Зависимость морфофункционального состояния печени и роста ампуллярий Pomacea bridgesii от условий среды обитания и типа кормов

В настоящее время в Астраханской области выращивают ампуллярии Pomacea bridgesii. Условия, в которых она выращивается в Астраханской области, значительно отличаются от природных.

Нужно отметить, что морфология и гистология беспозвоночных изучены недостаточно [3]. В литературе содержатся только общие сведения об анатомическом строении брюхоногих моллюсков и отрывочные сведения о гистологическом строении некоторых их органов и тканей.

В связи с этим нами была предпринята попытка более полного изучения влияния условий промышленного выращивания на состояние печени ампулярий.

Материалом исследования для первого эксперимента служили неполовозрелые особи ампуллярий в количестве 18 особей. Опыты проводили в трех десятилитровых аквариумах, в каждом из которых находилось по 6 моллюсков, исходный средний вес которых был равен 2,8 ± 0,6г. Кормили ампуллярий 1 раз в сутки следующим образом: объем корма составлял 10 % их массы. Моллюски получали 3 типа кормов: I опыт – растительная пища (листья лебеды); II опыт – комбикорм для рыб; III опыт – мясо креветок. Опыт проводили в течение двух месяцев. Средний вес моллюсков в конце эксперимента составил в I аквариуме – 12,9 + 0,4г, во II аквариуме – 17,7 + 1,8г, в III аквариуме – 10,3 + 1,6г.

Второй эксперимент предполагал возможность влияния смены воды в аквариумах на половозрелых ампуллярий. В двух 100-литровых аквариумах содержалось по 20 особей массой 35-40г при смене 1/6 части объема воды в первом варианте и 1/2 части – во втором дважды в неделю. Было отмечено, что в первом аквариуме кладок было мало и гидрохимические параметры были хуже, чем во втором аквариуме. Разрушение раковин у моллюсков было отмечено только в первом аквариуме. Взятие материала проводили с помощью анатомического препарирования. Гистологические исследования проводили по общепринятым методикам [1, 2, 4]. Морфометрию трех типов клеток печени проводили под микроскопом Микмед – 1. Микрофотографии получали либо с помощью микроскопа «Olympus», либо цифровой камерой «Olympus» на микроскопе Микмед – 1. С помощью экспресс-метода определяли гидрохимические показатели: концентрацию аммонийного азота и нитритов [5].

В ходе эксперимента было изучено изменение морфофункционального состояния клеток печени в зависимости от:

• I.    Объема заменяемой воды.

Результаты опыта в первом варианте в аквариуме со сменой 1/2 объема воды через 3 дня: исходная масса ампуллярий составляла 37,5 + 1,1г. Ампуллярий содержали при температуре 26,5⁰С в слабощелочной среде рН=7,9; с гидрохимическими показателями: NH 4 (аммонийный азот) – 0,1мг/л (норма N = 0,1–0,2мг/л); NO 2 (нитриты) – 0,2мг/л (норма N = 0,1– 0,2мг/л).

Известковые клетки пирамидальной формы, их базальная часть относительно широкая, часто прозрачная, имеет округлые известковые глыбки. Эти клетки содержат самые крупные, округлые, интенсивно окрашенные ядра.

Печеночные клетки булавовидной формы, ядра их небольшие, в них хорошо видно ядрышко. Цитоплазма содержит довольно крупные гранулы.

Ферментные клетки по форме схожи с печёночными, содержат более мелкие гранулы, собранные в скопления. Соотношение известковых клеток с печёночными и экскреторными 1: 4.

Результаты опыта во втором варианте со сменой 1/6 части объема воды через 3 дня: исходная масса животных составляла 37,5±1,0г. Гидрологические показатели: температуру поддерживали на уровне 26,50С, вода имела слабощелочную реакцию рН–8,0 с гидрохимическими показателями NH4 (аммонийный азот) – 0, 3мг/л (норма N = 0,1–0,2мг/л); NO2 (нитриты) – 0,9мг/л (норма N = 0,1–0,2мг/л). У 5 ампуллярий из 20 в этом варианте смены воды были отмечены повреждения раковины.

В печени ампуллярий с разрушенной раковиной был обнаружен некроз ацинусов печени: разрушено более 30 % площади всех канальцев. Диаметр канальцев уменьшился против нормы. Диаметр полости канальцев также уменьшился. В сохранившихся канальцах объем известковых клеток был больше объема аналогичных клеток ампуллярий контрольных групп. В ацинусах печени наблюдались повреждения базальной мембраны клеток и обширные очаги некроза.

