Возможности прогнозирования эволюции церебральных глиом на основе исследования уровней экспрессии микроРНК в плазме крови и слюне

В комплексном лечении глиальных церебральных опухолей (ГЦО) особое значение приобретает мониторинг эволюционирования опухоли, способный своевременно верифицировать активизацию опухолевого роста, анапластическую перестройку и прогнозировать дальнейшее течение заболевания. Наряду с известными высокоинформативными способами диагностики и контроля прогрессирования ГЦО с помощью методов нейровизуализации и ПЭТ [1, 2], в последнее время хорошо зарекомендовали себя методики, основанные на исследовании уровней экспрессии различных генов микроРНК в плазме крови [3, 4], позволяющие диагностировать эволюционирование патологического процесса [5, 6] и оценить эффективность специфической терапии [7].

Авторы большинства работ изучают регуляторный вклад конкретной микроРНК в развитие ГЦО. Так, было показано, что для анапластических глиом характерно повышение экспрессии микроРНК-21, отражающее напряженность антиапоптотических и проинвазивных процессов в опухоли [8, 9]. МикроРНК-128 активизирует ряд генов, отвечающих за механизмы подавления опухолевого роста, ингибирования ангиогенеза глиальной ткани, самообновления и пролиферации глиальных клеток [10, 11]. МикроРНК-15, участвуя в процессах супрессии глиом, ингибирует клеточную пролиферацию, инвазию и индуцирует апоптоз [12, 13]. Повышение экспрессии микроРНК-16 способствует подавлению инвазии при ГЦО [14]. МикроРНК-210 участвует в ингибировании апоптоза, высокие уровни ее экспрессии связаны с плохим прогнозом ГЦО [15, 16]. МикроРНК-126 негативно воздействует на пролиферацию и инвазию опухолевых клеток [17]. Гиперэкспрессия микроРНК-34 приводит к подавлению роста опухолевых клеток и снижает их инвазию [18], а экспрессия микроРНК-342 снижает пролиферативную активность опухоли [19].

Между тем, каждая из микроРНК контролирует активность до 3000 различных генов, включая и другие микроРНК, что создает трудности в интерпретации их клинической значимости [20]. Как нами было показано ранее, использование всего трех микроРНК существенно повышает клиническую информативность молекулярногенетического исследования, позволяя эффективно и неинвазивно проводить комплексную оценку состояния патологического процесса при ГЦО [21]. Учитывая ранее полученные результаты, в данной работе мы предлагаем взаимодополняющий подход в оценке уровней взаимной экспрессии расширенной панели микроРНК (микроРНК -15, -16, -21, -34, -126, -128, -210 и -342) с учетом их взаимной активности. Новизна работы связана как с комплемен-тарностью анализируемых параметров экспрессии микроРНК, так и с их интерполяцией на гистотип опухоли, а также нейровизуализационные признаки ее эволюционирования. Это позволяет целенаправленно учитывать сочетанную активность молекулярно-генетических регуляторов апоптоза, пролиферации и инвазивности опухолевых клеток и обеспечивает высокую прогностическую значимость получаемых результатов.

Цель исследования ‒ проверка прогностической значимости предложенной панели комплементарной оценки экспрессии микроРНК-15, -16, -21, -34, -126, -128, -210 и -342 в плазме крови и слюне больных ГЦО с использованием нейрови-зуализационных данных, включая ПЭТ (индекс накопления метионина) в качестве тест-системы для прогнозирования эволюции опухоли.

Материал и методы

Исследование проводили на базе нейрохирургического отделения ИМЧ РАН, общая группа составила 54 человека. Основную группу составили 24 больных супратенториальными злокачественными ГЦО (8 мужчин и 16 женщин в возрасте 41–71 год, средний возраст – 56 лет). При обращении все они были в ясном сознании, состояние по шкале функциональной активности Карновского соответствовало 70 ± 8,95 балла, а по шкале MMSE ‒ 26 ± 3,97 балла. В нейрохирургическом отделении ИМЧ РАН пациентам выполнена краниотомия с субтотальным (75–95 %) удалением опухоли. Полноту удаления опухоли в раннем послеоперационном периоде определяли с помощью МРТ с контрастным усилением.

