Возможности применения компьютерного анализатора изображения в дифференциальной диагностике гладкомышечных опухолей тела матки

Алтайский филиал РОНЦ им. Н.Н. Блохина, г. Барнаул1 Кафедра патологической анатомии АГМУ, г. Барнаул2

Лейомиома матки – наиболее часто встречающаяся доброкачественная гладкомышечная опухоль. Отмечено, что продукция внеклеточного матрикса (коллагена различного типа) является одним из неотъемлемых элементов, характеризующих синтетическую функцию опухолевых кле- ток. Причем в различных миомах соотношение стромы и паренхимы опухоли значительно варьирует. Одной из рутинных методик определения общего коллагена является окраска пикрофуксином по Ван-Гизону. Однако до сих пор анализ содержания внеклеточного матрикса патологами остается субъективным по принципу «больше-меньше», даже при условии соблюдения иммуногистохимических методик определения типов коллагена. В то же время современные компьютерные анализаторы изображения позволяют максимально объективизировать интерпретацию полученных данных, что может быть полезным в дифференциальной диагностике лейомиом различного гистологического типа и лейомиосаркомы тела матки.

Целью исследования явилось изучение соотношения гладкомышечной ткани и общего коллагена в доброкачественных и злокачественных гладкомышечных опухолях матки по данным компьютерного анализатора изображения.

Материал и методы. Было изучено 16 случаев лейомиом и 8 лейомиосарком различной степени дифференцировки. Клеточные и митотически активные лейомиомы обнаружены в 9 случаях из 16, фибромиом было 10. Гистологические препараты окрашивали пикрофуксином по Ван-Гизону и подвергали компьютерному анализу изображения с помощью программы «Wcif Image J». Полученное изображение обрабатывали с помощью набора plugin, где результаты визуализируются в виде гистограммы и процентном соотношении пикселей красного и желтого цвета (фуксинофильные участки гиалинизированной ткани) и пикринофильные (гладкомышечные клетки). Исследовали не менее 5 полей зрения на малом увеличении (план – объектив 4х), что в совокупности составляло не менее 10 мм2. Кроме того, проводили плоидометрию, подсчет митозов и определение активности рибосомальным генов ядрышка миоцитов по двухступенчатому методу Y. Daskal et al. (1980). В тех случаях, когда часть клеток опухоли на фоне избыточного коллагенообразования сохраняла активность в виде единичных митозов (не более 5 на 10 полей зрения), повышения полиплоидности клеток (до 4с) и увеличения амплификации рибосомальных генов (от 4,23 ± 0,41 до 6,15 ± 0,39 гранул серебра на 1 ядрышко), такую картину трактовали как дисплазию гладкомышечных клеток слабой, умеренной и выраженной степени.

Результаты . Анализ полученных данных показал, что в лейомиоме с выраженной продукцией коллагена (фибромиома, фиброид в зарубежной классификации) соотношение строма – паренхима составило 55,1 ± 1,8, %, т.е. было увеличено в сторону стромального компонента, а гладкомышечные клетки были замурованы в широкие полосы фуксинофильных участков. В части случаев процент гиа-линоза стромы достигал 80 %. В группе клеточных и мито-тически активных лейомиом, в которых имелись морфологические и морфометрические признаки гладкомышечной дисплазии, продукция общего коллагена была достоверно (р<0,05) ниже относительно фибромиом, здесь содержание коллагена составило 35 ± 1,9 %, 23,2 ± 1,2 % и 17,2 ± ±3,1 % соответственно в зависимости от возрастания степени гладкомышечной дисплазии. В участках с наименьшим количеством коллагена атипичные гладкомышечные клетки было окружены лишь очень тонкими фуксинофильными волоконцами. В высокодифференцированных леойо-миосаркомах содержание общего коллагена не превышало 12,8 ± 1,1 %. Кроме того, продукция внеклеточного матрикса по периферии миоматозных узлов в относительно сохранном миометрии также значительно отличалась: по периферии лейомиом количество общего коллагена не превышало 29,2 ± 3,5 %, а по периферии сарком – 38,4 ± 2,7 %.

Таким образом, полученные данные показали, что применение компьютерного анализатора изображения в определении содержания общего коллагена при окраске препаратов по методу Ван-Гизона является высокоточной методикой, достоверно дифференцирующей различные гистологические варианты лейомиом (фибромиома, клеточная и митотически активная лейомиома), и, что особенно важно, может быть полезно в диагностике дисплазий и лейомиосаркомы матки.