Выявление и анализ различного усеченного фрагмента аллергического белка TBb в гречихе татарской

Аллергенные белки TBb (35kD) с сильной связывающей активностью иммуноглобулина Е (IgE) были выявлены в гречихе татарской. Цель этого исследования состояла в том, чтобы определить самую важную область TBb. Согласно предыдущему исследованию прогнозирования антигенной детерминанты, аллергический белок TBb был разделен на четыре фрагмента и назван F1, F2, F3, F4, соответственно. Ген фрагментов был амплифицирован методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) с использованием праймеров, разработанных согласно TBb кДНК. Четыре экспрессионныx вектора, содержащие ген фрагментов, были построены и затем преобразованы в Escherichia coli BL21 (DE3) в клетке хозяина. Экспрессионные продукты были очищены Ni2 +-NTA при помощи колонки для аффинной хроматографии с использованием агарозы и проанализированы косвенным энзимсвязанным иммуносорбентным анализом (ELISA) с использованием сывороток от аллергенных пациентов. Очищенные белки были получены, и иммунологические результаты показали, что F1 и F2 демонстрируют более сильное соединение иммуноглобулина Е с сывороткой пациента, чем другие фрагменты. Результат означает, что F1 и F2, вероятно, содержат важные антигенные детерминанты в гречихе татарской.