Оценка данных гистологии и иммуногистохимии проведена по рекомендациям редакции классификации опухолей ЦНС ВОЗ (2021), при этом использовались референтные значения из базы данных центра патоморфологических, иммуногистохимических и лучевых методов исследования онкологических заболеваний РНХИ им. проф. А.Л. Поленова, Санкт-Петербург, РФ [22, 23]. Учитывали следующие параметры: гистотип опухоли, степень злокачественности (Grade I–IV и ICD-O code), индекс пролиферативной активности (ИПА) по экспрессии антител к ДНК-связывающему ядер- ному белку Ki67 в опухолевых клетках: низкий ИПА (в 1–5 % ядер опухолевых клеток), средний (в 5–10 % ядер опухолевых клеток) и высокий (в 10–15 % и выше ядер опухолевых клеток). Гистотипически ГЦО распределились следующим образом: астроцитома – grade III (n=15), олигодендроглиома grade III (n=3), глиобластома grade IV (n=6).

Через 2–4 нед после операции все пациенты клинически были в компенсированном состоянии, по шкале Карновского 80 ± 7,75 балла. Дистанционную лучевую терапию (ЛТ) проводили на базе онкологической клиники МИБС г. Санкт-Петербурга, РФ, в режиме стандартного фракционирования суммарной дозой 55–60 Гр с последующей цикловой монохимиотерапией темозоломидом для опухолей Grade III–IV. Одновременное химиолучевое лечение применяли у пациентов с ГЦО Grade IV. Для уточнения референтов экспрессии микроРНК создана группа контроля (n=30), представленная пациентами с заболеваниями, не связанными с ГЦО (17 женщин и 13 мужчин, средний возраст – 50,2 года). Проведение исследования одобрено комитетом по этике ИМЧ РАН.

Оценку экспрессии микроРНК-15, -16, -21, -34, -126, -128, -210 и -342 для пациентов основной и контрольной групп проводили с использованием плазмы крови и слюны по полуколичественному протоколу StemLoop-RealTime с использованием флуоресцентно меченных проб. В качестве референтного гена использовались показатели экспрессии малой микроРНК U6. Нуклеотидные последовательности праймеров для обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции [24], а также проб приведены в табл. 1 и 2. Относительный уровень экспрессии микроРНК рассчитывался по протоколу 2–ΔΔCt, где –ΔΔСt – разница между расчетными уровнями выхода на плато амплификационных кривых исследуемой микроРНК и геном сравнения U6, полученный результат выражался в условных единицах уровней экспрессии микроРНК [25]. Числовые данные в таблицах представлены как среднее значение ± стандартное отклонение значений уровня экспрессии микроРНК в условных единицах. Также рассчитывались медиана и верхний и нижний квартили.

Cтатистический анализ проводился в два этапа. Для оценки статистической значимости разницы межгрупповых различий использовался непараметрический тест Манна–Уитни с коррекцией на множественность сравнений Бонферрони и тест Краскела–Уоллеса. На втором этапе, перед проведением линейного дискриминантного анализа (ЛДА), с целью приведения вида распределения к

Òàблицà 1/Table 1

Пîñлåдîвàтåльнîñти пðàéмåðîв для îбðàтнîé тðàнñêðипции

The sequence of primers for reverse transcription

микроРНК/microRNA	Последовательности праймеров/The sequence of primers
15	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCACAAA
16	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCCAA
21	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTCAACA
34	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACACAACC
126	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCGTA
128	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAAGAG
210	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTCAGCC
342	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACACGGGT
U6	GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAAAATAT

Òàблицà 2/Table 2

Пîñлåдîвàтåльнîñти пðàéмåðîв и пðîб для ПЦÐ

The sequence of primers and probes for PCR

микроРНК/ microRNA Последовательности праймеров/ The sequence of primers Последовательности проб/ The sequence of probes 15 GACGCCTAGCAGCACATA FAM-TTCGCACTGGATACGACCACAAA-RTQ1 16 CCGGAGTAGCAGCACGTAAAT FAM-TTCGCACTGGATACGACCGCCAA-RTQ1 21 GCCCGCTAGCTTATCAGAC FAM-TTCGCATGGATACGACTCAACA-RTQ1 34 TGGAGTTGGCAGTGTCTTAG FAM-TTCGCACTGGATACGACACAACC-RTQ1 126 CGCGCCCATTATTACTTTTG FAM-TTCGCACTGGATACGACCGCGTA-RTQ1 128 CAGATCGTCACAGTGAACC FAM-TTCGCACTGGATACGAAAAGAG-RTQ1 210 CAGAGTGCTGTGCGTGTGA FAM-TTCGCACTGGATACGATCAGCC-RTQ1 342 GCCCGCTCTCACACAGAAATCGCA FAM-TTCGCACTGGATACGAACCGAT -RTQ1 U6 GCAAGGATGACACGCAAAT FAM-GACAAAAATATGGAACGCTTCACGA-RTQ1 Общий обратный/Common reverse GTGCAGGGTCCGAGGTAT нормальному переменные были логарифмированы. Использовался стандартный метод ЛДА, учитывающий все переменные, и для выбора наилучших, в смысле вклада в дискриминацию, переменных ‒ пошаговый метод с включением переменных. Нулевая гипотеза об отсутствии различий между средними значениями сравниваемых переменных отвергалась при p<0,05 [26].

