Влияние разных доз пробиотика «Тетралактобактерин» на морфобиохимические характеристики гомеостаза телят

Целью эксперимента было установление влияние разных доз пробиотика «Тетралактобактерин» на морфо-биохимические характеристики гомеостаза телят.

Материалы и методика исследований. Для решения поставленной задачи в учебно-опытном хозяйстве Брянской ГСХА «Кокино» были сформированы по методу аналогов и периодов (по мере рождения) 3 группы телят черно-пестрой породы по 5 голов в каждой. Животные 1 группы были контрольными, телята 2 группы получали с молозивом, а затем с молоком один раз в сутки по 5 мл/гол, а 3 группы – по 10 мл/гол препарата молочнокислых бактерий «Тетралактобактерин» с суточного возраста в течение 20 суток. Препарат был предоставлен заведующим лабораторией микробиологии ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных Б.В. Таракановым и содержал 4 млрд/мл живых лактобактерий. Телята содержались в соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям условиях, получали молозиво, а затем молоко в соответствии с общепринятыми нормами [4]. Кровь для исследований брали из яремной вены утром до кормления в 1- и 21-суточном возрасте. В 21-суточном возрасте, после окончания выпаивания телятам 2 и 3 групп препарата, у 3 телят из каждой группы брали пробы фекалий (при вынужденной дефекации) для анализа микробиоценоза кишечника. Контроль живой массы подопытных телят проводили с помощью ленты для измерения живого веса молочных коров и телят ООО «Сельская консультативная служба» (г. Рязань).

Количество лейкоцитов и эритроцитов в крови подсчитывали в камере Горяева, лейкоцитарную формулу - в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (на трех стеклах, по 600 клеток на каждом, используя трехпольный метод Филипченко).

Гемоглобин определяли гемиглобинцианидным методом, СОЭ – в аппарате Панченкова, гематокрит -в гематокритной центрифуге. Анализ качественного и количественного состава микробиоты толстого кишечника проводился в аккредитованном испытательном лабораторном центре ФГУ здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии Брянской области».

Полученные цифровые данные обработаны методом вариационной статистики. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента-Фишера по Н.А. Плохинскому [5]. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе [6, 7, 8, 9].

Результаты и их обсуждение. Анализ полученных результатов показал, что гематокрит, количество лейкоцитов, эритроцитов и гемоглобина в крови у телят подопытных групп в оба исследованных возрастных периода соответствовали нормативным значениям без существенных межгрупповых различий (табл. 1). СОЭ у 1-суточных телят была низкой, через 20 суток она несколько повышалась, но без достоверной значимости. Это может быть связано с малым количеством защитных белков в крови, низкими адгезивными свойствами эритроцитов в эти возрастные периоды или анизоцитозом эритроцитов, что замедляет формирование монетных столбиков [10]. В мазках крови подопытных телят анизоцитоз эритроцитов наблюдался в значительной степени. Содержание палочкоядерных нейтрофилов в крови у 1-суточных телят подопытных групп было несколько ниже нормативных значений, к 21-суточному возрасту у телят 1, 2 и 3 групп отмечена тенденция к снижению числа этих клеток на 42,27, 46,08 и 30,99% соответственно, что свидетельствует о недостаточности костномозгового нейтрофилопоэза. Выпаивание телятам «тетралактобактерина» не оказало влияния на этот процесс. Относительное содержание сегментоядерных нейтрофилов и суммы нейтрофилов всех ядерных форм в крови у телят подопытных групп в оба исследованных периода соответствовало нормативным значениям без существенных межгрупповых различий. Уровень эозинофилов в крови у 1-суточных телят подопытных телят соответствовал нормативным значениям, а через 20 суток снижался, что косвенно указывает на повышение функциональной активности коры надпочечников [11, 12]. При этом достоверно значимое снижение содержания этих клеток было только у телят 2 группы (на 80%). Следовательно, выпаивание тетралактобактерина в дозе 5 мл/гол в течение 20 суток вызвало повышение активности коры надпочечников.

Количество базофилов в крови у 1-суточных телят подопытных групп соответствовало норме и существенно не различалось. Через 20 суток у телят контрольной и опытных групп отмечены противоположные тенденции в изменении уровня этих клеток: у животных 1 группы – тенденция к снижению их числа на 63,83%; у телят 2 и 3 групп – к увеличению на 114,28 и 68% соответственно. Имеются сведения [12, 13, 14], что увеличение в крови базофилов является следствием понижения функциональной активности щитовидной железы и наоборот. Следовательно, выпаивание тетралактобактерина в дозе 5 и 10 мл/гол в течение 20 суток вызвало тенденцию к снижению активности щитовидной железы.

