Влияние имплантационных материалов, созданных на основе внеклеточного матрикса ксенокости лошади и быка, на формирование экстрацеллюлярных нейтрофильных ловушек(экспериментальное исследование)
Автор: Дюрягина Ольга Владимировна, Чепелева Марина Владимировна, Кузнецова Елена Ивановна, Ковинька Михаил Александрович, Накоскин Александр Николаевич
Журнал: Гений ортопедии @geniy-ortopedii
Рубрика: Оригинальные статьи
Статья в выпуске: 4, 2020 года.
Бесплатный доступ
Цель. Изучить влияние костно-пластических материалов, созданных на основе внеклеточного ксеноматрикса костной ткани быка и лошади, на формирование экстрацеллюлярных нейтрофильных ловушек (NETs) в периферической крови кроликов в раннем послеоперационном периоде после имплантации. Материалы и методы. Исследование было выполнено на 18 кроликах-самцах породы Советская шиншилла в возрасте от 8 месяцев до 1,2 года, весом от 3,0 до 4,5 кг. Животным моделировали несквозной дефект кости цилиндрической формы размером 2 × 6 мм в дистальном метафизе правого и левого бедра. Кролики были разделены на три группы по 6 животных в каждой. В группе I костный дефект оставляли незаполненным, в группе II дефект заполняли ксеноматриксом костной ткани быка, животным III группы имплантировали ксеноматрикс костной ткани лошади. Имплантационный материал имел вид крошки желтоватого цвета с величиной частиц 0,5-1 мм. Для подсчета экстрацеллюлярных нейтрофильных ловушек (NETs) использовали мазки крови, окрашенные по Романовскому-Гимзе. Подсчитывали процент нейтрофилов, прошедших стадии трансформации ядра и выбросивших во внеклеточное пространство свободный хроматин в виде сетеподобных структур. Результаты. На 3-7 сутки эксперимента повышалось количество NETs на ранних стадиях нетоза во всех группах. Достоверных отличий между группами не определялось. В группе I на 7 и 14 сутки количество ранних форм NETs (стадии 1a и 1б) возвращалось к значениям дооперационного периода. В группах II и III нормализации NETs (стадия 1a) не произошло, а содержание NETs (стадия 1б) вернулось к исходному уровню только к 30 суткам эксперимента. На 3, 7, 14 сутки количество зрелых NETs повышалось во всех группах. Наиболее высокие значения показателя отмечались в группе II, где проводилась имплантация матрикса ксенокости быка. Заключение. Имплантационные материалы, созданные на основе внеклеточного матрикса ксенокости лошади и быка, стимулируют избыточное образование ранних NETs на 14-30 сутки экспериментального периода в ответ на ксенотрансплантацию. Ксеноматериалы костной ткани быка, в сравнении с ксеноматериалами костной ткани лошади, вызывают более выраженную воспалительную реакцию в ближайшие сроки после замещения дефекта, что проявляется наиболее высокой продукцией зрелых NETs на 3-14 сутки эксперимента.
Нейтрофильные экстрацеллюлярные ловушки (nets), костный дефект, ксеноматрикс костной ткани быка, ксеноматрикс костной ткани лошади
Короткий адрес: https://sciup.org/142226213
IDR: 142226213 | УДК: [616.155.34:616-089.844]-092.9 | DOI: 10.18019/1028-4427-2020-26-4-571-575
The effect of implantation materials based on equine and bovine xenogenic bone extracellular matrix on the formation of extracellular neutrophilic traps (experimental study)
Purpose To study the effect of osteoplastic materials based on the extracellular xenomatrix of bovine and equine bone tissue on the formation of neutrophil extracellular traps (NETs) in the peripheral blood of rabbits in the early post-operative period after implantation. Materials and methods The study was carried out on 18 male rabbits of the Soviet Chinchilla breed, aged from 8 months to 1.2 years, weighing from 3.0 to 4.5 kg. A perforated bone defect of a cylindrical shape measuring 2 x 6 mm in the distal metaphysis of the right and left femurs was modeled in the animals. The rabbits were divided into three groups, six animals each. In group I, the bone defect was left unfilled; in group II, the defect was filled with a bovine bone tissue xenomatrix, and an equine bone tissue xenomatrix was implanted in group III animals. The implantation material had the appearance of a yellowish crumb with a particle size of 0.5-1 mm. Blood smears stained according to Romanovsky-Giemsa were used for counting extracellular neutrophil traps (NETs). The percentage of neutrophils that passed the stages of nuclear transformation and emitted free chromatin into the extracellular space in the form of network-like structures was calculated. Results On days 3-7 of the experiment, the number of NETs increased in the early stages of NETosis in all groups. There were no significant differences between the groups. In group I, on days 7 and 14, the number of early forms of NETs (stages 1a and 1b) returned to the values of the preoperative period. In groups II and III, normalization of NETs (stage 1a) did not occur, and the content of NETs (stage 1b) returned to the initial level only by day 30 of the experiment. On days 3, 7, 14, the number of mature NETs increased in all groups. The highest values were noted in group II, where the bovine xenogeneic matrix was implanted. Conclusion Implantation materials based on the extracellular matrix of equine and bovine xenogeneic bone stimulate excessive formation of early NETs on days 14-30 of the experimental period in response to xenotransplantation. Xenomaterials of bovine bone tissue, in comparison with xenomaterials of equine bone tissue, induce a more pronounced inflammatory reaction in the nearest time after defect filling, which is manifested by higher production of mature NETs on days 3-14 of the experiment.