Результаты и обсуждение

Валидизацию расширенной панели оценки уровней экспрессии микроРНК проводили путем сравнения результатов обследования крови и слюны (c целью достижения максимальной достоверности результатов) в контрольной и основной группах пациентов (табл. 3).

Результаты динамики экспрессии микроРНК в основной группе до и после хирургического удале- ния опухоли (на сроках не менее 2 нед) представлены на рис. 1, 2. До операции уровни микроРНК-21 и -210, ассоциированные с активацией опухолевого процесса, превосходили, а уровни микроРНК-15, -16,-34,-126,-128 и -342, отрицательно влияющие на пролиферацию опухолевых клеток, были статистически ниже контрольных значений (р<0,01).

Пациенты основной группы были разделены на 3 подгруппы, по 8 человек в каждой, на основе следующих критериев: результаты иммуногистохимического исследования ткани удаленной во время операции опухоли – индекс пролиферативной активности (ИПА) и клинико-нейровизуализационные данные МРТ с контрастным усилением и ПЭТ с 11С-метионином через 4 мес после операции. В подгруппе 1 объединены пациенты со стойкой стабилизацией ГЦО (низкая вероятность прогрессирования глиомы): отсутствие повышения метаболической

Таблица 3/table 3

Значимость различий уровней экспрессии микроРНК в общей группе пациентов и группе сравнения MicroRna expression levels in the study and control groups

микроРНК/ microRNA	Группы/Groups		Тест Манна–Уитни/ Mann–Whitney p-value
	Контроль/Control(n=30) Mean ± SD, Median (Q1-Q3)	Пациенты/Patients(n=24) Mean ± SD, Median (Q1-Q3)
microRNA-15к	3,8 ± 1,8 3,3 (2,23–5,1)	2,4 ± 1,1 2,7 (1,5–3,5)	=0,008
microRNA-15с	2,4 ± 1,2 2,0 (1,4–3,1)	0,7 ± 0,3 0,6 (0,5–0,9)	<0,001
microRNA-16к	7314,7 ± 1402,1	3500,0 ± 1264,9	<0,001
	7117,2 (6213,2–8111,5)	3611,6 (2542,2–4561,7)
microRNA-16с	3458,6 ± 945,4	1320,9 ± 503,5	<0,001
	3445,7 (2561,1–4129,2)	1345,1 (1124,3–503,5)
microRNA-21к	166,1 ± 98,1	611,0 ± 180,9	<0,001
	128,2 (88,0–255,2)	597,0 (444,5–722,1)
microRNA-21с	23,5 ± 7,3 22,7 (18,0–28,9)	118,4 ± 113,7 79,9 (61,0–113,0)	<0,001
microRNA-34к	8,6 ± 1,3 8,4 (7,6–9,1)	4,4 ± 1,8 4,0 (3,2–5,8)	<0,001
microRNA-34с	4,3 ± 1,1 4,3 (3,6–5,1)	0,8 ± 0,5 0,7 (0,4–1,1)	<0,001
microRNA-126к	3,1 ± 1,6 2,9 (2,0–3,7)	0,4 ± 0,2 0,5 (0,3–0,7)	<0,001
microRNA-126с	1,9 ± 1,0 1,8 (1,3–2,2)	0,5 ± 0,3 0,5 (88,0–263,8)	<0,001
microRNA-128к	5085,5 ± 1110,1	1828,9 ± 737,7	<0,001
	4809,1 (4304,3–5677,1)	1803,2 (1112,4–2611,7)
microRNA-128с	283,4 ± 108,1	72,8 ± 17,6	<0,001
	276,1 (206,1–398,2)	74,4 (60,7–89,7)
microRNA-210к	37,7 ± 13,2	89,8 ± 32,6	<0,001
	38,0 (29,9–45,6)	87,0 (73,2–97,7)
microRNA-210с	12,6 ± 5,2 12,8 (8,5–17,2)	48,6 ± 29,0 41,1 (28,7–67,2)	<0,001
microRNA-342к	34,8 ± 10,6 33,5 (26,2–42,3)	11,1 ± 3,5 10,2 (9,3–12,1)	<0,001
microRNA-342с	12,7 ± 9,4 7,4 (6,2–16,4)	3,7 ± 1,6 3,5 (2,6–4,2)	<0,001

Примечание: к – уровень экспрессии микроРНК в плазме крови; c – уровень экспрессии микроРНК в слюне.

