Влияние применения геля с трекрезаном при лечении гнойных ран на показатели перекисного окисления липидов

Введение . Необходимым звеном жизнедеятельности любой клетки является пероксидное окисление липидов (ПОЛ). Данный механизм лежит в основе обновления и перестройки биологических мембран, регуляции их состава, проницаемости и активности мембраносвязывающих ферментов [5]. ПОЛ - это физиологический процесс, обеспечивающий в организме фаго- и пиноцитоз, синтез простагландинов, лейкотриенов, холестерина, прогестерона [11]. Усиление этого процесса ведет к образованию избыточного количества свободных радикалов, что нарушает состояние клеточных мембран и коллоидное состояние протоплазмы. Ведущую роль в запуске перекисного окисления липидов играют первичные свободные радикалы (кислород и его активированные формы). При перекисном окислении липидов окислительным превращениям подвергаются полиненасыщенные жирнокислотные фосфолипиды, нейтральные жиры и холестерин, которые являются основными компонентами клеточных мембран. Их повреждение снижает эффективность окислительного фосфорилирования (тканевого дыхания) [1]. При этом активные формы кислорода повреждают структуру ДНК, белков и различные мембранные структуры клеток. В результате появления в гидрофобном слое мембран гидрофильных зон за счёт образования гидропероксидов жирных кислот в клетки могут проникать вода, ионы натрия, кальция, что приводит к набуханию клеток, органелл и их разрушению [12]. Такие патологические изменения часто встречаются в гнойных воспалениях в области суставов животных и человека.

Основными принципами медикаментозного лечения гнойного воспаления соединительной ткани являются этиотропная терапия, воздействующая антибиотиками на возбудителей заболевания, и патогенетическая терапия, направленная на предупреждение интоксикации, резистентности организма, а также симптоматическая терапия [2, 9, 18].

Иммунопатогенетические механизмы гнойного воспаления соединительной ткани требуют поиска новых эффективных средств коррекции нарушений иммунного статуса. Считается, что для активации иммунитета наиболее целесообразным является применение иммуномодуляторов, воздействующих на клетки моноцитарно-макрофагальной системы, вызывая быструю активацию естественного хода развития иммунного ответа. Кроме того, элиминация большинства патогенных клеток из организма в конечном итоге осуществляется клетками фагоцитарной системы [10, 15, 19].

В настоящее время одним из перспективных иммуномодуляторов с широкой фармакологической активностью является трекрезан. Этот препарат разработан в Иркутском институте органической химии РАН, его доклинические и клинические испытания проходили в Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова и Институте гриппа (Санкт-Петербург). Он обладает выраженным адаптогенным и иммуностимулирующим действием, а также антиоксидантной активностью [6, 7, 8, 16, 20].

Цель исследований . Изучение системы ПОЛ при лечении гнойного воспаления в области тарсально-го сустава коров гелем с 10 %-м трекрезаном.

Материалы и методы исследований . Исследования проводили в условиях сельскохозяйственного акционерного общества закрытого типа (САОЗТ) «Всеволожский» в период июня-июля 2014 года. Материалом исследований являлась сыворотка крови крупного рогатого скота (коров).

Контрольной группой служили коровы с гнойными ранами в области тарсального сустава, которых лечили мазью «Левомеколь» (n=19), подопытная группа – животные с лечением аналогичной патологии гелем с 10 %-м трекрезаном (n=24).

Салфетки с гелем накладывали на рану, первые три дня в гель ежедневно добавляли 10 %-й водный раствор трекрезана, в дальнейшем 1 раз в три дня с целью поддержания объема лекарственной формы. Контролем служили коровы, больные гнойным бурситом, которых лечили наложением компресса с мазью «Левомеколь» (препарат сравнения) на поражённый сустав (меняли 1 раз в два дня). Контрольные исследования крови проводили через 15 дней от начала лечения.

ПОЛ оценивали по содержанию в крови коньюгированных диенов и кетодиенов, малонового диальдегида, интенсивности синтеза оксида азота, в сыворотке крови – по уровню флуоресцирующих оснований Шиффа на спектроколориметре «Spekol-210» (Германия).

Статистическую обработку полученных данных проводили в рамках программы Statistica for Windows 6.0. Результаты исследования анализировали путем вычисления средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (м), достоверности различий (Р).

Результаты исследований и обсуждение . Результаты исследования показателей перекисного окисления липидов больных коров и животных контрольной и подопытных групп приведены в таблице.

