. Таким препаратом, обладающим широким спектром биологического действия является фирутас, включающий в свой состав фитин, рутин и аскорбиновую кислоту [2, 3].

Как известно, нарушение показателей липидного обмена является интегральным отражением метаболизма липидов в органах. Развитие гипертриглицеридемии при экспериментальных моделях атеросклероза связано именно с нарушением обмена холестерина и триглицеридов в печени. [4]. В связи с этим исследование влияния фирутаса и никотиновой кислоты на содержание общего холестерина и триглицеридов в аорте, миокарде и печени кроликов представляло определённый интерес при экспериментальном атеросклерозе. Исследование влияния многокомпонентного препарата – фирутаса – на показатели основных липидов, на определённые звенья патогенеза развития атеросклероза, по-видимому, будет в какой-то степени способствовать раскрытию механизма гиполипидемического действия.

Цель исследования. Изучить влияние нового комплексного препарата – фирутаса в сравнении с никотиновой кислотой на содержание общего холестерина и триглицеридов в органах кроликов при экспериментальном атеросклерозе.

Материал и методика исследований. Многокомпонентный препарат фирутас является биоактивной композицией фитина, рутина и аскорбиновой кислоты в соотношении 1,6:1:1. Атеросклероз вызывали у кроликов породы Шиншилла массой тела 2,5-3 кг по методу Аничкова, ежедневным введением маслянного раствора холестерина (перорально) в дозе 300 мг/кг в течении 3 месяцев. Действие фирутаса сравнивали с никотиновой кислотой. Проведены 2 серии исследований. В первой – изучали влияние фирутаса на развитие экспериментального атеросклероза. Исследовали 4 группы кроликов: 1 – интактная, животным вводили эквивалентное количество дистилированной воды; 2 – контрольная, животные получали холестерин в течении 3 месяцев; 3 – животным одновременно с холестерином вводили фирутас (100 мк/кг в течении 3 месяцев); 4 – животным одновременно с холестерином вводили никотиновую (300 мг/кг). Во второй серии изучали влияние фирутаса на обратное развитие атеросклероза. У кроликов ежедневным введением ХС(в течении 3 месяцев) воспроизводили атеросклероз, затем в течении месяца их лечили исследуемыми препаратами. Животных разделили 4группы: 1 – интактная; 2 – контрольная,животным вводили эквивалентное количество дистиллированной воды; - животным вводили фирутас (100мг/кг); 4 – животным вводили никотиновую кислоту (300мг/кг). Животных декапитировали после трехмесячного кормления ХС и через месяц после лечения. После забоя животных определяли показатели липидного обмена холестерина и триглициридов в органах – аорте, миокарде и печени. Содержание общего холестерина (ОХ) определяли по методу Илька, триглицеридов (ТГ) - набором реактивов «Биала-тест» фирмы Лахема, ЧССР [5]. Данные статистически обрабатывали методом вариационной статистики по Р.В. Стрелкову[6].

Результаты исследований . Показали, что применение холестериновой диеты в течении 90 дней у животных контрольной серии опытов привело к повышению содержания ОХ в тканях аорты, миокарда, а также печени соответственно в 7,2, 1,1, 5,9 раза по отношению к результатам у животных интактной серии опытов (табл.1).

Более всего содержание ОХ увеличивается в тканях печени, аорты и менее в миокарде. Как указывалось в выше приведённых частях исследования, для предупреждения развития экспериментального атеросклероза у кроликов, одновременно с холестерином вводился новый препарат фирутас и уже известный – никотиновая кислота - в течение 90 дней. Под действием фирутаса содержание ОХ снижалось в тканях печени на 72,6%, в тканях аорты на 71,1% и в тканях миокарда на 50%. Под влиянием препарата уровень ТГ в исследуемых органах уменьшался соответственно на 61,7, 45 и 45,3% по отношению к результатам контрольной серии опытов. При введении никотиновой кислоты с лечебнопрофилактической целью содержание ОХ в тканях печени снижалось на 25,1%, аорты – на 44,8% и миокарда – на 26%. А уровень ТГ уменьшался в исследуемых органах соответственно на 40,7, 52 и 36,3% по сравнению с показателями животных контрольной серии опытов.

