Влияние некоторых технологических аспектов in vitro на дедифференциацию неоплодотворенных семязачатков ярового рапса (Brassica napus L.)

Цель исследования – изучение влияния стадии развития (размеров), времени обработки бутонов пониженными положительными температурами и генотипа донорного образца на дедифференциацию каллуса из неопыленных семязачатков ярового рапса. Задачи исследования: ввести в культуру in vitro изолированные семязачатки и определить частоту дедифференциации эксплантов на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга (MS) с добавлением регуляторов роста 2,4-Д (2-4 дихлорфеноксиуксусная кислота) и кинетина по 5,0 мг/л. В качестве объектов исследования использовали неопыленные семязачатки восьми гибридных образцов ярового рапса. Образцы 1 и 2 формировали каллусную ткань с частотой 2,6 и 2,5 % соответственно. Семязачатки, изолированные из бутонов изучаемых размеров (2,0; 4,0; 6,0 мм), отличались частотой дедифференциации каллуса от 11,59 до 16,95 %. Семязачатки, изолированные из бутонов размером 6,0 мм, были наиболее компетентны к каллусообразованию и формировали каллус с максимальной частотой 16,95 %. Обработка соцветий в течение 24, 36 и 60 ч пониженными температурами 4±1 оС не оказывает положительного влияния на формирование каллусной ткани из семязачатков. Частота дедифференциации снижается с 7,29 % без обработки бутонов до 1,24 % при 60-часовой обработке. Результаты культивирования семязачатков на инициальной питательной среде показали, что частота дедифференциации у изучаемых генотипов ярового рапса варьировала от 0,2 (обр. 188) до 2,6 % (обр. 1). Семязачатки, изолированные из донорных растений, полученных с использованием культуры тканей, индуцировали каллусную ткань с частотой 15,57 %. Вторичные структуры и проростки получили на среде МS с добавлением 6-БАП (6-бензиламинопурин) – 0,5 мг/л и кинетина – 3,0 мг/л. Полученные результаты свидетельствуют о влиянии предобработки, размера бутонов и генотипа донорного растения на частоту дедифференциации семязачатков ярового рапса.