Концентрация продуктов ПОЛ в плазме крови больных коров и животных при лечении гнойных ран гелем с 10 %-м трекрезаном

* Р<0,002 по отношению к больным животным.

По данным таблицы, у животных групп с лечение мазью «Левомеколь» и гелем с 10 %-м трекрезаном выявлено достоверное снижение оснований Шиффа с 0,46±0,04 до 0,39±0,03 и 0,32±0,01 усл. ед/мл соответственно. Одновременно у коров под действием геля с 10 %-м трекрезаном достоверно снижался уровень диеновых конъюгатов (с 0,91±0,01 до 0,68±0,007 ед. оп.пл/мл) и малонового альдегида (с 5,28±0,06 до 2,71±0,07 мкМ/л). При применении мази «Левомеколь» исследованные показатели достоверно не изменялись.

Усиление ПОЛ вызывает комплекс патологических явлений, называемых «окислительным стрессом», который считается основным компонентом в развитии ряда заболеваний и естественном старении организма. Действию системы свободнорадикального окисления противостоит мощная многокомпонентная АОС. Она выполняет защитную функцию, надежно ограничивая ПОЛ на всех этапах. Ослабление любого ее звена активирует ПОЛ [3, 17].

В результате окисления липидов в эритроцитах формируется малоновый диальдегид (МДА), содержание которого коррелирует с уровнем ПОЛ. Образующийся в процессе перекисного окисления липидов малоновый диальдегид является мутагеном и обладает выраженной цитотоксичностью.

Окисление липидных молекул под действием активных форм кислорода приводит к необратимому повреждению мембранных структур, нарушению их проницаемости и гибели клеток. В зонах наибольшей ак- тивности перекисного окисления мембранных фосфолипидов возникают каналы пассивной проницаемости, через которые свободно проходят ионы и вода [3, 12].

Диеновые конъюгаты, являющиеся первичными продуктами ПОЛ, относятся к токсическим метаболитам, которые оказывают повреждающее действие на липопротеиды, белки, ферменты и нуклеиновые кислоты. Дальнейшими продуктами ПОЛ являются альдегиды и кетоны (малоновый диальдегид и др.), которым принадлежит важная роль в синтезе простагландинов, прогестерона и других стероидов. Взаимодействием диальдегидов со свободными группами мембранных соединений образуются конечные продукты ПОЛ (основание Шиффа и др.), непрерывное накопление которых дестабилизирует мембраны и способствует деструкции клеток [5].

Согласно существующим сегодня представлениям [14], в механизме ПОЛ радикал кислорода атакует двойные связи ненасыщенных жирных кислот мембранных липидов, что способствует формированию гидроперекисей жирных кислот, которые оказывают токсическое воздействие на структурные и каталитические белки, нарушая ионтранспортные процессы и рецепторы клетки. Результаты этих исследований свидетельствуют о том, что при развитии ДБСТ возникает цепь патохимических процессов ПОЛ, и появляющиеся биологически активные липидные метаболиты нарушают транспорт ионов, особенно Са2+ [4]. В настоящее время повышенную активность физиологической антиоксидантной системы и интенсификацию процессов ПОЛ рассматривают как естественный адаптационно-компенсаторный процесс, поскольку гидроперекиси являются активаторами синтеза простагландинов, в частности, простациклин тромбоксиновой системы, столь важной в поддержании тромбоцитарно-сосудистого гемостаза.

Считают, что усиление процессов ПОЛ происходит в основном за счет пероксидации липидов мембран и липопротеидов плазмы [17]. Увеличением концентрации МДА как конечного продукта ПОЛ указывают на его участие в гнойной воспалительной реакции.

Образующиеся свободные радикалы кислорода ответственны за развитие воспалительного процесса с последующим жировым перерождением и замещением фиброзной тканью. Свободные радикалы способны повреждать ДНК клеток соединительной ткани, вызывая прогрессирование деструктивного процесса [13].

Повышение ПОЛ в крови при гнойном воспалении сопряжено с усилением данных процессов, о чем свидетельствует их значительное повышение в крови. Усиление ПОЛ может являться дополнительным патофизиологическим фактором, приводящим к повреждению ткани тарсального сустава.

Заключение . Полученные данные указывают на включение обеих звеньев – снижение перекисного окисления липидов и возрастание активности ферментов антиоксидантной защиты. Это приводит к нормализации мышечного тонуса, тканевого дыхания и электрической стабильности липидного бислоя мембран. Данные процессы более активно происходят при применения геля с трекрезаном с целью лечения гнойных ран в области тарсального сустава коров, что свидетельствует об его эффективности при данной патологии у животных.