Список литературы Влияние имплантационных материалов, созданных на основе внеклеточного матрикса ксенокости лошади и быка, на формирование экстрацеллюлярных нейтрофильных ловушек(экспериментальное исследование)
- Костнопластические остеоиндуктивные материалы в травматологии и ортопедии / М.В. Лекишвили, Е.Д. Склянчук, В.С. Акатов, А.А. Очкуренко, В.В. Гурьев, И.С. Рагинов, С.Н. Бугров, А.Ю. Рябов, И.С. Фадеева, Ю.Б. Юрасова, А.С. Чеканов // Гений ортопедии. 2015. № 4. С. 62-67.
- Bone grafts: which is the ideal biomaterial? / H.J. Haugen, S.P. Lyngstadaas, F. Rossi, G. Perale // J. Clin. Periodontol. 2019. Vol. 46, No Suppl. 21. P. 92-102. DOI: 10.1111/jcpe.13058
- Современные перспективы разработки материалов для стабилизирующих вмешательств на позвоночнике с применением спондилодеза (обзор) / А.Е. Боков, С.Г. Млявых, Н.Ю. Широкова, Д.В. Давыденко, Н.Ю. Орлинская // Современные технологии в медицине. 2018. Т. 10, № 4. С. 203-219.
- Xenogeneic bone matrix immune risk assessment using GGTA1 knockout mice / A. Shao, Y. Ling, L. Xu, S. Liu, C. Fan, Z. Wang, B. Xu, C. Wang // Artif. Cells Nanomed. Biotechnol. 2018. Vol. 46, No sup3. P. S359-S369. DOI: 10.1080/21691401.2018.1493489
- Evidence for the important role of inflammation in xenotransplantation / J. Li, H. Hara, Y. Wang, C. Esmon, D.K.C. Cooper, H. Iwase // J. Inflamm. (Lond). 2019. Vol. 16, P. 10. DOI: 10.1186/s12950-019-0213-3
- Способ получения и консервации минерализованного костного матрикса: патент 2495567 Рос. Федерация / Лунева С.Н., Накоскин А.Н., Ковинька М.А.; заявитель и патентообладатель: ФГБУ "РНЦ "ВТО" им. акад. Г.А. Илизарова Минздравсоцразвития России". № 2012112186/15; заявл. 29.03.2012; опубл. 20.10.2013, Бюл. 29.
- СП 2.2.1.3218-14 Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). URL: http://docs.cntd.ru/document/420219460
- ГОСТ 33215-2014 Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила оборудования помещений и организации процедур. URL: http://docs.cntd.ru/document/1200127789
- ГОСТ 33216-2014. Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила содержания и ухода за лабораторными грызунами и кроликами. URL: http://docs.cntd.ru/document/1200127506
- ГОСТ Р ИСО 10993-1-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 1. Оценка и исследования. (утвержден и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 06.08.2009 № 281-ст). URL: http://docs.cntd.ru/document/1200073860
- Immunologic testing of xeno-derived osteochondral grafts using peripheral blood mononuclear cells from healthy human donors / V.J. Hetherington, J.S. Kawalec, D.S. Dockery, O.S. Targoni, P.V. Lehmann, D. Nadler // BMC Musculoskelet. Disord. 2005. Vol. 6. P. 36.
- DOI: 10.1186/1471-2474-6-36
- Depletion of cytotoxic (CD8+) T cells impairs implant fixation in rat cancellous bone / M. Bernhardsson, F. Dietrich-Zagonel, L. Tätting, P. Eliasson, P. Aspenberg // J. Orthop. Res. 2019. Vol. 37, No 4. P. 805-811.
- DOI: 10.1002/jor.24246
- The assessment of xenogeneic bone immunotoxicity and risk management study / X. Sun, C. Liu, Y. Shi, C. Li, L. Sun, L. Hou, X. Wang // Biomed. Eng. Online. 2019. Vol. 18, No 1. P. 108.
- DOI: 10.1186/s12938-019-0729-z
- Local induction of inflammation affects bone formation / M. Croes, M.C. Kruyt, L. Loozen, A.H. Kragten, H. Yuan, W.J. Dhert, F.C. Öner, J. Alblas // Eur. Cell. Mater. 2017. Vol. 33. P. 211-226.
- DOI: 10.22203/eCM.v033a16
- Lohmann C.H., Hameister R., Singh G. Allergies in orthopaedic and trauma surgery // Orthop. Traumatol. Surg. Res. 2017. Vol. 103, No 1S. P. S75-S81.
- DOI: 10.1016/j.otsr.2016.06.021
- Borregaard N. Neutrophils, from marrow to microbes // Immunity. 2010. Vol. 33, No 5. P. 657-670.
- DOI: 10.1016/j.immuni.2010.11.011
- Understanding the role of neutrophils in chronic inflammatory airway disease / A.E. Jasper, W.J. McIver, E. Sapey, G.M. Walton // F1000Res. 2019. Vol. 8, F1000 Faculty Rev-557.
- DOI: 10.12688/f1000research.18411.1
- Формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек у пациентов с остеоартрозом и исходом эндопротезирования тазобедренного сустава / Е.И. Кузнецова, М.В. Чепелева, О.К. Чегуров, Н.М. Клюшин, Н.В. Сазонова, А.В. Каминский, А.М. Ермаков Ю.В. Абабков, Б.В. Камшилов // Сибирский научный медицинский журнал. 2016. Т. 36, № 6. С. 60-64.
- Дюрягина О.В., Ковинька М.А., Накоскин А.Н. Ксеноимплантация матрикса костной ткани при замещении дефектов кости у кроликов // Ветеринария Кубани. 2016. № 6. С. 19-21.