Влияние Helicobacter pylori на изменения васкулоэндотелиального фактора роста при гастродуоденальном кровотечении

Для активной репарации ткани требуется улучшение ее кровоснабжения. Ключевым инициатором ангиогенеза является васкулоэндотелиальный фактор роста (vascular endothelial growth factor – VEGF), влияющий на образование и выживание незрелых кровеносных сосудов путем стимуляции роста и пролиферации эндотелиоцитов сосудов. Данные эффекты достигаются связыванием и аутокринной активацией мембранных тирозинкиназных рецепторов, экспрессируемых клетками эндотелиального слоя кровеносных сосудов [6–8].

Цель работы : исследовать изменения сывороточных концентраций васкулоэндотелиального фактора роста у больных язвенной болезнью, осложненной гастродуоденальным кровотечением, в зависимости от инфицирования H. pylori .

Критериями включения пациентов в исследование стали: информированное согласие на участие в исследовании, «язвенный» анамнез с обострениями, клинические проявления гастродуоденального кровотечения, результаты эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС).

Протокол исследования был одобрен Локальным этическим комитетом МГУ им. Н. П. Огарёва.

Степень кровопотери при гастродуоденальном кровотечении определяли согласно классификации А. И. Горбашко как легкую, среднюю или тяжелую [9].

Экспресс-диагностика хеликобактериоза дыхательным методом проводилась с применением тест-системы ХЕЛИК® с индикаторной трубкой (ООО «АМА», Россия). Результат оценивали по разнице между нагрузочным и базальным уровнями аммиака в выдыхаемом обследуемым воздухе согласно изменению цвета индикаторной трубки.

У обследованных лиц при ЭГДС проводили забор материала при прицельной биопсии и доставляли в патогистологическую и микробиологическую лаборатории для дальнейшего исследования. Определение уреазной активности H. pylori в биоптатах проводилось при помощи тест-системы ХЕЛПИЛ® (Бланк) (ООО «АМА», Россия). Микроскопическим методом (окраска препарата по Романовскому-Гимзе) исследовали степень контаминации биоптатов H. pylori.

В сыворотке крови, отделяемой центрифугированием, иммуноферментным методом исследовали количество васкулоэндотелиального фактора роста с применением тест-системы ЗАО «Вектор-Бест» (Россия). Фирмой-производителем рекомендовано считать нормальным уровень VEGF в интервале 10–246 пг/мл.

Полученные данные статистически обработали: вычисляли среднюю арифметическую (М), среднюю ошибку средней арифметической (m), критерий Стьюдента (t), коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r s ). Достоверными считали межгрупповые различия при степени вероятности (p) ≤0,05.

Результаты и обсуждение. 66,7% пациентов предъявляли жалобы на рвоту с примесью крови. Вздутие и урчание в животе наблюдалось у 40%, на похудание жаловались 23,3%, на слабость и головокружение – 100% и 96,7% соответственно. Черный стул наблюдался в 70% случаев. При объективном обследовании у всех больных язык был обложен белым налетом.

Распределение больных по степени тяжести кровотечения представлено на рисунке.

□ легкая □ средняя тяжелая

Рис. Распределение больных по степени тяжести гастродуоденального кровотечения.

Результаты дыхательного уреазного теста у лиц 1-й группы были отрицательными, во 2-й группе у 20% обследуемых – отрицательными, у 80% – положительными.

При Хелпил-тесте уреазопозитивные биоптаты в 1-й группе наблюдались у 40% обследованных, во 2-й группе – у 73,3%. Микроскопия мазков-отпечатков биоптатов показала аналогичные результаты по выявлению хеликобактерий.

Количество VEGF в сыворотке крови больных сильно коррелировало со степенью тяжести кровотечения (rs=+0,883, р<0,01; табл. 1) и инфицирования Helicobacter pylori (rs=+0,725, р<0,01; табл. 2). У здоровых лиц также отмечалась положительная корреляционная зависимость средней силы сывороточного уровня VEGF от инфицирования слизистой оболочки гастродуоденальной зоны H. pylori – rs=+0,671, р<0,01.

Таблица 1

Концентрация васкулоэндотелиального фактора роста при гастродуоденальном кровотечении (в пг/мл) в зависимости от степени тяжести кровотечения

Группа Показатель	1-я группа	2-я группа
		легкая степень	средняя степень	тяжелая степень
VEGF	119,1±14,2	304,5±8,80 *	349,3±6,21 *	387,8±7,88 *

Примечание: * – достоверно по отношению к 1-й группе при р<0,05.

Таблица 2

Концентрация васкулоэндотелиального фактора роста (в пг/мл) в зависимости от инфицирования Helicobacter pylori (по Хелпил-тесту и микроскопии)

Группа Показатель	1-я группа		2-я группа
	Hp-	Hp+	Hp-	Hp+
VEGF	110,8±6,28	131,5±5,55 *	301,1±8,37 *#	365,7±11,44 *#◊

Примечание: Hp- – не определяются H. pylori, Hp+ – определяются H. pylori,

* – достоверно по отношению # – достоверно по отношению ◊ – достоверно по отношению к 1-й группе (Hp-) при р<0,05, к 1-й группе (Hp+) при р<0,05, ко 2-й группе (Hp-) при р<0,05

Примечательно наличие статистических различий уровня VEGF у неинфицированных и инфицированных H. pylori как больных, так и здоровых лиц, что свидетельствует о патогенетической роли данного инфекта в индукции воспаления и ангиогенеза. Полученные данные полностью согласуются с проведенным ранее исследованием [10].

Наблюдаемую взаимосвязь количества VEGF в сыворотке крови и степени тяжести гастродуоденального кровотечения можно объяснить активацией продукции цитокина в условиях тканевой гипоксии, интерпретировать как механизм, направленный на восстановление микроциркуляторного русла, способствующий улучшению репаративных процессов в слизистой оболочке и ускорению эпителизации язвенных дефектов у больных.

В то же время чрезмерное увеличение VEGF, особенно на фоне атрофии, дисплазии слизистой оболочки [11] и инфекции H. pylori , может ускорить процессы неоангиогенеза и канцерогенеза.

Таким образом, у больных с гастродуоденальным кровотечением наблюдаемое повышение количества васкулоэндотелиального фактора роста зависит от локализации язвенного дефекта, степени тяжести кровотечения и инфицирования H. pylori, и является диагностически ценным.