Содержание моноцитов в крови у 1-суточных телят подопытных групп существенно не различалось и соответствовало наиболее высоким значениям физиологической нормы. Через 20 суток у животных 1, 2 и 3 групп отмечена тенденция к снижению числа этих клеток в крови на 13,44, 31,49 и 51,61% соответственно. Относительное количество лимфоцитов в крови 1- и 21-суточных телят соответствовало нормативным значениям без существенных межгрупповых различий. При этом установлено достоверное повышение числа этих клеток на 23,65% в крови у 21-суточных телят контрольной группы по сравнению с 1-суточным возрастом, у животных 2 и 3 групп отмечена только тенденция к повышению – на 27,05 и 7,63% соответственно.

Таблица 1 – Морфо-биохимические показатели крови, характеризующие гомеостаз телят

Показатели	Группы	На 1 сутки жизни	На 21 сутки жизни
Гематокрит, %	1, n=5	36,00±3,36	34,40±1,50
	2, n=5	38,20±3,73	35,00±3,41
	3, n=5	33,4±3,06	30,40±2,11
Гемоглобин, г/л	1, n=5	107,90±10,86	108,20±4,41
	2, n=5	104,30±12,29	106,00±14,35
	3, n=5	99,60±8,21	97,60±5,82
СОЭ, мм/час	1, n=5	0,90±0,01	1.20±0,02
	2, n=5	0,80±0,02	1.10±0,02
	3, n=5	0,90±0,01	1.20±0,02
Эритроциты, 1012/л	1, n=5	6,89±0,66	7,83±0,38
	2, n=5	7,43±0,42	8,56±0,75
	3, n=5	6,39±0,79	7,21±0,55
Лейкоциты, 109/л	1, n=5	9,61±1,26	8,46±0,59
	2, n=5	8,50±1,00	8,21±1,38
	3, n=5	7,58±0,49	7,97±0,59
Палочкоядерные нейтрофилы, %	1, n=5	9,25±0,89	5,34±1,51
	2, n=5	12,37±3,46	6,67±1,70
	3, n=5	10,97±2,12	7,57±1,42
Сегментоядерные нейтрофилы, %	1, n=5	32,57±2,10	27,08±2,78
	2, n=5	33,67±5,23	23,79±4,40
	3, n=5	28,86±5,94	29,47±3,78
Сумма нейтрофилов, %	1, n=5	39,82±1,55	29,48±2,74
	2, n=5	43,84±8,63	30,47±6,07
	3, n=5	38,12±7,89	36,98±5,19
Эозинофилы, %	1, n=5	0,93±0,48	0,70±0,62
	2, n=5	0,35±0,07	0,07±0,03▲
	3, n=5	0,73±0,50	0,30±0,12
Базофилы, %	1, n=5	0,47±0,17	0,17±0,04
	2, n=5	0,14±0,11	0,30±0,06
	3, n=5	0,25±0,11	0,42±0,14
Моноциты, %	1, n=5	3,05±0,56	2,64±1,03
	2, n=5	3,62±1,12	2,48±0,94
	3, n=5	2,48±1,01	1,20±0,20
Лимфоциты, %	1, n=5	53,7±2,49	66,40±1,87▲
	2, n=5	52,38±8,20	66,55±6,00
	3, n=5	56,75±7,31	61,08±5,20

Примечание: ▲ - Р<0,05 по отношению к предыдущему исследованию.

В результате анализа количественного содержания различных представителей микробиоценоза у телят через 20 суток опытного периода (табл. 2) установлено, что у 21-суточных телят всех подопытных групп содержание бифидобактерий в пробах фекалий соответствовало нормативным значениям, а лактобактерий было значительно ниже.

Выпаивание препарата не оказало существенного влияния на содержание в толстом кишечнике телят подопытных групп бифидо- и лактобактерий.

Содержание эшерихий (типичных) у животных всех групп также было ниже нормативных значений, но с тенденцией к повышению их количества в фекалиях у телят, получавших препарат (независимо от дозы) на 16,67 и 5,5% соответственно.

Уровень энтерококков в толстом отделе кишечника у телят 1 группы был несколько ниже нормативных значений, а у телят 2 и 3 групп отмечена тенденция к увеличению их числа на 5,82 и 17,64% соответственно, что обусловило у животных 3 группы соответствие их уровня нормативным значениям.