Notes: к – level of microRNA expression in blood plasma; c – level of microRNA expression in saliva.

Рис. 1. Уровни экспрессии микроРНК в плазме до (1) и после (2) оперативного удаления опухоли (на момент проведения нейровизуа-лизационого исследования):

• А)    микроРНК-15; B) микроРНК-16;

• C)    микроРНК-21; D) микроРНК-34;

• E) микроРНК-126; F) микроРНК-128;

G) микроРНК-210; H) микроРНК-342

Fig. 1. microRNA expression levels in plasma before (1) and after (2) surgical removal of the tumor: A) microRNA-15;

B) microRNA-16; C) microRNA-21;

• D)    microRNA-34; E) microRNA-126;

• F)    microRNA-128; G) microRNA-210;

H) microRNA-342

активности по ПЭТ и признаков опухолевой ткани при нейровизуализации, низкий ИПА. В подгруппу 2 включены пациенты с относительной стабилизацией ГЦО (высокая вероятность прогрессирования глиомы): не менее 25 % уменьшение объема опухоли и/или снижение ее метаболической активности, средний ИПА. В подгруппу 3 включались пациенты с отсутствием стабилизации ГЦО (прогрессирование глиомы с неблагоприятным прогнозом и необходимостью дополнительного лечения): более чем 10 % увеличение размеров опухоли и/или увеличение ее метаболической активности, высокий ИПА. Для формирования значимых молекулярнодиагностических критериев течения заболевания (отбора наиболее информативных статистических переменных для дифференцировки больных по выделенным подгруппам) проводился стандартный линейно-дискриминантный анализ (ЛДА) с априорной равной вероятностью принадлежности к подгруппам. Такой анализ проводился для двух наборов данных в зависимости от анализируемого материала – характеризующих уровни экспрессии микроРНК отдельно в крови и слюне. Далее методом пошагового включения по всему набору переменных (числовые значения уровней экспрессии микроРНК в условных единицах) отбирали те из них, которые дают наиболее высокий процент правильной классификации по подгруппам. Отбор наиболее информативных переменных по комбинированным данным (как по крови, так и по слюне) методом пошагового включения переменных определил набор из 7 переменных: уровни экспрессии микроРНК

Рис. 2. Экспрессия микроРНК в слюне до (1) и после (2) оперативного удаления опухоли (на момент проведения нейрови-зуализационого исследования):

• А)    микроРНК-15; B) микроРНК-16;

• C)    микроРНК-21; D) микроРНК-34;

• E)    микроРНК-126; F) микроРНК-128;

• G)    микроРНК-210; H) микроРНК-342 Fig. 2. microRNA expression in saliva before (1) and after (2) surgical removal of the tumor:

• A) microRNA-15; B) microRNA-16;

• C) microRNA-21; D) microRNA-34;

• E) microRNA-126; F) microRNA-128;

G) microRNA-210; H) microRNA-342

-16, -21, -34, -128, -210 (в крови) и микроРНК -342 и -15 (в слюне). В этом случае правильность классификации по подгруппам была равна 95,9 %. Данные экспрессии микроРНК в этих подгруппах представлены в табл. 4. В табл. 5 сформулированы и сгруппированы модели распределения экспрессии микроРНК по подгруппам в качестве возможных критериев течения заболевания.

