Возможности использования травы будры плющевидной (Glechoma hederaceae L.) для получения лекарственных препаратов

Попова Ольга Ивановна, доктор фармацевтических наук, профессор кафедры фармакогнозии. E-mail: beegeeslover@ mail.ru комплексных фитокомпозиций и экстракционных препаратов, так как в них возможно суммирование и потенцирование биологической активности [5-7]. Известно, что это связанно с профилем растворения определенных веществ, входящих в состав лекарственного препарата [8].

Ранее при изучении химического состава надземной части будры плющевидной были обнаружены следующие группы БАВ: фенольные соединения (флавоноиды, дубильные вещества, иридоиды), получено эфирное масло из травы будры плющевидной, определено его количественное содержание – 0,06%, а также макро- и микроэлементы. Кроме того, нами были определены биометрические характеристики будры плющевидной в естественных условиях местообитания [9]. Данные химического анализа основных групп БАВ травы будры плющевидной позволили предположить возможность использования данного растения в качестве антимикробного средства. Поэтому была определена цель исследования.

Цель исследований: определить антимикробную активность извлечений из травы будры плющевидной для обоснования практического использования сырья.

Объекты и методы. Объектом исследования служила трава будры плющевидной (Glechoma hederaceae L.), собранная в период цветения в мае 2012 г. в трех районах Ставропольского края (Минераловодский, Георгиевский, Андроповский). Собранное сырье высушивали методом воздушной сушки и измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 5 мм. Влажность высушенной травы будры плющевидной составила 9,7±0,2%. Водное извлечение (отвар) готовили в соотношении сырье: вода (1:5) по методике ГФ XI. Спиртовое извлечение получали методом ремацерации, используя спирт этиловый 40% в соотношении сырье: экстрагент (1:5). Содержание экстрактивных веществ в водном извлечении из травы будры плющевидной составило 8,45%, в спиртовом - 26,99%. Методами хроматографического анализа (бумажная хроматография (БХ), тонкослойная ТСХ, ВЭЖХ) в спиртовом извлечении идентифицированы флавоноиды (рутин, гиперозид, кверцетин), гидроксикорич-ные кислоты (хлорогеновая, кофейная кислоты) [10], а также компоненты эфирного масла (метод ГЖХ) – ментол, цитраль, пулегон. В водном извлечении идентифицированы лютеолин-7-гликозид, рутин. Содержание дубильных веществ в водном извлечении составило 3,433,50%, в спиртовом 4,21-4,375%.

Определение антимикробного действия извлечений проводили методом диффузии в агар согласно ГФ XII [11]. Метод основан на оценке угнетения роста тест- микроорганизмов определенными концентрациями испытуемого средства. Для проверки антимикробного действия использовали 24-часовые тест-культуры, выращенные на скошенном мясо-пептоном агаре (МПА). Микробные культуры с МПА смывали 2-3 миллилитрами физиологического раствора и готовили взвесь, содержащую 500 млн. микробных тел в 1 мл по стандарту мутности. На поверхность агара в чашках Петри одинакового диаметра делали посев сплошным газоном стандартных взвесей используемых тест-культур. Для этого 2 мл взвеси помещали в чашку Петри, взвесь равномерно распределяли по поверхности, а излишки взвеси полностью удаляли. Стерильным сверлом диаметром 6 мм делали 9 лунок («колодцев») на расстоянии 2,5 см от центра и на одинаковом расстоянии друг от друга. В колодцы помещали по 0,1 мл испытуемых извлечений (спиртового или водного). Под крышку чашки Петри помещали стерильный фильтр во избежание попадания конденсата на лунки. Все чашки Петри ставили в термостат 37оС на 18-20 часов строго горизонтально для получения круглых зон угнетения роста микрофлоры.

После инкубации диаметр зон угнетения роста измеряли с помощью миллиметровой линейки. Оценка результатов проводилась по диаметру зон задержки роста тест-культур микроорганизмов вокруг «колодца», включая диметр самого «колодца»: 1) отсутствие зоны задержки роста – испытуемая культура не чувствительна к данной концентрации препарата; 2) диаметр зоны задержки роста до 10 мм – умеренная чувствительность культуры к данной концентрации извлечения; 3) диаметр зоны задержки роста более 10 мм – высокая чувствительность испытуемой культуры к данной концентрации излечения.

В эксперименте использовались тест-культуры: 1) Staphylococcus aureus (209); 2) Staphylococcus aureus (Макаров); 3) Staphylococcus aureus (Type); 4) Staphylococcus epidermidis Wood-46; 5) Escherichia coli 675; 6) Salmonella gallinarum; 7)Bacillus anthracoides-96; 8) Bacillus subtilus L 2 ; 9) Pseudomonas aeruginosa

Таблица 1. Антибактериальное действие спиртового и водного извлечений из травы будры плющевидной

Примечание: б/ст – подавление роста микроорганизмов неполное или зона задержки роста непрозрачная

Результаты и обсуждение. Результаты микробиологического исследования показали (таблица 1), что спиртовое извлечение травы будры обладает бактериостатическим действием в отношении грамположительных бактерии рода Staphylococcus и грамотрицательных палочек Escherichia coli 675. В отношении энтеробактерии Salmonella gallinarum, спорообразующих палочек рода Bacillus, Pseudomonas aeruginosa спиртовое извлечение обладает ярко выраженным бактерицидным действием. Это свидетельствует о широком спектре антибактериального действия спиртового извлечения. Водное извлечение травы будры также активно подавляет рост кокковой флоры и Pseudomonas aeruginosa (бактериостатическое действие), но в отношении спорообразующих палочек рода Bacillus и Escherichia coli (представителя нормальной микрофлоры) обнаружено умеренное бактерицидное действие. Менее выраженное антимикробное действие на бациллы у водного извлечения, возможно, связано с разным качественным составом водного и спиртового извлечения. В отношении патогенных энтеробактерий Salmonella gallinarum обнаружено сильное бактерицидное действие, сравнимое с таковым у спиртового извлечения.

Полученные данные по антимикробному действию спиртового и водного извлечений из травы будры плющевидной свидетельствуют о более широком спектре антибактериального действия, чем у препарата сравнения (сок каланхоэ), который подавляет рост только кокковой флоры, не оказывая влияния на рост бацилл, энтеробактерий, синегнойной палочки.

Выводы: антимикробное действие будры плющевидной проявляется за счет входящих в нее БАВ. В спиртовом извлечении антибактериальную активность проявляют фенольные соединения (низкомолекулярные дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты, агликоны флавоноидов, компоненты эфирного масла, иридоиды). Действие водного извлечения проявляется за счет присутствия большого количества флавоноидов и иридоидов в форме гликозидов, а также дубильных веществ с большой молекулярной массой и следов эфирного масла. Полученные данные могут быть использованы для разработки инновационных лекарственных препаратов травы будры плющевидной.