Влияние монохромного красного света на клеточные факторы противоопухолевой защиты
Автор: Шейко Е.А., Златник Е.Ю., Закора Г.И.
Журнал: Сибирский онкологический журнал @siboncoj
Рубрика: Материалы конференции
Статья в выпуске: S2, 2009 года.
Бесплатный доступ
Короткий адрес: https://sciup.org/14055491
IDR: 14055491
Текст статьи Влияние монохромного красного света на клеточные факторы противоопухолевой защиты
Материал и методы. Лимфоциты выделяли в градиенте плотности фиколл-верографина (ρ=1,078) из проб периферической венозной крови 7 первичных больных местнораспространенным раком легкого и у них же после проведения противоопухолевого лечения. Воздействие на взвесь лимфоцитов осуществляли с помощью аппарата «Спектр ЛЦ», в непрерывном режиме (λ=0,67 мкм), дозой W=3,06 Дж/см2. В облученных и необлучен-ных (контрольных) пробах изучали пролиферативную активность лимфоцитов в реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) путем 72-часового культивирования лимфоцитов в полной культуральной среде в присутствии 5 мкг Т-клеточного митогена ФГА (стимулированная проба) и без митогена (спонтанная проба), после чего в фиксированных и окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках подсчитывали процент бласттрансформированных клеток. Изучали синтетическую активность лимфоцитов методом люминесцентно-спектрального анализа по Карнаухову. Цитотоксическую активность естественных киллерных клеток (ЕКК) определяли в цитотоксическом тесте (ЦТТ) при соотношении эффектор:мишень 40:1. В качестве клеток-мишеней использовали культуру клеток эритромиелобластного лейкоза человека К562. Учет теста проводили путем подсчета процента погибших (окрасившихся трипановым синим) клеток-мишеней и вычисляли индекс цитотоксичности (ИЦ) по формуле: ИЦ=(О-К)/К, где О (опыт) – % погибших клеток-мишеней в присутствии клеток-эффекторов; К (контроль)
– % погибших клеток-мишеней в присутствии среды. Кроме того, проводили оценку индекса апоптоза клеток мишений.
Результаты исследования показали статистически достоверное повышение как спонтанной (в 1,4 раза), так и ФГА-индуцированной (в 1,3 раза) РБТЛ. Спектр люминесценции после облучения лимфоцитов монохромным СДИ представлен уже двумя максимумами в красной и зеленой полосе излучения, причем преобладающим становился максимум красной полосы спектра, связанной с присутствием в клетке РНК. Данные, полученные в ЦТТ, свидетельствуют о том, что после облучения происходит увеличение процента гибели клеток-мишеней и возрастание ИЦ; значения обоих показателей статистически достоверно выше, чем в контрольных пробах (без СДИ). Следует отметить, что ИЦ облученных лимфоцитов, взятых у больных после лечения, статистически значимо повышается по сравнению с исходными. Индекс апоптоза до лечения при действии лимфоцитов на клетки опухоли был в 1,2 раза выше контроля, а после лечения – в 2,1 раза. Проапоптогенный потенциал облученных лимфоцитов, взятых в оба срока исследования, увеличивался под действием СДИ: до начала лечения он превышал таковой необлученных лимфоцитов в 4 раза, а после окончания лечения – в 7,86 раза.
Выводы. Полученные результаты говорят о том, что проведенное воздействие СДИ красного спектра на лимфоциты крови больных раком легкого, проявило себя как фактор, стимулирующий их функциональное состояние, способствующий повышению их пролиферативной активности, а также цитотоксичности ЕКК, что проявляется в статистически достоверном усилении их повреждающего эффекта на культуру опухолевых клеток К562 in vitro, одним из механизмов реализации которого служит апоптоз.
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2009. Приложение № 2