Таким образом, если уровни экспрессии генов микроРНК-21 и -210 (ассоциированные с антиа-поптотическими и проинвазивными процессами опухоли, определяющими ее инвазивную активность) были выше референтных значений, отмечалось прогрессирование ГЦО с неблагоприятным прогнозом; в случаях повышения экспрессии лишь одной из микроРНК-21 или -210 констатирована стабилизация опухоли с высокой вероятностью прогрессии; при экспрессии микроРНК -21 и -210, равной или меньше референтного значения, отмечали стойкую стабилизацию, с отсутствием прогрессии на протяжении не менее 4 мес наблюдения. Это подтверждалось отсутствием МР-паттернов продолженного роста и роста индекса накопления 11С-метионина при ПЭТ. При исследовании уровней экспрессии генов микроРНК-15,-16,-34,126,-342 (оценка пролиферативной активности опухоли) было показано следующее: если уровни экспрессии не более четырех из них были ниже референтных значений, то это соответствовало прогрессированию ГЦО с неблагоприятным прогнозом; при уровнях экспрессии не более трех из них ниже референтных значений регистрировали

Таблица 4/Table 4

Сравнение показателей экспрессии микроРНК в группах пациентов с ГЦО (УЕ)

Comparison of miRNA expression levels in groups of patients with CG (UE)

микроРНК/ microRNA	Группа 1/Group 1 (n=8) Mean ± SD, Mediane, Q1-Q3	Группа 2/Group 2 (n=8) Mean ± SD, Mediane, Q1-Q3	Группа 3/Group 3 (n=8) Mean ± SD, Mediane, Q1-Q3	Тест Краскелла–Уоллеса/ Kruskal–Wallis ANOVA by Ranks, p-value
microRNA-15к	1,53 ± 0,67 1,70 (0,80–2,10)	1,33 ± 0,38 1,5 (0,9–1,6)	1,09 ± 0,35 0,9 (0,9–1,3)	p=0,55
microRNA-15с	0,80 ± 0,50 0,8 (0,3–1,3)	0,90 ± 0,56 1,0 (0,3–1,4)	0,64 ± 0,45 0,5 (0,5–0,6)	p=0,90
microRNA-16к	5263,03 ± 365,17 5134,0 (4979,9–5675,2)	1507,10 ± 948,23 1298,7 (680,4–2542,2)	1895,52 ± 1269,77 2301,2 (680,4–2347,0)	p=0,05
microRNA-16с	1717,47 ± 129,60 1788,0 (1567,9–1796,5)	670,23 ± 197,23 570,6 (542,7–897,4)	683,90 ± 409,73 570,6 (456,7–897,6)	p=0,06
microRNA-21к	433,50 ± 11,82 435,0(421,0–444,5)	464,10 ± 12,52 463,3 (452,0–477,0)	645,66 ± 199,52 671,0 (456,0–722,1)	p=0,05
microRNA-21с	51,97 ± 9,24 57,0 (41,3–57,6)	293,30 ± 203,11 398,0 (59,2–422,7)	259,22 ± 199,52 216,70 (87,5–422,7)	p=0,05
microRNA-34к	5,91 ± 1,27 5,8 (4,7–7,2)	3,50 ± 1,81 3,7 (1,6–5,2)	2,85 ± 1,30 3,2 (1,8–3,7)	p=0,08
microRNA-34с	1,00 ± 0,75 0,9 (0,3–1,8)	1,20 ± 1,35 0,8 (0,1–2,7)	0,90 ± 1,02 0,5 (0,4–0,7)	p=0,62
microRNA-126к	0,30 ± 0,20 0,3 (0,1–0,5)	0,12 ± 0,08 0,2 (0,05–0,2)	0,09 ± 0,02 0,1 (0,1–0,1)	p=0,11
microRNA-126с	0,07 ± 0,00 0,07 (0,07-0,07)	0,00 ± 0,00	0,00 ± 0,00	p=1,00
microRNA-128к	2701,07 ± 102,20 2679,0 (2611,7–2812,5)	963,07 ± 162,32 986,5 (790,3–1112,4)	917,50 ± 303,68 790,3 (675,3–1122,4)	p=0,05
microRNA-128с	92,80 ± 4,06 91,3 (89,7–97,4)	75,07 ± 20,95 65,4 (60,7–99,1)	58,12 ± 18,71 60,7 (45,9–75,4)	p=0,08
microRNA-210к	69,57 ± 13,16 76,3 (54,4–78,0)	94,57 ± 6,50 94,3 (88,2–101,2)	118,08 ± 64,86 89,5 (89,1–89,5)	p=0,04
microRNA-210с	24,63 ± 5,16 27,1(27,1–28,1)	64,53 ± 25,94 77,1 (34,7–81,8)	79,14 ± 46,62 77,1 (56,5–79,2)	p=0,06
microRNA-342к	16,90 ± 6,03 15,2 (11,9–23,6)	8,03 ± 2,25 8,2 (5,7–10,2)	9,08 ± 2,10 8,45 (7,75–10,4)	p=0,11
microRNA-342с	5,83 ± 2,72 4,9(3,7–8,9)	3,60 ± 2,34 2,3 (2,2–6,3)	4,68 ± 2,18 4,6 (2,8–6,6)	p=0,10

Примечание: к – уровень экспрессии микроРНК в плазме крови; c – уровень экспрессии микроРНК в слюне.