Отмечено изменение формы печеночных и ферментных клеток. Ядра печеночных и ферментных клеток либо отсутствовали, либо находились в пикнотичном состоянии. В полости канальцев встречалось множество кристаллов кальция различного размера.

Соотношение печеночных и ферментных клеток к известковым, число которых уменьшилось, составило 5: 1.

Вокруг разрушенных канальцев отмечено активное разрастание рыхлой неоформленной волокнистой соединительной ткани.

• II.    От типа кормов.

В результате 1 опыта в аквариуме, где неполовозрелые ампуллярии получали растительный корм, со сменой воды через 3 дня прибавка массы составила 10,1г.

В печени был обнаружен некроз ацинусов. Разрушено более 20 % всей площади канальцев. Между канальцами отмечено значительное разрастание жировой ткани, тогда как в норме канальцы вплотную прилегают друг к другу. В печени скапливалось много кристаллов кальция, которые находятся в полости канальцев. В измененных ацинусах печени обнаружено разрушение базальной мембраны известковых клеток и печеночных клеток.

Известковые клетки пирамидальной формы с округлыми, крупными, интенсивно окрашенными ядрами, в их прозрачной цитоплазме встречались округлые известковые глыбки.

Печеночные клетки и похожие на них ферментные клетки – булавовидной формы, ядра в них небольшие. Соотношение известковых клеток к печеночным и ферментным составляет 1:3.

Прибавка массы ампуллярий, получавших комбикорм для рыб, во 2 опыте со сменой воды через 3 дня, составила 14,9г.

В среднем диаметр канальцев печени увеличился в 0,5 раза по сравнению с контролем, диаметр полости канальцев не изменился. Дольки – канальцы прилегали друг к другу очень плотно, что указывает на незначительное количество соединительной и жировой ткани.

Цитоплазма вакуолизирована, ядра клеток не выражены. В цитоплазме клеток содержались глыбки извести неправильной формы,

Цитоплазма печеночных и экскреторных клеток полностью заполнена мелкими гранулами, довольно интенсивно окрашенными, причем, гранулы нивелируют ядра клеток.

Соотношение известковых клеток и печеночных с ферментными составляет 1: 2.

В результате 3 опыта в аквариуме, где неполовозрелых ампуллярий кормили мясом креветок, со сменой воды через 3 дня прибавка массы составила 7,5г.

В печени был обнаружен некроз ацинусов. Дольки – канальцы находились на значительном расстоянии друг от друга, что указывает. В полости канальцев много кристаллов кальция

В ацинусах печени отмечено повреждение базальной мембраны известковых клеток и печеночных клеток.

Высота известковых клеток осталась такой же, как в контроле 48,4 + 0,6 мкм, а ширина уменьшилась до 30,8 + 0,5 мкм.

Форма печеночных и ферментных клеток, содержащих более мелкие гранулы, не изменилась по сравнению с контролем, их высота увеличилась незначительно, ширина осталась такой же. Соотношение известковых и печеночных с ферментными клеток составило 1: 3.

Заключение

Таким образом, совершенно очевидна зависимость как морфофункционального состояния печени, так и роста ампуллярий от условий среды обитания и типа кормов. При накоплении аммонийного азота и нитритов (в вариантах недостаточного обмена воды) наблюдаются нарушения морфофункционального состояния печени и снижение роста животных, а в экспериментах с различными кормами снижение весового прироста.

В зависимости от вида кормов вес улиток спустя 2 месяца максимален в варианте кормления комбикормом для рыб, за ним следует растительный корм и на последнем месте – мясо креветки. В зависимости от вида кормов соотношение клеток печени составило для мясной и растительной диеты 1:3, а комбикорма для рыб 1:2.

В результате анализа состояния клеток печени в хроническом опыте установлено, что при смене 1/2 объема воды аквариума, наблюдалось нормальное состояние известковых, печеночных и ферментных клеток. Соотношение известковых клеток и печеночных с ферментными 1:4.

При смене 1/6 части объема воды наблюдался некроз ацинусов печени и базальной мембраны клеток, выстилающих канальцы, Изменялась форма клеток печени, появлялось значительное количество безъядерных клеток и клеток с пикнотичным ядром. Отмечено появление скоплений кристаллов кальция в полости канальцев, уменьшение количества известковых клеток, разрушение раковины. Соотношение известковых клеток и печеночных с ферментными составило 1:5.

Таким образом, на основе морфологических исследований выращивания моллюсков Pomacea bridgesii в условиях аквакультуры можно рекомендовать:

• 1)    частую смену воды, желательно в полном объеме;

• 2)    кормление комбикормом для рыб;

• 3)    постоянный контроль за гидрохимическими показателями.