В фекалиях животных 1 и 3 групп были обнаружены патогенные энтерококки (в 66,67 и 33,33 % случаях соответственно), а телят 2 группы -повышенное количество других условно-патогенных микроорганизмов (в 33,33% случаях). По-видимому, на наличие или отсутствие в кишечнике этих микроорганизмов выпаивание препарата не оказало существенного влияния.

Таблица 2 – Количественное содержание различных представителей микробиоценоза у телят через 20 суток опытного периода, КОЕ lg/r/ частота выделения, %

Наименование микроорганизмов	1 группа	2 группа	3 группа
Бифидобактерии	10,33±0,67 /100	9,33±0,88 /100	9,67±0,67 /100
Лактобактерии	5,67±0,67 /100	5,67±0,67 /100	5,00±0,0 /100
Эшерихии: типичные	6,00±0,58 /100	7,00±0,0 /100	4,033±0,67 /100
Лактозонегативные	0	0	0
Гемолитические	0	0	0
Патогенные энтеробактерии	есть/66,67	0	есть /33,33
Бактерии рода Протея	0	0	0
Другие условнопатогенные энтеробактерии	0	6,00±0,0/33,33	0
Энтерококки	5,67±0,67 /100	6,00±0,58 /100	6,67±0,33 /100
Стафилококк золотистый	0	0	0
Коагулаза-негативный стафилококк	0	0	0
Клостридии	0	0	0
Грибы рода Кандида	0	0	0
Дрожжеподобные грибы	0	0	0
Неферментиру ющие бактерии	0	0	0

Через 20 суток опытного периода (по окончании выпаивания животным 2 и 3 групп препарата) живая масса телят 1 группы увеличилась на 20,79%, 2 группы – на 30,00%, 3 группы – на 32,78%. Применение препарата обусловило более высокие, по сравнению с контролем, среднесуточные приросты живой массы за этот период: у телят 2 группы на 26,27% (Р<0,05), 3 группы – на 46,08% (Р>0,05).

Следовательно, выпаивание в течение 20 суток (со дня рождения) препарата в дозах 5 и 10 мл/гол в сутки не вызвало достоверно значимых изменений количественного содержания изученных представителей микробиоценоза толстого кишечника у телят, но обусловило тенденцию к увеличению числа эшерихий (типичных) и энтерококков.

При изучении динамики показателей, характеризующих интенсивность роста подопытных животных (табл. 3), было установлено, что при рождении живая масс телят подопытных групп существенно не различалась.

Таблица 3 – Динамика живой массы и среднесуточных приростов телят

Показатели	Группы	На 1 сутки жизни	На 21 сутки жизни
Живая масса, кг	1, n=5	38,00±0,98	45,90±0,68
	2, n=5	34,00±1,82	44,20±2,26
	3, n=5	36,00±4,22	47,80±4,46
Среднесуточные приросты живой массы, г	1, n=5	-	403,89±22,39
	2, n=5	-	510,00±25,74*
	3, n=5	-	590,00±73,57

Прим.: * - Р<0,05 по отношению к животным 1 группы.

Таким образом, применение при выращивании телят препарата «Тетралактобактерин» в дозе 5 мл/гол с рождения в течение 20 суток обусловило повышение среднесуточных приростов.

Выводы. Ежедневное выпаивание телятам с рождения до 21-суточного возраста пробиотика «Тетралакто-бактерин» в дозах 5 и 10 мл/гол обусловило тенденцию к снижению активности щитовидной железы, на что косвенно указывает повышение уровня базофилов в их крови, и препятствовало повышению числа лимфоцитов к 21-суточному возрасту. Кроме того, выпаивание этого препарата телятам в указанных дозах способствовало оптимизации микробиоценоза толстого кишечника обусловив тенденцию к увеличению числа эшерихий (типичных) и энтерококков.

Ежедневное выпаивание телятам с рождения до 21-суточного возраста пробиотика «Тетралакто-бактерин» в дозе 5 мл/гол вызвало повышение функциональной активности надпочечников, о чем косвенно свидетельствует снижение в крови у телят числа эозинофилов, и повышение среднесуточных приростов живой массы на 26,27%.

Благодарность. Авторы выражают благодарность доктору биологических наук, профессору лаборатории микробиологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» Тараканову Борису Васильевичу, предоставившего пробиотик «Тетралактобактерин» для исследования.

