Возможности диагностики и дифференциальной диагностики заболеваний желудка с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии сыворотки крови

Хроничес^ий ^астрит является одним из наиболее часто встречающихся заболеваний, что ставит е^о в ряд важных меди^о-социальных проблем пра^тичес-^о^о здравоохранения. Нар^шение процессов пролиферации и дифференциров^и железисто^о эпителия в слизистой оболоч^е [1, 6] при хроничес^ом ^астри-те является начальным этапом формирования ра^а жел^д^а [7], ^оторый стабильно остается на втором месте в стр^^т^ре он^озаболеваемости ^ м^жчин – 16,5%, и на третьем ^ женщин – 13,3%. В стр^^т^ре смертности ^ м^жчин ра^ жел^д^а занимает второе место – 19,0%, а ^ женщин первое – 19,3% [10].

Диа^ности^а хроничес^о^о ^астрита и ра^а жел^д-^а основывается на данных ^линичес^о^о обследования больных, рез^льтатах лабораторных и инстр^-ментальных методов. Основными инстр^ментальны-ми методами являются рент^еноло^ичес^ий, эндос-^опичес^ий и морфоло^ичес^ий. Для ^становления ^линичес^о^о диа^ноза хроничес^о^о ^астрита необходимо эндос^опичес^ое исследование. У больных ра^ом жел^д^а диа^нозы ставились на основании данных ^лини^о-рент^еноло^ичес^о^о и эндос^опичес-^о^о исследований. Верифи^ация диа^ноза проводилась с помощью ^истоло^ичес^о^о метода. Одна^о общепринятая во всем мире схема диа^ности^и ра^а жел^д^а [5] о^азалась неэффе^тивной [10] в связи с длительным бессимптомным течением заболевания или с е^о развитием на фоне хроничес^о^о ^астрита .

В ^ачестве одно^о из возможных направлений в лабораторной диа^ности^е хроничес^о^о ^астрита и ра^а жел^д^а нами были из^чены особенности по^а-зателей высо^оэффе^тивной жид^остной хромато^-рафии (ВЭЖХ) сыворот^и ^рови.

ВЭЖХ является современным высо^оточным ана-литичес^им методом, позволяющим проводить разделение и анализ ^омпонентов в сложных биоло^и-чес^их смесях [4]. Она ^же с ^спехом применяется для диа^ности^и не^оторых заболеваний [3].

В ^ачестве объе^та исследования нами была выбрана сыворот^а ^рови, ^а^ наиболее дост^пный материал, нес^щий в себе ма^симально возможн^ю информационн^ю на^р^з^^ о состоянии систем и ор-^анов челове^а [9].

Цель исследования: из^чить возможность использования высо^оэффе^тивной жид^остной хро-мато^рафии для диа^ности^и и дифференциальной диа^ности^и хроничес^о^о ^астрита и ра^а жел^д^а , определить ч^вствительность и диа^ностичес^^ю точность метода.

Материалы и методы. В проведенном исследовании ^частвовали 62 пациента с хроничес^им ^аст-ритом, 89 больных ра^ом жел^д^а и 43 челове^а ^он-трольной ^р^ппы. Все пациенты были разделены на ^р^ппы по пол^ и по возраст^ (до 55 лет и старше). Разделение по возраст^ проведено для повышения точности диа^ности^и с ^четом возрастных изменений в ор^анизме.

В исследование в^лючались больные с ^истоло-^ичес^и верифицированным диа^нозом, не в^люча-лись больные с соп^тств^ющей патоло^ией в стадии де^омпенсации или обострения. Наиболее часто встречающиеся соп^тств^ющие заболевания ^ в^лю-ченных в исследование больных были: сердечно-сос^дистые заболевания – ^ 88 лиц, анемии различ-но^о ^енеза – ^ 48 больных, заболевания мочеполовой системы – ^ 18 челове^, заболевания бронхоле-^очной системы – ^ 16 челове^.

Забор ^рови проводился ^ пациентов натоща^ из вены в ^оличестве 5-10 мл. Пол^ченная сыворот^а (не менее 2 мл) выс^шивалась при 25°С до состояния с^хой ^ороч^и и перемалывалась до состояния ^омо^енно^о порош^а. Далее бралась навес^а порош-^ообразной сыворот^и в ^оличестве 40 м^ и проводилась э^стра^ция 85% метанолом – 200 м^л в течение 45 мин^т. После осаждения ^р^пно- и среднемо-ле^^лярных бел^ов проводилось центриф^^ирование смеси при ^с^орении 12000 об/мин с послед^ющим отбором надосадочной жид^ости. Пол^ченный та^им образом э^стра^т сыворот^и ^рови подвер^ался хро-мато^рафичес^ом^ исследованию.

При анализе использовалась стандартная методи-^а исследования на хромато^рафе «Милихром А-02» (ЗАО «Э^онова», Новосибирс^). Современные жид-^остные хромато^рафы на ми^ро^олон^ах типа «Ми-лихром А-02» представляют собой аналитичес^ий ^омпле^с ф^н^ционально объединенных ^стройств , обеспечивающих разделение жидких смесей, детектирование, идентификацию и количественный учет компонентов смеси. Контрольная программа встро-енно^о в спе^трофотометр ^омпьютера не доп^с^ает неправильных и несовместимых параметров, обеспечивая автоматический набор пробы, спектрофотометрическое детектирование, объективность и высокую точность анализов. Статистическая обработка массива хроматограмм выполнялась на основе многоуровневого кластерного анализа с формированием трехмерно^о образа нормы или патоло^ичес^о^о состояния при помощи специальной ^омпьютерной программы [8].

Клиничес^ая ^артина ^ больных с поражением жел^д^а была весьма разнообразной и в^лючала в себя набор характерных синдромов. Частота встречаемости клинических проявлений у больных с хро-ничес^им ^астритом и ра^ом жел^д^а представлена в табл. 1 и 2.

Лабораторные данные при ^астрите и ра^е жел^д^а не отличались высокой специфичностью, однако позволяли заподозрить наличие заболевания. Особо “чувствительными” являлись такие лабораторные показатели, как повышение СОЭ - 65,8% и анемиза-ция различной степени тяжести - 24,19%.

Тем не менее большинство лабораторных признаков заболевания появлялись на запущенных стадиях онкопроцесса или у больных с выраженным ат-рофичес^им ^астритом и не позволяли проводить раннюю и точную диагностику указанных заболеваний в силу низкой специфичности.

После выполнения анализа сыворот^и ^рови ^ пациентов методом ВЭЖХ и статистичес^о^о анализа рез^льтатов пол^ченных хромато^рамм при помощи многомерного дискриминантного анализа установлены диагностические показатели и критерии диагностики и дифференциальной диагностики для пациентов с хроничес^им ^астритом и ра^ом жел^д^а для каждой возрастной группы.

Выводы:

Таблица 1

Частота проявления основных ^линичес^их синдромов ^ больных с хроничес^им ^астритом

Таблица 2

Частота проявления основных ^линичес^их синдромов ^ больных с ра^ом жел^д^а

Таблица 3

Рез^льтаты статистичес^о^о анализа диа^ности^и межд^ ^р^ппой пациентов с хроничес^им ^астритом и ра^ом жел^д^а при помощи ВЭЖХ в возрастной ^р^ппе до 55 лет ^ женщин

ВЭЖХ-спе^трометричес^ие образы хроничес^о^о ^астрита (вниз^) и ра^а жел^д^а (наверх^)