Изучаемые препараты препятствовали резкому увеличению содержания ОХ и ТГ в органах. Липотропное действие никотиновой кислоты было менее выражено по сравнению с фирутасом. В лечебной группе препараты вводились после развития гиперлипидемии и атеросклероза, через три месяца после начала эксперимента, в течение 30 дней. В контрольной серии опытов, на 120 день эксперимента, содержание ОХ и ТГ оставалось повышенным. Лечение этими препаратами приводило к снижению общего уровня ОХ и ТГ в исследуемых органах, в то время как в контрольной серии опытов уровень ОХ в тканях печени, аорты и миокарда был повышен в 3 раза, 4 раза и на 65,1%. Содержание ТГ оставалось повышенным соответственно на 88,8, 159 и 76,5% по отношению к результатам у животных интактной серии опытов (табл.1). Лечение экспериментального атеросклероза исследуемыми препаратами привело к снижению содержания ОХ и ТГ в тканях органов. Фирутас и никотиновая кислота вводились в течение 30 дней с лечебной целью после воспроизведения экспериментального атеросклероза.

При лечении фирутасом, содержание ОХ в тканях печени снижалось на 62,1%, в тканях аорты – на 68,2% и в тканях миокарда на 32,8%. Препарат уменьшал уровень ТГ соответственно на 39,2, 79,2 и 41,4%.

При лечении никотиновой кислотой содержание ОХ уменьшалось в тканях исследуемых органов соответственно на 49,7, 45,7 и 22%. УровеньТГ, под влиянием никотиновой кислоты, снижался в тканях печени на 19,5 %, в тканях аорты – на 33,8% и в тканях миокарда – на 19,9% по отношению к показателям животных контрольной серии, исследованных на 120 день эксперимента (табл.1).

Лечение этими препаратами приводило к снижению уровня ОХ и ТГ в исследуемых органах.

При лечении фирутасом, содержание ОХ в тканях печени снижалось на 62,1%, в тканях аорты – на 68,2% и в тканях миокарда на 32,8%. Препарат уменьшал уровень ТГ соответственно на 39,2, 79,2 и 41,4%.

При лечении никотиновой кислотой содержание ОХ уменьшалось в тканях исследуемых органов соответственно на 49,7, 45,7 и 22%. УровеньТГ, под влиянием никотиновой кислоты, снижался в тканях печени на 19,5 %, в тканях аорты – на 33,8% и в тканях миокарда – на 19,9% по отношению к показателям животных контрольной серии, исследованных на 120 день эксперимента (табл.1). Лечение этими препаратами приводило к снижению уровня ОХ и ТГ в исследуемых органах. Таким образом, на основании проведённых исследований, можно заключить, что фирутас и никотиновая кислота, при введении с лечебно-профилактической и лечебной целью, оказывали однонаправленное липотропное и антиатерогенное действие. Под влиянием препаратов уменьшалось содержание ОХ и ТГ в тканях печени, аорты и миокарда, что, по-видимому, препятствовало накоплению этих липидов в кровеносных сосудах. Антиатерогенное действие препаратов связано с их антиоксидантными действиями, изученными в наших исследованиях.

Фирутас – по липотропному и антиатерогенному эффекту – значительно превосходит известный гиполипидемический препарат – никотиновую кислоту, это связано с более выраженным антиоксидантным действием фирутаса, что объясняется наличием в составе препарата естественных антиоксидантов – рутина и аскорбиновой кислоты. Эти биолиганды обладают антиоксидантным действием и стимулируют превращение холестерина в желчные кислоты, повышая продукцию липазы, разрушают избыточное количество триглицеридов. После последнего введения изучаемых препаратов проводились патоморфологические исследования аорты.

Морфологические исследования дуги, грудного и брюшного отдела аорты показали, что у интактных животных она имеет равномерную толщину на всех участках, интима без деструктивных изменений, проявления фиброза и липоидоза отсутствуют. Она имеет гладкую равномерную поверхность

(Фото 1).