Литература. 1. Субботин, В.В. Основные элементы профилактики желудочно-кишечной патологии новорожденных животных/ В.В. Субботин, М.А. Сидоров. // Ветеринария. - 2004. - №1.- С. 3-6.

• 2.    Бондаренко, В. М. Дисбактериозы кишечника у взрослых/ В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева, Т.В. Мацулевич // КМК Scientific Press. М., 2003. - С. 224.

• 3.    Воробьев, А. А. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками/ А.А. Воробьев, В. М.Бондаренко, Е. А. Лыкова // РЖГГК. – 2004. – № 4. – С. 13–17.

• 4.    Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие. / под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В.Щеглова, Н.И. Клейменова: 3-е изд. перераб. и доп. – М.: Агропромиздат, 2003. – 456 с.

• 5.    Плохинский, Н.А. Биометрия. / Н.А. Плохинский – Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. – 362 с.

• 6.    Чумаченко, В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных / В.Е. Чумаченко, А.М. Высоцкий, Н.А. Сердюк, В.В. Чумаченко - Киев: Урожай, 1990.-136 с.

• 7.    Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: Справочник / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко и др.; Под ред. И.П. Кондрахина. – М.: КолосС., 2004. – 520 с.

• 8.    Малахов, А.Г. Нормативы биохимических показателей обмена веществ в организме крупного рогатого скота. / А.Г. Малахов, Р.Х. Кармолиев, А.Г. Савойский и др.: Под ред. А.Г. Малахова. – М.: МВА, 1986. – 28 с.

• 9.    Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных. / И.М. Карпуть. -Минск: Ураджай, 1986.- 183 с.

• 10.    Назаренко, Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. / Г.И. Назаренко, А.А. Кишкун. - М.: Медицина,2002. – 544 с.

• 11.    Бузлама, В.С. Общая резистентность животных при стрессе и ее регуляция адаптогенами. / В.С. Бузлама. // Доклады Россельхозакадемии, 1996.-№ 1.- С. 36-38.

• 12.    Исследование системы крови в клинической практике. / Под ред. Г.И.Козинца и В.А. Макарова. -М.: Триада-Х, 1998.– 480 с.

• 13.    Кудрявцев, А.А. Клиническая гематология животных. / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. - М.: Колос, 1974.- 399 с.

• 14.    Мышкин, К.И. Базофильные лейкоциты / К.И. Мышкин. - Саратов, 1979. – 125 с.

УДК 619 : 618:615.37:636.2

Д.В. Попов, аспирант

Н.В. Безбородов, доктор биологических наук

Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина

ПОВЫШЕНИЕ КАЧЕСТВА ЭМБРИОПРОДУКТИВНОСТИ У КОРОВ-ДОНОРОВ ЭМБРИОНОВ

Для повышения качества эмбриопродуктивности коров-доноров эмбрионов к стандартной схеме гормональной индукции суперовуляции рекомендуется дополнительное в/мышечное введение на 0-5 сут спонтанного полового цикла 0,01% раствора глутаминовой кислота и триптофана (тимоген) в дозе 20 мл/гол/сут.

У крупного рогатого скота одним из основных лимитирующих факторов успешного развития и применения метода трансплантации, является высокая степень нарушений репродуктивной функции (до 40%). Ограничением возможностей трансплантации зародышей является также низкая оплодотворяемость яйцеклеток и отклонения в их развитии после оплодотворения. Исследованиями отмечено [1], что высокий уровень стельности бывает при точной синхронизации дней половой охоты у донора и реципиента. Согласно авторов исследований допустимые различия могут составлять до ±2 дня. В дальнейшем эти сроки были пересмотрены и многочисленными исследованиями показано, что отклонения в +1 день оказывает достаточно серьезное значение на приживляемость в последующем эмбрионов у реципиента [2]. Установлено, что уровень стельности 44

In order to improve the quality of embryo productivity of embryo-donor cows, to the standard scheme of hormonal induction of superovulation the additional intramuscular introduction of 0,01% solution of glutamine acid and tryptophan (timogen) in 20 ml/head/day dose on the 0-5 day of spontaneous sexual cycle is recommended.

Целью исследований было выявление эффективности применения синтетического иммуномодулятора тимогена при синхронизации феноменов половой цикличности во время индукции суперовуляции у коров-доноров эмбрионов и его влияние на стадию развития эмбрионов.

Материалы и методика исследований.

Исследования были выполнены на поголовье коров