Аберрантное метилирование ДНК и полиморфизм генов ферментов метионинового и фолатного циклов у больных миелодиспластическим синдромом

Аберрантное метилирование промоторных областей некоторых генов, участвующих в регуляции процессов клеточной дифференцировки и пролиферации, играет важную роль в патогенезе онкогематологических заболеваний. Ферменты метионинового и фолатного циклов задействованы в процессе метилирования ДНК, обеспечивая синтез метаболитов, выступающих в качестве доноров метильных групп. В связи с этим представляется актуальным изучение взаимосвязи статуса метилирования ДНК и полиморфизма генов ферментов метионинового и фо-латного циклов при различных гемобластозах, в частности, у больных миелодиспластическим синдромом (МДС).

Цель . Изучить взаимосвязь частоты встречаемости (ЧВ) аллелей и генотипов основных ферментов фолатного и метионинового метаболических циклов и профиля аберрантного метилирования промоторных областей ряда генов супрессоров опухоли у больных МДС.

Материалы и методы. В качестве материала исследования использовали образцы геномной ДНК, полученные в дебюте заболевания от 51 больного МДС (24 мужчины и 27 женщин, средний возраст 62,4 года). Контрольную группу составил 121 донор крови (73 мужчины и 48 женщин). Идентификацию полиморфизма генов метилентетрагидрофолат редуктазы (МТHFR, С677Т и A1298C), метионин синтазы (MS, A2756G), редуктазы метионин синтазы (MTRR, A66G) и метилентетрагидрофолат дегидрогеназы (MTHFD, G1958A) осуществляли с помощью ПЦР и последующего рестрикционного анализа. Аберрантное метилирование промоторных областей генов SOX7, p15^INK4b, SFRP1, SFRP4 и SFRP5 исследовали с помощью метил-специфической ПЦР. Статистическая обработка результатов проводилась по точному методу Фишера, с использованием показателя “отношения шансов” (OR – odds ratio) и р-значения.

Результаты. Аберрантное метилирование не более двух генов (0–2 МГ) было обнаруже- но у 21 пациента (9 мужчин и 12 женщин) и 3–5 генов (3–5 МГ) — у 30 человек (15 мужчин и 15 женщин). Доля больных с генотипом MTRR66 GG была значительно выше в группе с 0–2 МГ, чем в группе с 3–5 МГ (47.6 % против 13.3 % соответственно, OR = 5.9, 95 %CI: 1.5–22.9, p = 0.011). Гомозиготный вариант гена MTHFR (1298 CC) встречался у 6 пациентов в группе с 3–5 МГ и только у 1 пациента в группе с 0–2 МГ (20.8 % против 4.8 % соответственно, OR = 5.0, 95 %CI: 0.6–45.1, p = 0.2). Доля пациентов с генотипом MTRR66GG и одновременным носительством аллеля MTHFR677T оказалась в 3 раза выше в группе с 0–2 МГ по сравнению с пациентами из группы с 3–5 МГ (33.3 % против 10.0 % соответственно, OR = 4.5, 95 %CI: 1.0–20.1, p = 0.07).

Носительство аллеля MTHFR677T обнаруживалось у мужчин в группе с 0–2 МГ в 3 раза чаще, чем у женщин из той же группы (100 % против 33.4 % соответственно, OR = 35.9, 95 %CI: 1.7–77.0, p = 0.005), а также значительно чаще, чем в группе мужчин с 3–5 MГ (100 % против 46.7 %, соответственно, OR = 21.5, 95 %CI: 1.2– 437, p = 0.01). В то же время, не было выявлено значительных отличий в ЧВ аллеля MTHFR677T у женщин в группах с 0–2 МГ и с 3–5 МГ (33.4 % против 46.7 % соответственно, OR = 1.8, 95 %CI: 0.4–8.4, p = 0.7).

Выводы. При стратификации группы больных МДС по числу метилированных генов (0–2 МГ против 3–5 МГ) анализ аллельного полиморфизма генов ключевых ферментов метионинового и фолатного циклов позволил выявить ряд интересных особенностей, свидетельствующих об их вовлечении в процессы аберрантного метилирования ДНК. Дальнейшие исследования в данном направлении представляются перспективными, как с точки зрения выяснения молекулярных механизмов патогенеза МДС, так и с целью совершенствования подходов к его лечению.