Влияние микрофлоры матери на становление микроценоза кишечника ребенка в период грудного вскармливания

Формирование микрофлоры различных биотопов новорожденного и, в частности, толстой кишки начинается с момента родов и определяется рядом факторов: составом микробиоценозов матери, характером родо-разрешения, сроком прикладывания к груди, видом вскармливания и т.д. [8].

Однако существует другая точка зрения, свидетельствующая о том, что нормальная микрофлора кишечника плода закладывается во второй половине беременности при помощи феномена бактериальной транслокации от матери к плоду [7].

Учитывая данный факт, целесообразным представляется изучение влияния вагинальной и интестинальной микрофлоры беременных на процесс становления микробиоценоза толстой кишки новорожденных [3].

Материал и методы исследования

В МЛПУЗ «Родильный дом № 5» г. Ростова-на-Дону выполнено бактериологическое исследование вагинальной и интестинальной микрофлоры у 24 практически здоровых первобеременных женщин без отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза. Средний возраст беременных составил 23±5,0 лет, срок беременности 38 недель. У новорожденных было проведено бактериологическое исследование мекония и интестинальной флоры на пятые сутки после рождения.

Для количественного и качественного изучения микрофлоры влагалища забирали содержимое заднего свода стерильным тампоном Copan innovation (Италия). Материал доставляли в лабораторию в течение 1 часа. Бактериологическое исследование проводили по методике В.В. Меньшикова (2009). Идентификацию выделенных бактерий проводили по морфологическим, тинкториальным, культуральным и биохимическим признакам с помощью энтеро-, стафило-, анаэротестов (Lachema, Чехия).

Бактериологическое исследование фекалий беременных, мекония, фекалий новорожденных на 5 сутки жизни, а так же оценку микрофлоры толстой кишки проводили в соответствии с отраслевым стандартом [5, 6].

Расчет данных произведен при помощи специализированного комплекса «Статистика +».

Результаты исследования и обсуждение

Обследованы 24 практически здоровые первобеременные женщины. В исследование включены беременные без хронической соматической патологии и осложнений беременности.

Все новорожденные рождены через естественные родовые пути в сроке гестации 39±1 недель, со средними показателями по шкале Апгар – 7–8 баллов, к груди приложены сразу после родов, находились в палатах «мать-дитя».

При бактериологическом исследовании микрофлоры влагалища на 38 неделе лактобациллы выделяли у 100% беременных со средним уровнем (lg 4,4±1,9 КОЕ/мл), что статистически ниже нормы (p<0,05) (таблица 1).

Необходимо отметить, что беременным коррекция микрофлоры влагалища не проводилась ввиду отсутствия клинических проявлений.

На 38 неделе гестации бифидобактерии достоверно чаще (p<0,05) обнаруживали у 60% беременных. Однако, средний уровень колебался в пределах формально-допустимых показателей (lg 4,0±2,0КОЕ/мл).

Аналогичная тенденция более высокой частоты обнаружения по сравнению с нормой наблюдалась для группы коагулазоотрицательных стафилококков (S.epide-rmidis, S.saprophyticus, S.lentus, S.xylosus), коринебактерий и золотистого стафилококка. Однако их количественные показатели соответствовали нормативным.

Анаэробный компонент микробиоценоза влагалища, как по частоте обнаружения, так и по средним

Табл. 1. Микробный спектр влагалища у беременных в 38 недель гестации

	Нормоценоз*		Исследование 38 недель (КОЕ/мл)
Лактобактерии	71–100%	107–109	100,00%	4,4±1,9**
Бифидобактерии	12%	103–107	60,00%	4,0±2,0
КОС	62%	103–104	90,00%	3,6±0,5
Коринебактерии	30–40%	104–105	100,00%	3,0±1,1
S. aureus	34%	<104	70,00%	2,6±0,5
E.coli	2–10%	107–108	20,00%	2,5±0,7
Эубактерии	10–25%	109–1010	100,00%	6,2±1,7**
Пептострептококки	80–88%	109–1010	80,00%	5,8±2,2**
Бактероиды	9–13%	103–104	30,00%	5,0±0,1
Превотеллы	60%		10,00%	7,0±0,1

Примечание: * – по Кудрявцева Л.В. с соавт., 2001; ** – различия между выборкой и нормой достоверны.

Табл. 2. Характеристика микрофлоры толстой кишки у беременных (n=24)

Микроорганизмы	Нормоценоз	38 неделя
		частота обнаружения (в %)	количество микроорганизмов (lg КОЕ/г)
Бифидобактерии	109–1010	100	6,7±1,5*
Лактобактерии	107–108	100	4,5±1,6*
Кишечная палочка	107–108	100	7,1±1,4
Энтерококки	105–108	100	6,9±1,4
Клостридии	<=105	40	2,5±1,4
КОС	<=104	30	4,7±1,6
Кандиды	<=104	40	3,7±1,5
Клебсиеллы	<= 104	30	6,5±1,5
S.aureus	0	4%	3,0±0,1*

Примечание: * – различия между выборкой и нормой достоверны.