При визуальной оценке толщина аорты контрольных кроликов (получавших холестерин в течение 3-х месяцев) была наибольшей в области дуги, в неизменённых участках до 2 мм, а в участках с атеросклеротическим поражением до 3,5-4 мм. Основными проявлениями атеросклероза были липоидоз, фиброзные бляшки и кальциноз. Локализации жировых пятен и полосок не имели определенной закономерности и носили больше диффузный характер. Атеросклеротические поражения были обнаружены в аортах всех кроликов контрольной группы. Явление липоидоза чаще встречалось в брюшном отделе. Фиброзные бляшки чаще встречались в дуге аорты и в грудном отделе (Фото 2). В группе животных, получавших, одновременно с холестерином, фирутас, атеросклеротические изменения не обнаруживаются. Большая часть аорт внешне не отличалась от интактных животных. В остальных случаях изменения были небольшими и представлены, в основном, липоидозом интимы. У этих кроликов толщина стенок аорты была равномерной и не отличалась от таковой у интактных животных (Фото 3).

Влияние никотиновой кислоты на атеросклеротические изменения аорт кроликов было намного слабее, чем таковое у фирутаса. Стенки аорт животных, получавших никотиновую кислоту, были утолщены, атеросклеротические изменения были выражены и занимали большую поверхность. Стенка аорты неравномерно утолщена за счет бляшковидных набуханий.

Таблица 1.

Влияние многокомпонентного препарата фирутас и никотиновой кислоты на содержание холестерина и триглицеридов (ммоль/л) в органах кроликов при развитии и регрессии экспериментального атеросклероза (m±m) (n=6)

Условия опыта	Дни иссл.	Аорта		Миокард		Печень
		Холестерин г/л	Триглицериды г/л	Холестерин г/л	Триглицериды г/л	Холестерин г/л	Триглицериды г/л
Развитие атеросклероза
Интактная группа		1,49±0,07	1,3±0,3	2,12±0,07	2,3±0,06	2,35±0,12	2,5±0,09
Контрольная гр. (холест. диета )	90	12,3±0,35	3,8±0,3	4,4±0,16	4,79±0,3	16,15±0,1	8,1±0,05
Леч.-проф. Гр. (фирут. + холест.)	90	3,55±0,18	2,09±0,3	2,2±0,12	2,62±0,09	4,58±0,1	3,1±0,09
Леч.-проф. гр. (никот. кисл. + холест.)	90	6,78±0,1	2,5±0,08	3,3±0,3	3,05±0,04	12,1±0,14	4,8±0,13
Регрессия атеросклероза
Исходный уровень	90	12,3±0,35	3,8±0,3	4,4±0,16	4,49±0,3	16,15±0,1	8,1±0,05
Контрольн. гр. (90 дн. холест. диета + 30 дн. дистил. вода)	120	7,56±0,04	3,37±0,26	3,5±0,05	4,06±0,04	9,5±0,06	4,72±0,06
Леч.гр. (90 дн. холест. диета + 30 дн. фирут.)	120	2,4±0,05	1,7±0,05	2,35±0,04	2,38±0,05	3,6±0,07	2,87±0,06
Леч.гр. (90 дн. холест. диета + 30 дн. никот. кисл.)	120	4,1±0,04	2,23±0,05	2,73±0,04	3,25±0,26	4,78±0,05	3,8±0,07

Фото 1.

Фото 2.

Фото 3.                           Фото 4.

Следует отметить, что у кроликов, получавших никотиновую кислоту, атеросклеротические изменения аорты были выражены в меньшей степени, чем в контроле, но в значительно большей, чем в группе леченных фирутасом (Фото 4).

Выводы. 1. Таким образом, морфологические изменения показали, что в аортах кроликов контрольной группы имеются выраженные атеросклеротические изменения в виде липоидоза, фиброзных бляшек и, иногда, явление кальциноза. Просветы большинства аорт сужены. В интиме и средней оболочке аорт контрольной группы наблюдаются липоидоз, фиброзные бляшки и кальциноз.

• 2.    Испытываемые препараты оказывают выраженное антиатерогенное действие, уменьшая площадь атеросклеротического поражения аорт кроликов при развитии атеросклероза. Данные морфологических исследований согласуются с результатами, полученными при изучении влияния препаратов на показатели липидного обмена в сыворотке крови, органах, процессы ПОЛ и состояние ферментативной антиокислительной защиты.

• 3.    На основании проведенных исследований можно заключить, что комплексный препарат фирутас, оказывает выраженное

антиатеросклеротическое действие при развитии холестеринового атеросклероза у кроликов. По антиатерогенному эффекту фирутас превосходит никотиновую кислоту.