Notes: к – level of microRNA expression in blood plasma; c – level of expression of microRNA in saliva.

стабилизацию с высокой вероятностью прогрессирования. В случаях, если не более одной микроРНК-15; -16; -34; -126; -342 имела уровень экспрессии ниже референтного значения, верифицировали стойкую стабилизацию опухоли с низкой вероятностью прогрессирования. Если уровень экспрессии микроРНК-128 (оценка метаболической активности опухоли) в слюне и плазме крови больных ГЦО был ниже референтного значения, регистрировали прогрессирование ГЦО с неблагоприятным прогнозом; если он был равен или был ниже референтного значения, то подтверждали стабилизацию опухоли с высокой вероятностью прогрессирования, а в случае, если этот уровень был в норме или выше, то при нормальном уровне экспрессии микроРНК -21 и -210 также отмечали стойкую стабилизацию опухолевого процесса

Заключение

Комплексный подход в оценке уровней экспрессии расширенной панели микроРНК (микроРНК -15, -16, -21, -34, -126, -128, -210 и -342) позволяет учитывать их взаимную активность в молекулярногенетических процессах, определяющих потенциал анапластической перестройки опухоли (регуляция процессов апоптоза, миграционной, пролиферативной и инвазивной активности опухолевых клеток). В результате изучения спектров девиации данных микроРНК на фоне комбинированного лечения ГЦО определены пороговые значения их экспрессии, соответствующие клинически значимым вариантам течения заболевания, подтверждаемые стандартными высокоинформативными диагностическими критериями течения ГЦО (иммуногистохимическое исследование ткани

Таблица 5/table 5

Молекулярные критерии прогнозирования течения заболевания по экспрессии исследуемых микроРНК

Molecular criteria for predicting the course of the disease based on the expression of the studied microRnas

Стойкая стабилизация с низкой

Стабилизация (относительная) с вероятностью прогрессии/

МикроРНК/ Прогрессия, прогноз неблагоприят- высокой вероятностью прогрессии/

Stable stabilization with a low prob

Micro RNA ный/ Progression, poor prognosis Stabilization (relative) with a high ability of progression probability of progression

Инвазивность опухоли/ Invasiveness of the tumor

-21

-210

Обе микроРНК выше референта и в крови и в слюне, либо обе микроРНК повышены только в одном (любом) клиническом материале/ Both miRNAs are higher than the reference level in blood and saliva, or both miRNAs are elevated in only one (any) sample

Не менее одной микроРНК, повышенной в любом клиническом материале (в крови или в слюне)/ At least one miRNA is elevated in blood or saliva

Обе микроРНК имеют нормальный уровень или ниже референта и в крови и в слюне/

Both miRNAs have a normal level or below the reference level in blood and saliva

Пролиферативная способность/ Proliferative ability

-15

-16

-34

-126

-342

Не менее четырех микроРНК ниже референта в любом клиническом материале/

At least four miRNAs below the reference in blood and saliva

Не более трех микроРНК ниже референта в любом клиническом материале/

Not more than three miRNAs below the reference in blood and saliva

Не более одной микроРНК ниже референта в любом клиническом материале/

Not more than one miRNA below the reference in blood and saliva

Метаболическая активность/ Metabolic activity

-128

Выше референта в любом клиническом материале/

Above the reference in blood and saliva

В норме или ниже референта во всех клинических материалах/ Normal or below the reference level in blood and saliva

Клинически не значима при нормальной экспрессии микроРНК-21 и -210/

Clinically insignificant with normal expression of microRNA-21 and -210

опухоли, данные нейровизуализации, ПЭТ с 11С-метионином). Данный подход позволяет выделить группу пациентов с прогностически высокоэффективными и низкоэффективными возможными результатами комплексного лечения церебральных глиом. Для достижения максимальной надежности и достоверности трактовки результатов испытуе- мых микроРНК определение их экспрессии в крови и/или слюне дополняет друг друга. В результате определение экспрессии микроРНК в плазме крови и слюне может стать значимым критерием оценки течения церебральных глиом, что позволяет на любом этапе курации пациентов оценивать в динамике предиктивность прогноза заболевания.