количественным показателям соответствовал норме, исключение составили эубактерии и пептострептокок-ки, которых регистрировали в сниженном количестве (p<0,05).

Из представителей семейства Enterobacteriaceae во влагалище регистрировали в незначительном количестве только банальные E.coli (20%) (lg 2,5±0,7 КОЕ/мл).

У практически здоровых первородящих беременных при бактериологическом исследовании фекалий выявлены дисбиотические изменения соответствующие 1 (46,7%) и 2 (53,3%) степени дисбактериоза.

Количественные показатели представителей облигатной микрофлоры (бифидо- и лактобактерии) толстой кишки были достоверно снижены (p<0,05) по сравнению с формально нормативными (таблица 2). Несмотря на это, данные микроорганизмы выделяли у всех беременных.

Из представителей факультативной микрофлоры только клебсиеллы достоверно превышали нормативные показатели (p<0,05). Остальные представители облигатной и факультативной групп, как по частоте обнаружения, так и по количественным характеристикам, в большинстве случаев соответствовали формальнонормативным.

Общеизвестно, что меконий стерилен [4]. Заселение ЖКТ микроорганизмами происходит к 2–3 суткам после рождения [9].

Поэтому интересными, на наш взгляд, представляются полученные данные о выделении из мекония S.aureus (lg 4,5±1,5 КОЕ/г), E.coli (lg 6,0±0,1 КОЕ/г), E.faecalis (lg 8,0±0,1 КОЕ/г) – в 40% случаев. Corynebacterium sp. (lg-3±0,1 КОЕ/г), H.alvei (lg7±0,1 КОЕ/г) и M.luteus (lg3±0,1 КОЕ/г) выделяли из мекония в 20% случаев. У 40% новорожденных меконий был стерилен (таблица 3).

На 5 сутки лактобактерии обнаруживали у 85,8% новорожденных (lg5±2,1 КОЕ/г), бифидобактерии – в 71,4% (lg 6,4±2,8 КОЕ/г), с такой же частотой регистрировали банальные эшерихии – 71,4% (lg 7,6±2,5 КОЕ/г).

Табл. 3.

Микроорганизмы	Нормоценоз* Грудное вскармливание	Количество микроорганизмов (lg КОЕ/г)
		Меконий	5 сутки после родов
Бифидобактерии	1010–1011	0**	6,4±2,8**
Лактобактерии	106–107	0**	5±2,1
Кишечная палочка	107–108	6,0±0,1**	7,6±2,5
Энтерококки	105–107	8,0±0,1**	8,0±0,1**
Клостридии	0	0	0
КОС	0	0	4,7±1,6**
Кандиды	0	0	0
Клебсиеллы	0	0	5±0,1**
S.aureus	0	4,5±1,5**	5±0,1**
Corynebacterium sp.	0	3±0,1**	0
H.alvei	0	7±0,1**	0
M.luteus	0	3±0,1	0
E.aerogenus	0	0	9±0,2**

Примечание: * – по Коршунову с соавт.1999 г.; ** – различия между выборкой и нормой достоверны.

У всех новорожденных из фекалий выделяли энтерококки, количество которых соответствовало (lg 8,0±0,1 КОЕ/г). Более выраженные изменения наблюдались со стороны факультативной микрофлоры: в 85,8% в фекалиях новорожденных обнаруживали стафилококки, в основном представленные КОС (lg 4,7±1,6 КОЕ/г), частота обнаружения S.aureus в фекалиях новорожденных составила всего 28,6% (lg 5±0,1 КОЕ/г). С такой же частотой (28,6%) регистрировали и E.aerogenus (lg 9±0,2 КОЕ/г).

У 57,1 % новорожденных в фекалиях регистрировали клебсиеллы (lg 5±0,1 КОЕ/г).

Обсуждение

На формирование микроценоза толстой кишки новорожденных влияет не только микрофлора влагалища, но и толстой кишки беременных, что по данным литературы доказано для лактобактерий [2, 10].

У практически здоровых первородящих беременных наблюдаются дисбиотические сдвиги в микрофлоре исследуемых биотопов, которые протекают субклинически.

Обнаружение микроорганизмов в меконии практически здоровых новорожденных в 60% случаев можно объяснить транслокационным механизмом. Данный механизм не приводит к каким-либо проявлениям внутриутробной инфекции или нарушениям со стороны ЖКТ новорожденных. На 5 сутки жизни у детей, рожденных от практически здоровых первородящих беременных через естественные родовые пути, приложенных к груди в первые сутки и находящихся в палатах «мать-дитя», основные представители резидентной микрофлоры кишечника (бифидо-, лактобактерии, эшерихии, энтерококки) регистрировались в большинстве случаев.

На формирование микробиоценоза новорожденных влияет не только микрофлора влагалища, но и состав интестинальной микрофлоры толстой кишки, что необходимо учитывать при обследовании женщин во время беременности.